1 . 下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：
       

限制酶	APaⅠ	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
识别位点及切割位点	AG↓CT TC↑GA	G↓AATTC CTTAA↑G	CTGCA↓G G↑ACGTC	CCC↓GGG GGG↑CCC

(1)形成重组质粒A时，应选用限制酶______________，对__________________进行切割。
(2)一个质粒被限制酶EcoR I、Pst l、Sma I同时切割后可得到________________个DNA片段，_____________ 个黏性末端。
(3)培养基中的氨苄青霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使重组质粒A中含有__________ 基因。
(4)要培养既抗病又无病毒的香蕉植株，应将农杆菌导入_______________ 细胞中，再进行植物的组织培养。植物激素是关键激素，它们的__________等会都会影响植物细胞的发展方向。
(5)以上获得转基因抗病香蕉植株的过程中，所用到的原理有_______________。

2 . 人体内的t-PA蛋白能高效降解由血纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药。然而，为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血，其原因在于t-PA与血纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血副作用。据此，先对天然的t-PA基因进行序列改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该突变基因，可制造出性能优异的t-PA突变蛋白。
       
(1)制造该性能优异t-PA突变蛋白的过程称为_____工程。
(2)高纯度的DNA模板是成功扩增目的基因的前提条件之一，在制备DNA模板时，可以用高温处理的方法去除蛋白质，原因是_____。

A．蛋白质空间结构容易破坏	B．氨基酸容易高温脱氨基
C．DNA氢键容易断裂和恢复	D．DNA和蛋白质可以碱基配对

(3)已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链（作为模板指导RNA合成的链）序列为ACA，而丝氨酸的密码子为UCU，因此突变基因编码该氨基酸的模板链序列应设计为_____。
(4)若获得的t-PA突变基因如图所示，那么质粒pCLY11需用限制酶_____和_____切开，才能与t-PA突变基因高效连接，在连接时需要用到_____酶。
(5)应选择在加入新霉素的培养基中_____（能/不能）生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞，将目的基因导入受体细胞，放在含新霉素的培养基中培养，选择呈_____色的菌落，进一步培养、检测和鉴定，以选育能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。

3 . 胰蛋白酶极易自溶，人们运用蛋白质工程手段最终得到了稳定性明显提高的胰蛋白酶。下图为技术流程，相关叙述错误的是（       ）
   

A．a、b分别是转录、翻译过程

B．图中分子设计的实质是改造基因的结构

C．据图中氨基酸序列无法确定唯一对应的脱氧核苷酸序列

D．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异

4 . 下列所应用的生物技术与原理不相符的是（　　）

A．核移植后克隆出的动物个体-动物细胞核的全能性

B．培养愈伤组织获得紫杉醇-植物细胞的全能性

C．向植物导入抗冻基因以获得抗冻植株-基因重组

D．将甘蓝和白菜的体细胞融合获得杂种细胞-细胞膜的流动性

5 . 小鼠体内转入海蜇绿色荧光蛋白（GFP）基因后，在紫外线的照射下也能像海蜇一样发光，经检测发现GFP在小鼠组织细胞中普遍存在。下列叙述错误的是（       ）

A．检测发现GFP基因能与小鼠DNA结合，原因是二者均为脱氧核苷酸构成的双链结构

B．小鼠细胞在紫外线照射下能发出荧光说明GFP基因在小鼠体内能复制并表达

C．GFP基因和小鼠DNA结合引起的小鼠变异类型属于染色体结构变异

D．GFP基因在水母和小鼠体内都能表达出相同性状，说明它们共用一套遗传密码子

6 . 下列关于基因工程和蛋白质工程的说法错误的是（       ）

A．基因工程需要在分子水平对基因进行操作

B．蛋白质工程需要在分子水平对基因进行操作

C．基因工程能产生天然不存在的蛋白质

D．蛋白质工程能产生天然不存在的蛋白质

7 . 以下关于基因工程的操作工具，说法正确的是（       ）

A．DNA和RNA均可使用限制酶进行切割

B．切割质粒的限制酶均能特异性地识别6个核苷酸序列

C．限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小

D．载体的作用是将目的基因导入受体细胞使之稳定存在并表达

8 . 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒（ASFV,DNA病毒）引起的一种发病率高且病死率高的传染病。P30蛋白、P54蛋白、P72蛋白均是ASFV表面的抗原蛋白，科研人员利用大肠杆菌表达系统合成相应的蛋白质，然后用特定的抗原多次免疫小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合，制备相应的单克隆抗体。回答下列相关问题：
   
(1)将含目的基因的重组载体导入受体细胞大肠杆菌前，常用________________处理大肠杆菌，使细胞处于___________的生理状态；ASFV表面蛋白可在大肠杆菌中表达的原因是____________。
(2)用特异性抗原对小鼠进行多次免疫的目的是_____________。诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的方法有_____________（答出两点）。
(3)图中筛选2的方法是___________，将筛选获得的细胞在一定条件下进行培养，最终可从_____________中获取大量的单克隆抗体。
(4)利用图示方法获得的单克隆抗体与给小鼠注射灭活的ASFV产生的血清抗体的差异是注射灭活的ASFV后，由于含有多种抗原蛋白，血清中含有多种抗体，而利用图示方法获得的单克隆抗体是____________。

9 . 黄金大米是一种新型转基因大米，其β-胡萝卜素含量是普通大米的23倍，因大米在抛光后呈黄色而得名。八氢番茄红素合酶（其基因用psy表示）和胡萝卜素脱饱和酶（其基因用crtI表示）参与β-胡萝卜素的合成。如图是科学家将psy和crtI基因转入水稻，使水稻胚乳中含有β-胡萝卜素，生产出“黄金大米”的过程。请据图回答问题：

(1)培育转基因“黄金大米”植株的核心步骤是_________________________，据图可知，将psy基因和crtI基因导入水稻细胞采用的方法是_______________。这两段基因与β-胡萝卜素的合成之间的关系是_________________________________。
(2)过程④需要用到_________技术，该技术依据的生物学原理是__________。
(3)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如某种食品含有的麦芽糖是从转基因大米中提取出来的，但该食品的说明中仍可标注为“本产品加工原料中有转基因大米，但本产品已不再含有转基因成分”，其依据是________________。

10 . 下列各项科学研究成果，不能作为基因工程直接理论基础的是（       ）

A．DNA双螺旋结构模型的建立	B．孟德尔遗传规律的发现
C．遗传密码的破译	D．中心法则的确立