1 . 科学研究离不开实验，下列实验中的操作方法能达到实验目的的是（　　）

A．在植物体细胞杂交技术中，采用灭活的病毒诱导原生质体融合

B．在探究温度对淀粉酶活性的影响时，用斐林试剂检测反应产物

C．在培养基中加入刚果红，根据透明圈的大小判断尿素分解菌的分解能力

D．在谷氨酸发酵中，通过控制发酵条件为中性或弱碱性来积累谷氨酸

2 . 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，以便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓CATCC—；限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。据图判断，下列操作正确的是（       ）

A．质粒用限制酶I切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶I切割

C．目的基因和质粒均用限制酶I切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

3 . 科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力的研究，部分实验流程如图1所示。

回答下列问题：
(1)步骤①土样最好取自___（填“表层”或“深层”）土壤。若在④的平板上统计的菌落数分别为28、61、59、50、54个，则每克土壤中含有的自生固氮菌为___个。
(2)Ashby培养基具有从混合菌中富集分离自生固氮菌的作用，该培养基应该添加的主要营养物质有___。
(3)筛选自生固氮菌菌株时，在固氮菌大菌落四周出现了少量杂菌小菌落，进一步研究表明这些杂菌不能利用空气中的氮气，则其氮源来自于___。
(4)对不同土壤样品重复分离过程，得到HY-4、MZ-1、JB-2三个纯化的自生固氮菌品种，利用这三个品种研究pH对其生长情况的影响，得到如下表所示结果。

pH OD值 品种	pH=6.5	pH=7.5	pH=8.5	pH=9.5	pH=10.5	pH=11.5
HV-4	0.242	0.419	0.687	0.570	0.463	0.304
MZ-1	0.272	0.424	0.719	0.585	0.470	0.347
JB-2	0.283	0.432	0.739	0.597	0.495	0.433

（注：OD值表示吸光度。OD值越大，表明菌株固氮能力越强。）
根据以上结果，可以得出的结论是：___。
(5)固氮菌固氮基因的部分结构及功能如图所示：

启动子位于固氮酶结构基因的___（填“上游”或“下游”），其功能为___，研究表明nifA的表达产物对固氮基因σ⁵⁴依赖型启动子的表达是必须的，而有铵时会激活nifL，此时固氮菌的固氮过程将___。

4 . 下图是生态学家对佛罗里达州的银泉进行生态系统营养级和能量流动情况的调查结果。GP表示生物同化作用所固定的能量，NP表示生物体内贮存的能量，R表示生物呼吸消耗的能量。下列说法正确的是（　　）

A．流经该生态系统的总能量为88.3×102大卡/（米2·年）

B．能量在第三营养级和第四营养级之间的传递效率约为5.5%

C．如果要增加营养级的数目，则需要先增加生产者的生产量和降低NP/GP的比值

D．若该生态系统维持现有的能量输入和输出水平，则系统内有机物的总量将会减少

5 . THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述不正确的是（　　）

EcoR Ⅰ	BamH Ⅰ	Kpn Ⅰ	Mfe Ⅰ	Hind Ⅲ

A．若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则第n轮复制共需要引物2n-2个

B．构建基因表达载体时用MfeI、HindⅢ切割质粒，用EcoRI、HindⅢ切割目的基因

C．利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物2和引物3

D．DNA聚合酶将4种脱氧核苷酸加到引物的3'端

6 . HER2蛋白是人类表皮生长因子受体，在细胞生长发育及分化过程中起重要作用，HER2蛋白过量表达会导致细胞功能紊乱，常与肿瘤的发生发展密切相关。
(1)用纯化的HER2蛋白多次免疫小鼠，取免疫小鼠的___细胞与骨髓瘤细胞杂交，用___筛选获得杂交瘤细胞，该细胞的特点是___。对杂交瘤细胞进行多次___，获得能分泌所需抗体的细胞。提取该细胞的总RNA，将mRNA逆转录成cDMA，以cDNA为模板进行___获得大量抗体可变区（结合抗原区）基因序列，将人抗体基因的恒定区基因序列与其相连，用___酶构建人源化抗体表达载体，导入人胚肾细胞，实现人源化抗HER2抗体的体外生产。最后通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合，制备出ADC。
(2)为探究荷载不同种类药物的ADC的杀伤力，研究人员将等量的药物E、F、E+F分别连接到同种抗体上，制备了三种ADC，并对表达HER2的乳腺癌细胞株（HER2+）和不表达HER2的乳腺癌细胞株（HER2-）进行了体外毒性实验，结果如图。

①为与实验组形成对照，对照组应添加等量的___。
②该实验的结论是___。

7 . 湖北五道峡省级自然保护区自然资源和濒危物种极为丰富，保存有大面积的原始森林，是世界野生牡丹的模式产地。科研工作者对保护区内野生牡丹的生态保护情况展开了下列研究：
(1)研究人员在某条溪流两侧沿岸各选取了10m×10m的10个样方，记录数据如下：

样带	野生牡丹个体数
	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
左岸	7	8	5	10	6	6	7	4	5	6
右岸	9	6	10	7	8	11	5	8	5	4

调查时样方的选取应遵循___原则，样方位置的选取采用___（填“五点”或“等距”）取样法，表中野生牡丹的种群密度为___株/m²。
(2)在获得上述数据的同时研究者还对每株野生牡丹的高度进行了测定，并按高度划分为五组，具体划分方法及测定数据见下图。

野生牡丹的生长主要体现在植株高度（茎高）增加方面，因而以上数据主要反映的是野生牡丹种群特征中的___，从结果可以预测该地野生牡丹种群数量将___。
(3)研究野生牡丹的生态位，通常要研究它在研究区域内的___（至少写出两种）等特征，以及它与其他物种的关系。
(4)每年4月中旬到5月之间，当日照时间超过10个小时风景区内野生牡丹开始开花，由此可见信息的传递有利于___。风景区野生牡丹盛开吸引大批游客前来参观，带动了当地旅游业的发展，但同时也要保护当地自然环境，减少人类活动对当地野生动植物的干扰，这是遵循了生态工程的___原理。

8 . 我国饮用水标准规定：1000ml水体中不超过3个大肠杆菌。为了检测某学校直饮水中大肠杆菌的数量，按下表配制培养基进行实验。下列说法不正确的是（　　）

蛋白胨	乳糖	蔗糖	K2HPO4	伊红	亚甲蓝	蒸馏水	琼脂
10g	5g	5g	2g	0.4g	0.065g	100mL	15g

（注：生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色）

A．稀释涂布平板法对大肠杆菌进行计数时，统计的菌落数可能比活菌实际数目少

B．检测时需要设置对照组：平板用无菌水涂布或者不进行涂布

C．直饮水中大肠杆菌数目非常少，检测时不需要对直饮水进行梯度稀释

D．若培养结果显示除了深紫色菌落还有其他菌落存在，说明培养基未彻底灭菌

9 . 育种工作者将两种不同的枯草芽孢杆菌进行融合，筛选出成功融合并能稳定遗传的菌种，具有重要的遗传学意义和巨大的经济效益。下列关于操作流程叙述不正确的是（　　）

A．首先将菌种接种至液体完全培养基中，振荡培养至一定数量

B．在培养基中加入一定量的青霉素，使用纤维素酶和果胶酶处理去壁

C．加入PEG和Ca2+诱导原生质体融合，然后涂布在高渗培养基上使其再生

D．在双亲原生质体制备过程中向酶解液中加入不同荧光色素使其形成带有荧光色素的原生质体，若菌体同时观察到两种不同荧光，即可判断为所需细胞

10 . 科学家尝试了两种生产蛛丝蛋白的方法，具体如下：   

下列相关叙述不正确的是（　　）

A．步骤②中需要使用的基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶

B．重组蛛丝蛋白基因通过③导入受体细胞，通常用Mg2+处理大肠杆菌

C．将重组蛛丝蛋白基因通过⑥导入受体细胞最常用的方法是显微注射法

D．步骤⑦中需要运用到的技术有胚胎体外培养、胚胎移植