1 . 2019年7月1日，《上海市生活垃圾管理条例》正式实施，上海 正式进入垃圾分类时代。分类的原则是分而用之即将废弃物分流处理，利用现有生产制造能力，回收利用废弃物，包括物质循环利用和能量分级利用，以及填埋处置暂时无法利用的垃圾。采用微生物分解法处理厨余垃圾已成为研究热点。厨余垃圾中含有大量纤维素和脂肪，研究人员拟筛选出能高效降解这两种有机物的菌株，用以处理厨余垃圾，部分流程如下图：

(1)从常年堆放厨余垃圾的场所取样，溶解在适量无菌水中，振荡摇匀使菌体分散开后，将菌液进行梯度稀释，接种。微生物接种的方法有很多，最常用的方法是：_________。向平板倒入培养基，待其冷凝后将平板倒过来放置，原因是：______________。
(2)在筛选纤维素分解菌时首先将稀释的微生物样品接种在以__________为唯一碳源的培养基上，根据用途，该培养基属于________培养基，该培养基在配制过程中，需在倒平板时加入已经灭菌处理的________，待长出菌落后，依据是否产生_______来筛选纤维素分解菌。然后将筛选出的纤维素分解菌接种到以脂肪为唯一碳源的培养基上，筛选出能同时降解纤维素和脂肪的菌种。
(3)处理厨余垃圾利用微生物，主要是利用这些微生物产生的酶。一般来说，酶更适合采用__________固定化，与直接用酶或微生物处理相比，采用固定化酶(细胞)技术处理厨余垃圾的优点有_______________________。

2 . 有同学发现生产面筋（小麦中的蛋白质）会产生大量的淀粉，这些淀粉可以用来生产葡萄糖、酒精和醋酸。下图是某位同学设计的利用淀粉的流程。结合已有知识回答以下问题：

（1）生产实践中，常利用_________法固定化细胞。固定化细胞可以用海藻酸钠，溶解海藻酸钠时，最好采用_______________的方法。
（2）加热溶化后的海藻酸钠需冷却到室温才可以加入菌体的原因是_______________________；该操作还需要使用氯化钙溶液，其作用是____________________________。
（3）酿制成功的粮食酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现酸味，原因是________________。醋酸发酵的适宜温度相比于酒精发酵，所需温度________（填“更高”、“更低”或“相同”）。
（4）醋酸菌与酵母菌相比，在结构上的最主要区别是_____________________。

3 . 如图表示酶的几种固定技术，图中①②③对应的酶固定技术分别是（       ）

A．化学结合、包埋、载体结合

B．载体结合、化学结合、包埋

C．化学结合、载体结合、包埋

D．载体结合、包埋、化学结合

4 . 枯草杆菌广泛分布于土壤及腐败的有机物中，某工厂为生产耐高温的淀粉酶，开展了枯草杆菌菌株的筛选、酶的固定化分析研究。请回答下列问题：
（1）本实验利用的培养基需用______________法进行灭菌，无菌技术处理除了防止实验室培养物被其他外来微生物污染外，还可______________和______________。
（2）为了酶的重复利用和节约成本，除了利用固定化酶技术之外，还可利用固定化细胞技术，与固定化酶相比，固定化细胞的优势是_____________________。固定化细胞常用的方法是______________ ，操作过程中的海藻酸钠作用是____________________________。
（3）为了分离纯化菌种，可以选择的接种方法是________（答一种方法），为了保持菌种的纯净，可以采用________的方法长期保存该菌种。

5 . 生物柴油是一种可再生清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶的作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应配制_____碳源的培养基，这种培养基从功能上看属于____培养基。
（2）在微生物培养过程中，灭菌与消毒的主要区别是灭菌能够杀死物体内外______。常用______法对玻璃器皿进行灭菌。
（3）经过稀释，在平板上接入0．1mL稀释液并涂布，经适当时间培养后，在平板上计数菌落，据此可计算出每毫升培养液中的活菌数。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小，原因可能有______________________________。
（4）经上述实验发现稀释倍数为10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶得到的结果分别为难以计数、难以计数、难以计数、159、17、2，为保证结果准确，一般选择_____稀释倍数的平板进行统计。
（5）为降低生物柴油生产成本，可利用__________技术使脂肪酶能够重复使用。

6 . 下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，正确的是

A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响大

B．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用

C．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药

D．将海藻酸钠凝胶珠用自来水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌

7 . 下列有关酵母细胞固定化实验操作目的及结果分析，错误的是

A．干酵母细胞处于休眠状态，需置于蒸馏水中活化

B．固定化酵母菌利用葡萄糖的效率比游离的酵母菌要低

C．若海藻酸钠的浓度偏低时凝胶珠呈白色，固定的细胞数目较多

D．配制海藻酸钠溶液时需要小火或间断加热，以防海藻酸钠焦糊