1 . 如图是科学家研究良种奶牛快速繁殖的过程示意图。

请据图回答下列问题：
(1)克隆牛G的性别是____。
(2)从良种公牛A和良种母牛B采集的精子和卵母细胞，要分别在体外进行成熟培养和_____，然后才能用于体外受精。对良种母牛B进行激素处理的目的是_____。
(3)为了获得多个基因型相同的后代，可对早期胚胎进行________。
(4)胚胎移植时，代孕母牛D和F需要具备的条件是_____（答出两点即可）。
(5)克隆牛G的遗传性状与母牛B基本相同，但又不完全相同。其差异形成原因是____（答出两点即可）。

2 . 克隆羊“多莉”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。

(1)过程A表示_____，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由[①]_____细胞提供细胞质，进行人工重组。
(2)经过程B得到的结构中，内细胞群_____（填标号）是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞．在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并保持_____状态。
(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有_____。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是_____的结果。
(4)对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？_____。

3 . 野化单峰骆驼原产于北非和亚洲西部及南部，多年前野生单峰骆驼就已经灭绝，仅圈养条件下还有部分驯养单峰骆驼存在。近几年，在我国戈壁无人区，科学家又发现了野化单峰骆驼小种群，由于数量极少，科学家欲通过胚胎移植等方法拯救野化单峰骆驼，技术流程如图所示。回答下列问题：

(1)上述图解中涉及到的生物学技术有______、______、______。
(2)若a为体外受精，则在这之前要对采集的卵母细胞培养至______时期；还需要对精子进行______处理，对受体野化单峰骆驼要进行______处理。
(3)若通过染色体测定对野化单峰骆驼进行性别鉴定，选择______细胞。测定的结果是看该细胞中______。
(4)图中c过程，应选择______或______期的胚胎，后者在进行分割时要注意将______。在进行过程b或d之前______（填“需要”或“不需要”）是否需要对受体进行免疫检测。
(5)胚胎移植后，经受体孕育的后代，其遗传特性与______（填“供体”或“受体”）一致。

5 . 在体细胞克隆猴的培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10 s之内对卵母细胞进行去核操作，在15 s之内将体细胞注入去核的卵母细胞。有评论者认为该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如图所示，请结合图示回答问题。   

注：Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂，二者可以调节基因的表达，促进囊胚的发育，提高代孕母猴的妊娠率。
(1)采集卵子之前，需给母猴注射适量的_____，以增加排卵。卵母细胞需培养到_____期，再通过_____法去除细胞核，得到去核卵母细胞。
(2)重构胚的发育类似正常的早期胚胎发育，培养液的成分除了有机盐、氨基酸、无机盐等营养物质以外，还需添加_____。代孕母猴对移入子宫的重构胚_____，这为胚胎在受体内的_____提供了可能。
(3)胚胎移植的实质是_____。胚胎分割可以增加胚胎数量，在对囊胚进行分割时要注意_____。

6 . 某种遗传物质缺陷型模型鼠有较高的科研价值，但自然繁殖率较低，科研人员利用该模型鼠的体细胞转化获得诱导iPS细胞，进而对该模型鼠进行克隆，相关流程如下图所示。请回答下列问题：

(1)图中①过程，科学家将Ocl3/4、Sox2、c-Myc和KJf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，然后在培养ES细胞的培养基上培养这些细胞，进而获得iPS细胞。从转基因技术所用“工具”的角度分析，上述“逆转录病毒”的用途是___。
(2)图中②过程运用了显微注射技术，请列举运用了显微注射技术的其他操作：___（答出1点即可）。
(3)从灰鼠的___（填“输卵管”或“子宫”）内可获得双细胞胚，作此判断的依据是___。
(4)囊胚的___将来可以发育成胎儿的各种组织。图示克隆仔鼠的体色为___。经③过程后，重构胚会在代孕白鼠的子宫内孵化，孵化指的是___。

7 . 抗凝血酶Ⅲ在人体中主要由肝脏合成，是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子。研究者将人的抗凝血酶Ⅲ基因导入奶山羊细胞，获得乳汁中含有大量人抗凝血酶Ⅲ的转基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白广泛存在于哺乳动物的乳汁中。回答下列问题：
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因：从人的肝细胞中提取mRNA，再通过_________获取cDNA，利用PCR扩增目的基因。根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列，设计2种特异性引物，在PCR过程中，引物的作用是_________。
(2)基因表达载体的构建：重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子等结构组成，其中_________决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)成纤维细胞的转化：取幼龄雌性动物的组织，经酶处理后获得成纤维细胞悬液，放在动物细胞培养液中培养，从幼龄动物取材的原因是_________。然后用_________法将基因表达载体导入成纤维细胞。
(4)转基因奶山羊的获得：从奶山羊中获取卵母细胞，将阳性转基因成纤维细胞注入_________，通过电融合法使两细胞融合，供体进入卵母细胞，形成重构胚。常通过_________（填物理方法）激活重构胚。经胚激活，培养获得早期胚胎，胚胎移植前，需要用孕激素对受体母羊进行同期发情处理。
(5)克隆羊的鉴定：取少量克隆羊组织细胞提取DNA，将用_________处理后的产物进行电泳，检测目的基因是否成功导入。待克隆羊成年并产奶，收集奶样，可用_________技术鉴定克隆羊是否成功表达人抗凝血酶Ⅲ。若最终获得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地完成其功能，可利用_________工程进行改造。

8 . 随着科学技术的发展，人们可以根据人类的需求来改造生物的性状。
（一）如图是利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的图解，据图回答下列问题：

(1)细胞培养所需气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是________。
(2)提供细胞质的卵母细胞通常采用_______________操作去除卵母细胞的核。
（二）风肉一般是以鲜肉为原料，用食盐腌制后，经风干和微生物后发酵而成。在后发酵期，风肉含有耐盐的微生物。某实验小组为研究耐盐微生物的耐盐基因，设计实验如下。回答下列问题。
(3)实验小组为获得耐盐纯培养物A，使用的培养基应是__________（选填“普通培养基”或“选择培养基”），使用的接种方法是__________。
(4)为获得纯培养物A的耐盐基因X，实验小组应用纯培养物提取了DNA。在一定温度下，用二苯胺试剂对DNA进行检测，二苯胺检测DNA的原理是__________。获得PCR产物后，用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定，影响DNA分子迁移速率的主要因素有__________（答出两点即可）。
(5)构建成功的表达载体将运用农杆菌介导技术转入某农作物，可获得耐盐转基因植株。与同种非转基因植株的染色体DNA序列相比，转基因植株的染色体DNA含有__________。为验证已获得的耐盐转基因植株具有耐盐性，需设计实验。写出实验思路________________。

9 . “三亲婴儿”是“三合一”胚胎人工授精技术诞生的婴儿，含有“一父两母”三人的遗传物质，可有效防止某些遗传病的发生。据图回答下列问题：

   

(1)由于女性的自然生理周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射__________来促进排卵，收集的卵母细胞必须培养到__________。核移植前还需对受体卵母细胞进行显微操作去核，其目的是_________。
(2)精子在受精前必须获能，卵母细胞与精子体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。获得的早期胚胎移植到胚胎受体前，需要对胚胎受体进行_________处理。
(3)“三亲婴儿”的培育技术能避免母亲___________（填“线粒体遗传病基因”或“红绿色盲基因”）传递给后代。
(4)根据“三亲婴儿”培育过程，思考如何用胚胎干细胞替换掉衰老或病变细胞并避免免疫排斥达到治疗疾病的目的（胚胎干细胞可以利用核移植获得），写出简要的实验思路：__________。

10 . 荧光蛋白GFP在紫外线或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可以用于检测细胞中目的基因的表达。科研团队将人β-酪蛋白基因与GFP基因连接，获得了β-酪蛋白-GFP融合基因（简称甲），将其插入质粒P0，构建了基因表达载体P1，其部分结构如图所示，图中E1、E2为两种限制酶酶切位点。回答下列问题：

(1)构建融合基因甲时需要将β-酪蛋白基因编码链（转录时与模板链互补的DNA单链）的___端与GFP基因编码链的___端相连。为保证甲的完整性及其与质粒PO正确连接，实验中选择的限制酶E1和E2必须满足的条件是___（答两点）。基因表达载体P1除了具有图示结构外，还应具备的结构有___。
(2)若编码β-酪蛋白的DNA片段序列是：5′-TTCGCTTCT……CAGGAAGGA-3′，扩增该基因时，在PCR仪中加入的引物的碱基序列为___。
(3)科研团队将P1转入山羊乳腺细胞后，在该细胞中观察到了绿色荧光。为获得能生产β-酪蛋白的山羊，还应该完成的主要工作包括：将能够产生绿色荧光的___移入___中，体外培养至___时期，再进行胚胎移植等。其中，进行体外胚胎培养时所需的气体环境是___。
(4)检查生产人β-酪蛋白的转基因山羊是否培育成功，还需要进行分子水平的检测，利用PCR技术可以检测___（答两点）。