2 . γ-氨基丁酸（GABA）是一种抑制性神经递质。γ-氨基丁酸的摄入具有改善睡眠、降低血压、减轻焦虑和抑制糖尿病等作用，因此被用作食品添加剂或膳食补充剂，可利用微生物法生产GABA.请回答下列问题：
(1)GABA由突触前膜释放，与后膜上受体结合后使后膜对离子的通透性发生改变，此时突触后膜膜两侧的电位为______。
(2)GABA是以L-谷氨酸作为前体物质，在谷氨酸脱羧酶催化下合成的。研究人员通过尝试加强谷氨酸脱羧酶的表达来实现GABA的高效生产。具体操作过程如下：
①获取谷氨酸脱羧酶基因并进行PCR扩增。PCR扩增时需要_______酶，每次循环一般可以分为_____三步。
②重组质粒的构建和鉴定。将谷氨酸脱羧酶基因和质粒分别用限制性内切酶NcoⅠ和KpnⅠ进行双酶切，混合后使用连接酶连接，得到构建的重组质粒，如图甲。然后通过酶切法对构建的重组质粒进行鉴定，结果如图乙所示。   

图乙中泳道1、2分别是用限制性内切酶K pnⅠ酶切质粒、重组质粒的结果，泳道3是用限制性内切酶NcoⅠ和KpnⅠ双酶切重组质粒所得。根据电泳结果可知目的基因片段______（填“整合”或“未整合”）到质粒上，理由是_______。
③重组质粒的转化、鉴定与表达。将鉴定后的重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞中。将转化后的细胞涂布于含有_______的抗性平板上，培养得到阳性转化菌落。将转化后的大肠杆菌细胞接种至培养液中，在适宜条件下培养。培养液中需要加入碳源、氮源等营养成分，氮源的主要作用是______（答出1点即可）。
④菌株产GABA能力的比较。一段时间后检测发酵液中GABA的含量。若要说明加强谷氨酸脱羧酶的过量表达能实现GABA的高效生产，则需要得到怎么样的结果？____。

5 . 导致女性不孕的原因有很多。某家族性女性不孕症家族系谱图如图甲所示，研究人员对该家族中部分人员与致病相关的一对基因的模板链进行了测序，发现该病是由一个碱基突变导致的。相关序列的测序结果如图乙所示。回答下列问题：

(1)根据图乙的测序结果可知，该家族女性不孕症的致病机理是相关基因的碱基对发生了_____导致基因突变。该基因突变是发生在_____染色体上的_____性突变。
(2)Ⅱ-5不患红绿色盲。其与一个父母正常、但弟弟患红绿色盲的健康女性结婚，其女儿不携带致病基因的概率是_____。
(3)科研人员设计了一种基于PCR技术的快速检测技术，以检测该女性不孕症是否由这种基因突变导致。检测步骤是：提取患者DNA，先用_____将DNA切割成适宜长度的片段，并将其加入PCR反应体系中。在该PCR反应体系中，一般要加_____等（至少答出3点）。
(4)Ⅱ-4的丈夫不携带致病基因，但Ⅱ-4很担心其女儿也患不孕症，若你是医生，你认为她的女儿_____（填“有”或“没有”）必要到医院进行基因检测，理由是：_____。

7 . 为研究玉米的抗逆机制，科研人员利用图中的双分子荧光互补技术分析玉米M5与B72蛋白的相互作用。下列说法正确的是（　　）

A．直接将YFP剪切为N端和C端后，分别与M5和B72蛋白连接

B．设计特异性引物以玉米cDNA为模板扩增M5和B72基因

C．将M5和B72基因融合后连接到质粒上的YFP基因中

D．将含有M5和B72的基因表达载体分别导入不同细胞中

9 . 多克隆抗体（简称多抗）是由浆细胞合成并分泌的免疫球蛋白，它是机体对特定抗原产生免疫应答后的产物。与单克隆抗体（简称单抗）不同，多克隆抗体是由多种单克隆抗体混合而成，因此具有更广泛的应用价值。回答下列问题：
(1)抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构称为抗原决定簇，请解释一种抗原可刺激机体产生多种抗体的原因是______。
(2)与制备单抗相似，制备多抗过程也需经过两次筛选，第一次筛选的目的是______，第二次筛选的方法是______。
(3)利用基因工程制备某种病毒单抗时，首先要获得病毒抗原蛋白基因，利用PCR扩增病毒抗原蛋白基因的前提是______，该扩增过程所需的酶为______。
(4)用于病原体的检测时，多抗比单抗具有明显优势，原因最可能是______。