1 . 体细胞核移植已在很多物种中取得成功，但其效率较低，只有不足4%的重构胚能发育成健康的个体，原因可能是胚胎的基因表达异常所致。下图为提高克隆牛重构胚发育的技术流程，其中TSA为组蛋白脱乙酰化酶抑制剂。请回答以下问题：_____ 处理，进而实现传代培养。
(2)采集的卵母细胞需要培养至_____ 时期，去除的“核”实际上是指_____ 。除了使用图中的显微操作法去核，还可使用梯度离心、_____ 和化学物质处理等方法去核。
(3)胚胎移植前需要对代孕母牛进行_____ 处理。一般选择发育至_____ 时期的胚胎进行移植。
(4)一次核移植技术后，若需要获得更多克隆小牛，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意_____ 。
(2)采集的卵母细胞需要培养至
(3)胚胎移植前需要对代孕母牛进行
(4)一次核移植技术后，若需要获得更多克隆小牛，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时要注意
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63次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
解题方法
2 . “蓝白斑筛选”是一种基于质粒载体的DNA重组技术，它可通过改变质粒载体中的DNA序列，实现对菌落颜色的调控，如图所示。回答下列问题：
(1)构建重组载体时，应将目的基因插入到质粒的_____ 之间。将外源DNA片段与质粒连接成重组质粒时，所用的酶催化形成的化学键是_____ 。试从限制酶的角度提出一条避免载体自身环化的方法：_____ 。
(2)将重组质粒转入大肠杆菌前，需在低温﹑低浓度的_____ 溶液中处理大肠杆菌，目的是_____ 。
(3)在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，培养基中应加入_____ 。培养一段时间的平板上，含有重组质粒的大肠杆菌菌落呈白色的原因是_____ 。与“氨苄青霉素”筛选相比，“蓝白斑”筛选的优点是_____ 。
氨苄青霉素 | |
未导入质粒 | × |
导入空白质粒 | √蓝色菌落 |
导入重组质粒 | √白色菌落 |
(1)构建重组载体时，应将目的基因插入到质粒的
(2)将重组质粒转入大肠杆菌前，需在低温﹑低浓度的
(3)在筛选导入重组质粒的大肠杆菌时，培养基中应加入
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39次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
3 . 为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图，回答下列问题：_____ 。
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基_____ 。
(3)纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_____ 。
(4)④的平板上统计结果数一般用菌落数表示，一般选择数目 30-300在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验，统计的菌落数分别是132、136、128，则每克土壤中含有的固氮菌为_____ 个，运用这种方法统计的结果往往较实际值_____ 。原因是_____ 。除此之外还可以用_____ ，但运用这种方法统计的结果往往较实际值偏大。
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有_____ （填字母）。
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基
| 培养基类型 | 培养基组分 |
| 培养基甲 | 甘露醇、 、 、NaCl、 、 、蒸馏水 |
| 培养基乙 | 甘露醇、、、NaCl、、、蒸馏水、琼脂 |
(3)纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是
(4)④的平板上统计结果数一般用菌落数表示，一般选择数目 30-300在范围的平板上计数。若甲研究员做这个实验，统计的菌落数分别是132、136、128，则每克土壤中含有的固氮菌为
(5)图3是某同学利用不同于图1方法从稀释液中分离菌株的示意图。下列对其操作及结果的叙述不正确的有
b.划线时将沾有菌种的接种环插入培养基
c.只有在5这一区域中才能得到所需菌落
d.整个过程需要对接种环进行6次灼烧
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66次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
解题方法
4 . EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内，多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如下图所示。_____ （填“是”或“不是”）单一抗体，据图分析判断依据是_____ 。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时，选用_____ 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下：_____ ，融合后将获得_____ 种细胞（只考虑细胞两两融合的情况）。用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得_____ 。将其接种到96孔板，进行_____ 培养和_____ ，目的是获得_____ 。
(4)图中体外的扩大培养，是从_____ 中获取大量的单克隆抗体。除此之外还可以使用的方法是_____ ，该单克隆抗体具有的优点是能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性识别，并且可大量制备。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时，选用
(4)图中体外的扩大培养，是从
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97次组卷
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4卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
解题方法
5 . 花椰菜（2n=18，用MM表示）属十字花科，经人工长期定向选育，对黑腐病无抗性。黑芥（2n=16用，NN表示）为花椰菜近缘野生种，对黑腐病等多种常见病害具有抗性。我国科学家将黑芥叶肉原生质体和花椰菜下胚轴原生质体融合，获得了抗黑腐病的杂合新植株（过程如下图）：请回答下列问题：_____ ，诱导过程常用的物理方法是_____ （两种），融合成功的标志是_____ 。
(2)图②是图①经脱分化后形成的愈伤组织。由图②经_____ 过程形成图③，细胞呈现特定的结构和功能，该过程的实质是_____ ，原理是_____ 。
(3)给予光照，在培养一定天数后，用显微镜观察细胞中是否存在_____ （细胞器），作为早期鉴别杂合细胞的标志，初步筛选出融合细胞。获得的融合细胞染色体组成为_____ （用字母M和N表示），染色体数为_____ ，染色体组数为_____ 。
(4)请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法_____ 。
(5)与传统的有性杂交方法相比，植物体细胞杂交技术的主要优点是_____ 。
(2)图②是图①经脱分化后形成的愈伤组织。由图②经
(3)给予光照，在培养一定天数后，用显微镜观察细胞中是否存在
(4)请说出鉴定新植株是否抗黑腐病的方法
(5)与传统的有性杂交方法相比，植物体细胞杂交技术的主要优点是
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51次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
解题方法
6 . 对下列图示的生物学实验的叙述正确的是（ ）
| A．若图①表示将镜头由a转换成b，则视野变明亮，观察到的细胞数目也增多 |
| B．若需放大观察图②中的c细胞，则只需向左方移动装片即可 |
| C．若图③是在显微镜下观察细胞质流动，发现细胞质的流动方向是顺时针，则实际上细胞质的流动方向是逆时针 |
| D．若图④是在显微镜目镜为10×，物镜为10×下观察的，视野中被相连的64个分生组织细胞所充满，目镜不变，物镜换成40×时，则视野中可检测到分生组织细胞数为4个 |
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169次组卷
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4卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
7 . THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述正确的是（ ）
| EcoRⅠ | BamHⅠ | KpnⅠ | MfeⅠ | HindⅢ |
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| A．若采用PCR技术对一个THP9基因进行扩增，则复制n代共需要引物2n-1个 |
| B．构建基因表达载体时，用Mfe Ⅰ、Hind Ⅲ切割质粒，用EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ切割目的基因 |
| C．利用PCR技术扩增THP9基因时应选择引物1和引物4，子链的5＇端向3＇延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关 |
| D．PCR过程中用到了缓冲液，缓冲液中一般要添加Mg2+用于激活RNA聚合酶 |
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87次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
解题方法
8 . 下列有关DNA的粗提取与鉴定的叙述，错误的是（ ）
| A．以香蕉、人成熟的红细胞为实验材料也可以取得较好的实验效果 |
| B．DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，从而可以进一步纯化DNA |
| C．预冷的酒精可以有效降低DNA酶活性，保证DNA的有效提取 |
| D．溶解在2mol/LNaCl溶液的DNA，加入二苯胺试剂后在沸水浴条件下呈蓝色 |
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56次组卷
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3卷引用：甘肃省兰州市城关区第一中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
9 . 人类ABO血型是由9号染色体上IA、IB和i（三者之间互为等位基因）决定。红细胞表面的抗原合成路径如图1所示。孟买型由12号染色体上H基因突变导致，在血型检测中与A、B抗体均无法产生阳性反应，常被误判为O型。图2为发现的第一例孟买型所在家庭的系谱图（不考虑突变）。下列叙述错误的是（ ）
| A．Ⅱ-1与I-2基因型相同的概率为1/3 |
| B．I-1基因型为HhIBi，Ⅱ-3血型为孟买型 |
| C．孟买型的病人只能接受孟买型捐献者的输血 |
| D．Ⅲ-2与同基因型的女性婚配生一个AB型女儿的概率是3/16 |
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173次组卷
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5卷引用：2024届甘肃省张掖市某校高三下学期适应性考试生物试卷
名校
解题方法
10 . 某牧区气候恶劣，生态系统脆弱，境内生活着国家一级保护动物荒漠猫。该牧区的草原湿地泥炭层深厚，是生态系统物质循环的重要载体之一，也是重要生态屏障。
(1)若要研究该牧区荒漠猫的生态位，通常需要研究它的______ （答出两点即可）。
(2)该牧区草原湿地含有丰富的土壤有机碳（SOC），其主要来源是_____ 。微生物通过分泌水解酶作用于SOC，产物一方面吸收后用于______ ，方面用于呼吸作用满足自身能量所需。
(3)为了探究湿地水位变化对土壤碳含量变化的影响，研究人员取不同水位土样添加一定量13C标记的葡萄糖，在相应水位条件下培养一段时间，然后测定土壤SOC和13C标记的微生物有机碳含量（MBC）。若培养时间过长，所测得MBC值通常______ （填“偏高”或“偏低”）；检测结果表明，水位下降会降低土壤SOC而提高MBC，请从微生物分解和合成代谢的角度给出合理的解释：水位下降导致土壤透气性增强，______ 。
(4)在现有技术条件下，维持该牧区一个人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的草地、耕地、建筑用地等面积称为______ 。由表可知，该牧区出现了明显的生态赤字，且呈现______ 趋势，为了避免生态环境进一步恶化，逐步实现可持续发展，请结合当地情况提出一条降低生态赤字的有效建议：______ 。
该牧区资源需求、供给总量（单位：hm2/人）
(1)若要研究该牧区荒漠猫的生态位，通常需要研究它的
(2)该牧区草原湿地含有丰富的土壤有机碳（SOC），其主要来源是
(3)为了探究湿地水位变化对土壤碳含量变化的影响，研究人员取不同水位土样添加一定量13C标记的葡萄糖，在相应水位条件下培养一段时间，然后测定土壤SOC和13C标记的微生物有机碳含量（MBC）。若培养时间过长，所测得MBC值通常
(4)在现有技术条件下，维持该牧区一个人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的草地、耕地、建筑用地等面积称为
该牧区资源需求、供给总量（单位：hm2/人）
土地类型 | 2013年 | 2015年 | 2017年 | 2019年 | ||||
需求 | 供给 | 需求 | 供给 | 需求 | 供给 | 需求 | 供给 | |
草地 | 2.700 | 0.222 | 2.970 | 0.216 | 3.122 | 0.208 | 6.014 | 0.209 |
耕地 | 0.030 | 0.010 | 0.039 | 0.009 | 0.039 | 0.007 | 0.036 | 0.007 |
建筑用地 | 0.0024 | 0 | 0.0029 | 0 | 0.0039 | 0 | 0.0054 | 0 |
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85次组卷
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3卷引用：2024届甘肃省张掖市某校高三下学期适应性考试生物试卷
