22. PCR技术可用于扩增目的基因、引入定点突变等。大引物PCR定点诱变技术的操作过程如图所示。回答下列问题:
(1)PCR过程中,温度的控制至关重要。若变性温度过低,则会因
___导致反应效率降低;若退火温度过高,则会因
___导致目标产物的量减少。利用PCR技术扩增目的基因时,需要加入引物的原因是
___。一般还要向PCR反应缓冲溶液中添加Mg
2+,目的是
___。
(2)进行大引物PCR定点诱变时,需要进行两轮PCR(PCR1和PCR2)。在PCR1中,至少需要经过
___个循环才能获得图中所示大引物。在PCR2中,若要获得带有突变位点的改良基因,则应选择的引物是
___(填“①”或“②”)。
(3)PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。凝胶中DNA分子的迁移速率与
___(答1点)有关。若在某次利用PCR扩增目的基因后,发现有除目的基因外的其他DNA片段存在,可能的原因是
___(答2点)。