蛋白胨 | 10g |
牛肉粉 | 3g |
氯化钠 | 5g |
脱纤维羊血 (含多种生长因子) | 50mL |
琼脂 | 15g |
去离子水 | 1000mL |
(1)据表分析“血琼脂培养基”属于
①通用培养基 ②选择培养基 ③固体培养基 ④液体培养基
(2)为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌,将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面,用无菌玻璃刮铲涂匀,这种接种方法称为
(3)制备图1中的液体培养基时需采取
(4)据图1分析,接种可疑菌后,经35℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是
(5)对排除的疑似患者及易感人群,可采取的最有效的预防措施是
2,4-二甲基苯甲酸(检测2,4-二甲基苯甲酸剩余量) | 不含氮源(观察菌落数量及大小) | |
A04 | +++ | - |
A05 | + | - |
B07 | +++ | +++ |
B15 | ++ | + |
B28 | + | + |
注:表中“+”的数量越多,表示相对值越大,“-”表示无。
据表分析回答下列问题:
(1)富集培养和纯化培养都使用以2,4-二甲基苯甲酸作唯一碳源的选择培养基,其中纯化培养时须使用
(2)综合考虑2,4-二甲基苯甲酸降解、生产成本投入及产品的产量与品质等因素,科技工作者认为在花生种植中最适合混合使用的两种菌种是
(3)请联系有机酸对土壤环境和根系生长的影响,分析连作引起花生产量及品质下降的可能原因有
(1)乳酸杆菌是动物胃肠道的优势细菌之一。家禽肠道内的乳酸杆菌通过细胞
(2)枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶,这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因,需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段,W基因以乙链为转录模板链,转录时mRNA自身延伸的方向为5’→3’。
①很多启动子具有物种特异性,在图1质粒中插入W基因,其上游启动子应选择
A.枯草芽孢杆菌启动子 B.乳酸杆菌启动子 C.农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。
限制酶 | EcoR I | BamH I | KpmI | Mfe I | Hind II |
识别序列及其切割位点 |
(3)为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力,研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上,另取部分菌液上清液测定酶活力,实验方案及测定结果如下表所示。
菌种 | 酶活性相对值 |
乳酸杆茵 | 未检出 |
X | 未检出 |
导入了重组质粒的乳酸杆菌 | 0.96 |
②在配制固体鉴定培养基时,除加入无机盐、刚果红、维生素、氮源、水外,还需要添加
(1)如图是利用
(2)在培养基上进行划线操作中,在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是
(3)下面是两种培养基配方:
表1:A培养基配方
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10.0 g | 1.0 g | 15.0 g | 1 000 mL |
纤维素粉 | NaNO3 | Na2HPO4·7H2O | KH2PO4 | MgSO4·7H2O | KCl | 酵母浸膏 | H2O |
5 g | 1 g | 1.2 g | 0.9 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 1 000 mL |
a. 接种 b. 配制培养基 c. 灭菌 d. 分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择
③据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2 mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了3个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,
(1)菜粕有机肥含有大量的营养物质,可为微生物提供充足的碳源和
(2)为筛选适于在菜粕上生长且能抑制青枯菌的菌株,研究者进行了下列实验。
①称取10克番茄根际土壤置于装有
②将上述培养基上生长的所有单菌落接种到同一个固体培养基上,培养24h后,在培养基表面均匀喷洒
(3)为检测在施用不同肥料条件下菌株RC14对番茄青枯病的防治效果,研究者将盆栽番茄接种青枯菌7天后进行如下处理,45天后测定发病率。结果如表所示。
组别 | 处理 | 发病率(%) |
1 | 施用常规化肥 | 72.5 |
2 | A__________ | 62.5 |
3 | 施用含菌株RC14的常规化肥 | 56.5 |
4 | 施用含菌株RC14的菜粕有机肥 | 17.5 |
(2)第Ⅲ步接种,应挑选
(3)本实验中用到了4种培养基,其中乙、丁培养基的作用分别是
(4)为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力,研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面,再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面,培养后测量清晰区(单位:mm)的宽度,得到了表所示的结果。
ε-PL浓度/mg·L-1 微生物 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 | 70 |
大肠杆菌 | + | + | 7.2 | 10.8 | 11.6 | 13.3 |
沙门氏菌 | + | + | 6.5 | 9.2 | 10.9 | 13.0 |
酿酒酵母 | 7.2 | 9.1 | 12.6 | 13.4 | 14.8 | - |
红曲霉 | + | + | + | + | 5.1 | 6.3 |
①下列关于上述抑菌实验的叙述,正确的是
A.结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强
B.ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C.用于实验的培养基应该用液体的选择培养基
D.接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
②该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处,请提出2条修改建议:
(1)从自然发酵的腐乳中获取菌株用于培养毛霉菌落,以下操作正确的是( )
A.培养皿用75%酒精消毒 |
B.腐乳取样后紫外灯照射灭菌 |
C.将培养基进行高压蒸汽灭菌 |
D.接种后适宜在室温下培养 |
(2)酪素培养基的原理是在培养基中添加酪素,如果菌株能产生蛋白酶并分泌到胞外,则能将酪素降解形成透明圈(如图)。该培养基属于
①通用培养基②鉴别培养基③选择培养基④液体培养基⑤固体培养基
(3)Hc值是透明圈直径与菌落直径的比值,表为8种毛霉菌株分别接种到酪素培养基培养后测得的Hc值。据表初步筛选出的三种具有高蛋白酶活力的菌株编号为
菌株编号 | ① | ② | ③ | ④ | ⑤ | ⑥ | ⑦ | ⑧ |
Hc值 | 3.75 | 5.8 | 0.50 | 4.33 | 5.42 | 3.08 | 3.90 | 5.33 |
将原人工接种发酵工艺所用的毛霉菌株编号为M1,筛选所得的3种菌株分别编号M2、M3、M4,将 M1、M2、M3、M4的毛霉孢子以 1:1 的比例两两混合,接种于豆腐小块表面,分别以接种单一毛霉孢子的豆腐为对照,培养后测定各豆腐毛坯蛋白酶活力和脂肪酶活力如图所示(柱状图上的误差线“I”代表数据的波动范围)。
(4)根据上图数据,最优的毛霉菌株组合是
根据以上研究,研究者想通过改造M4菌株形成新的单菌株毛霉发酵工艺,图1为M4菌株改造的基本思路,图2为目的基因上的限制酶识别位点。
(5)图1中目的基因扩增时,所用酶区别于M4菌株内同种酶的特点是
(6)NedⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ三种限制酶的识别序列和酶切位点分别为CA↓TATG、G↓AATTC、A↓AGCTT。扩增图2中目的基因时,应选择的一对引物是( )
A.引物Ⅰ:— GGGAATTC —;引物Ⅱ:— CTCATATG — |
B.引物Ⅰ:— GAATTCCC —;引物Ⅱ:— CATATGAG — |
C.引物Ⅰ:— GGAAGCTT —;引物Ⅱ:— AAGCTTCC — |
D.引物Ⅰ:— CTCATATG —;引物Ⅱ:— AAGCTTAAGCTT — |
(7)关于图1中M4菌株改造的基本思路,下列描述正确的是( )
A.预期的A指活力更高的蛋白酶 |
B.获得A的基本策略是定点突变 |
C.获取目的基因时可采用PCR技术 |
D.预期产品一定具备预期的蛋白质功能 |
(1)如图,取10g土壤样品加入90mL蒸馏水,若将土壤样品稀释到107倍还需从上次稀释液取1mL加入9mL蒸馏水逐级稀释
(2)表中各平板上均接种稀释土壤样品溶液0.1mL,该接种方法是
(3)图中鉴别培养基需添加
(4)若某研究性学习小组配制图示选择培养基时,培养基配方如下:1.4gKH2PO4、2.1gNa2HPO4、0.2gMgSO4·7H2O、1.0g蛋白胨、10.0g葡萄糖、1.0g尿素、15.0g琼脂,根据培养基的成分判断,该培养基
限制性内切核酸酶 | BamHl | Xho l | Bcl l | Sac l |
识别序列及切割位点 | 5'-C↓GATCG-3' | 5'-C↓TCGAG-3' | 5'-↓GATC-3' | 5'-GAGCT↓C-3' |
A.培养基 X是鉴别培养基 |
B.培养基 Y 应选用液体培养基 |
C.培养基X上生长大肠杆菌均含有重组质粒 |
D.培养基 Y 上生长大肠杆菌均含有重组质粒 |
(2)下列关于过程Ⅳ的培养条件,说明合理的是____。
A.加入抗生素—防止细菌感染 |
B.5%CO2—维持酸碱平衡 |
C.适宜温度—维持酶活性 |
D.适宜渗透压—维持水平衡 |
(3)在繁育转基因小鼠过程中采用的生物技术与工程是
①重组DNA 技术
②动物细胞培养技术
③动物细胞融合技术
④细胞核移植技术
⑤胚胎移植技术
(4)若过程Ⅰ中质粒pUCl8选用了 Xho I和BclⅠ进行切割,表为4种限制酶的识别序列和切割位点。为实现其与目的基因相连,可在人APP基因两端分别添加
①XhoI 和 BclI的识别序列
②SacI 和 BclI的识别序列
③Xho I 和 BamHI的识别序列
④Sac I 和 BamHI 的识别序列
科学家研究发现AD与脑部的β淀粉样蛋白(Aβ)寡聚有关,Aβ寡聚体能引起一系列的神经细胞毒性反应,造成神经细胞死亡。相关机制如图2,请回答:(5)有的神经递质为小分子化合物,但仍以图8所示方式释放,其意义是____。
A.不利于神经冲动快速传递 |
B.避免被酶降解 |
C.短时间内可大量释放 |
D.减少能量的消耗 |
(6)神经递质与突触后膜上的 NMDA受体结合会引起Na⁺通道打开,Aβ寡聚体与NMDA受体结合后突触后膜兴奋性将
(7)请据图2及所学知识分析AD患者与糖尿病的相关性
(2)在培养基上进行划线操作中,在2至5区域每次划线之前都要灼烧接种环的目的是
(3)下面是两种培养基配方:
表1:A培养基配方
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 | H2O |
1.4g | 2.1g | 0.2g | 10.0g | 1.0g | 15.0g | 1000mL |
纤维素粉 | NaNO3 | Na2HPO4·7H2O | KH2PO4 | MgSO4·7H2O | KCl | 酵母浸膏 | H2O |
5g | 1g | 1.2g | 0.9g | 0.5g | 0.5g | 0.5g | 1000mL |
a.接种b.配制培养基c.灭菌d.分离和培养
②如果要分离土壤中能分解尿素的细菌,应选择
③据B培养基的成分,所培养微生物的同化作用类型是
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,取0.2mL稀释液涂布,得到以下统计结果:
甲同学涂布了1个平板,统计的菌落数是260;
乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数是210、240和246,取平均值232;
丙同学涂布了3个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;
在三位同学的统计中,