1 . 小明做“微生物的分离与培养”实验时得出如下结论，相关叙述正确的是（　　）

A．高压蒸汽灭菌加热结束时，立即开启锅盖，拿出培养基和工具待用

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

2 . 进行垃圾分类可以减少垃圾处理时间，降低处理成本。科研小组欲分离及培养若干种微生物用于对湿垃圾（包括剩菜剩饭、骨头、菜根、菜叶、果皮等食品类废物）的处理。下列有关叙述正确的是（       ）

A．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和操作者的双手进行灭菌

B．培养过程需要向培养基通入无菌空气并进行搅拌，目的是使菌体充分接触营养物质和溶解氧，促进细菌繁殖

C．科研小组若从生活垃圾中分离分解尿素的微生物，可在培养基中加入刚果红指示剂，如果有尿素分解菌存在，则培养基中该菌落的周围会出现红色

D．该实验培养基为选择培养基，无须进行未接种培养基的培养

3 . 学校食堂餐余垃圾以淀粉为主，容易进行生物降解和再利用。为筛选高效降解淀粉的微生物，研究人员将餐余垃圾中的杂质和骨头挑出后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如下图所示操作。回答下列问题：

(1)在接种前需要对餐余垃圾浸出液进行______________处理。

A．灭菌

B．消毒

C．稀释

D．浓缩

(2)为筛选高效降解淀粉的微生物，X培养基需要加入的碳源是______________。
(3)加入碘液后，部分菌落周围出现清晰区，图中最高效降解淀粉的微生物是______________（用数字编号表示）。
(4)形成这些菌落的微生物可能是______________。

A．病毒

B．细菌

C．真菌

(5)利用Y培养基培养时需要把锥形瓶放到摇床上进行一定频率的摇晃，目的是______________。
(6)若垃圾分类不当，在餐余垃圾中混入过期的抗生素，将不利于其生物降解，为了筛选出对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，如何对图中的实验操作进行优化？______________。

4 . 流行病学调查结果显示，全球共有5亿多胃病患者，中国就占了1．2亿左右，是名副其实的“胃病大国”。究其原因除了国人的饮食习惯、生长环境外，幕后推手其实是它——幽门螺旋杆菌（Hp），医务工作者在胃病患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。
实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌→倒平板→X→培养→观察。
请回答相关问题：
(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有______，它能以尿素作为氮源：若有Hp，则菌落周围会出现______色环带。
(2)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_________灭菌和___________灭菌。
(3)培养基灭菌后需立即倒平板，平板冷凝后应将其倒置，目的是________________________。
(4)步骤X表示___________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液___________到培养基平面上。
(5)医生经常用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的__________分解为NH₃和¹⁴CO₂。

5 . 大丽轮枝菌（一种丝状真菌）是引起棉花黄萎病的主要病原菌。为观察大丽轮枝菌对棉花根的侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转染大丽轮枝菌，培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，主要过程如下（图中a链和b链分别是相应基因转录模板链）。分析回答下列问题：

(1)过程①中，PCR扩增sGFP的原理是______________，该过程除需要根据______________设计特异性引物序列外，为保证sCFP正确插入质粒中，还需要在引物的5'端添加限制酶识别序列，图中b链的黏性末端碱基序列（5'→3'）为______________。
(2)过程②需要的工具酶是_______________。研究中将sGFP插入构巢曲霉启动子和终止子之间的目的是______________。
(3)过程③中需要配制细菌培养基，配制时要在培养基灭菌并冷却到80℃左右后，再加入潮霉素溶液，潮霉素不能与培养基一同灭菌的原因是______________。
(4)选择过程③筛选培养得到的不同农杆菌菌落，分别提取细菌质粒DNA，并用BamHI和HindⅢ完全酶切，可以得到______________种长度不同的DNA片段。
(5)将导入重组质粒的农杆菌加入大丽轮枝菌的孢子细胞悬液中，在适宜条件下完成转染后利用滤膜过滤得到孢子细胞，再在真菌培养基上培养获得菌落，最终通过检测_________________筛选出绿色荧光蛋白旺盛表达的大丽轮枝菌。

6 . 酵素的本质是蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶的混合物。可以新鲜的蔬菜和瓜果为原料，用其上附着的天然菌种进行发酵，然后从发酵液中提取得到酵素。下列叙述正确的是（       ）

A．酵素进入消化道后会被消化酶水解，无法起到助消化的作用

B．发酵前可以煮熟果蔬进行消毒，以确保发酵过程无杂菌污染

C．将酵素添加进洗衣粉中并配合沸水冲洗，可以帮助分解衣服上的油渍

D．可将酵素加入饲料中降解不易被消化的成分，加入ATP可促进此过程

7 . 微生物具有繁殖速度快、易变异、适应性强和分布广等特点，人类对微生物进行实验室培养，并应用于生产生活。回答下列问题：
(1)防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提，消毒是杀死物体表面或内部的部分微生物，而灭菌是杀死物体内外所有微生物，包括_____________，其中“121℃维持15~30min”是_____________（方法）中的灭菌条件。
(2)纯化微生物的原理是在培养基上将稀释的细菌分散，使单个细菌长成_____________。既能实现纯化，又能对微生物计数的方法是_____________。对于需要长期保存的菌种，可以采用_____________的方法。
(3)在寻找微生物的过程中，可通过颜色反应直接对微生物进行筛选。在培养基中添加_____________，通过_____________来筛选纤维素分解菌，用来筛选分解尿素细菌的培养基中含有KH₂PO₄和Na₂HPO₄的作用是__________________________（答出两点）。

8 . 硒是一种生命活动必需的微量元素。亚硒酸钠对细菌的生长有明显的毒害作用，土壤中的一些富硒细菌可将其还原为红色单质硒。下图为土壤中富硒细菌的筛选和纯化过程。

请回答下列问题：
（1）在接种土壤样品之前，需要对①中的培养基进行高压蒸汽灭菌。灭菌时间到后，要先切断电源，待灭菌锅内温度自然下降至压力表降到零时再打开排气阀。这样做的目的是________________________。
（2）在取②中的培养液接种到③的培养基表面的过程中，用到的器具除了烧杯、酒精灯之外，还有_________，从功能上看，③中的培养基属于________培养基，在④中，可根据____________对符合要求的目的菌株进行筛选。
（3）研究者要根据培养基④中的菌落数目来计算出②的培养液中的菌体数目，其依据的原理是：当样品的____________时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
（4）上述实验的各个环节都必须做到严格的________操作，有些用品还必须进行灭菌处理。灭菌是指__________________。

9 . 有关平板划线操作不正确的是

A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红

B．接种环在平板上划线位置是随机的

C．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰

D．最后将平板倒置，放入恒温箱中培养