3 . 党的二十大对保障粮食安全提出了更高要求，马铃薯块基富含淀粉，而且其中的维生素是所有粮食中最全的，因此我国科学家对马铃薯这种重要粮食作物开展了大量研究。
(1)马铃薯因为自交不亲和，所以只能进行无性繁殖，我国科学家用基因编辑技术定点敲除二倍体马铃薯的自交不亲和基因获得了二倍体自交系的马铃薯。
①普通（非转基因）马铃薯不能自交的根本原因是____________________。
②为敲除自交不亲和基因，研究者采用了CRISPR/Cas9基因编辑技术，如图所示：

该技术利用一段与靶序列互补的向导RNA引导Cas9蛋白对特异靶向DNA进行识别和定点敲除自交不亲和基因，其中的Cas9蛋白相当于______酶，若要将自交不亲和基因从目标DNA上切除下来，需要设计______种不同的向导RNA。若靶序列为5'-AGCAT……GTACCT-3'，则设计的向导RNA中相应的序列应为_____________。
(2)MAP30蛋白是一种能使Ⅰ型核酸核糖体失活的蛋白质，实验表明MAP30蛋白具有抗pvx病毒功能，为培育高效表达该基因的马铃薯新品种，科研团队利用农杆菌转化法将MAP30基因导入马铃薯细胞内，如图所示：

①选择Ti质粒做载体的原因是___________，构建基因表达载体时为避免反向拼接应选择____识别切割质粒，再用__________连接。
②个体水平上，可通过__________的方法检测转基因马铃薯是否具有抗病毒的特性，具体做法是_________。

4 . 2019年1月24日，《国家科学评论》发表了上海科学家团队的一项重要成果，即通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中BMALI基因（生物节律核心基因），成功培育出5只BMALI基因敲除的体细胞克隆猴。基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA（sgRNA）和Cas9蛋白组成，由sgRNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。请回答：

（1）图中Cas9-sgRNA复合体用______________方法注入受体细胞；基因编辑工具中对基因进行剪切的是_____________。
（2）sgRNA能与靶DNA分子特异性识别、结合的原理是______________。
（3）从个体水平鉴定，若BMALI基因敲除成功，猕猴表现为_____________。在培育体细胞克隆猴的过程中，涉及的胚胎工程技术主要有_____________（答出2项即可）。
（4）在人类生物节律紊乱机理研究方面，猕猴模型比小鼠、果蝇等传统模型动物更加理想。基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMALI缺失猕猴（A组），与仅通过基因编辑受精卵得到的数只BMALI缺失猕猴（B组）比较，_____________（填“A组”或“B组”）更适合做疾病研究模型动物，理由是______________。

5 . 利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：

（1）对1号猪使用_________处理，使其超数排卵，收集并选取处在__________时期的卵母细胞用于核移植。
（2）采集2号猪的组织块，用__________处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的CO₂培养箱中培养，其中CO₂的作用是________。
（3）为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行__________。产出的基因编辑猪的性染色体来自于_________号猪。
（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达，可采用的方法有__________（填序号）。
①DNA测序     ②染色体倍性分析     ③体细胞结构分析     ④抗原—抗体杂交

6 . 2019年1月，中国科学家首次利用基因编辑技术，敲除了猴胚胎的生物节律核心基因BMAL1，获得了一批节律紊乱的小猴(第一代模型猴)。采集了其中一只睡眠紊乱最明显的成年猴的体细胞，通过体细胞克隆技术，获得了五只BMAL1基因敲除的克隆猴(第二代模型猴)，简要过程如图所示。这填补了生物节律紊乱研究高等动物模型的空白。请回答下列问题：

(1)基因敲除是指外源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组，从而代替受体细胞基因组中的相同(相似)的基因序列，整合入受体细胞的基因组中。基因敲除过程中，构建的基因表达载体，外源基因应位于___________才可表达；外源基因是否导入受体细胞，可通过对重组DNA上___________的表达进行鉴定和选择。
(2)该研究离不开ES细胞。ES细胞在形态上表现为___________；其在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中可以___________。
(3)第二代模型猴___________(填“是”或“不是”)对第一代模型猴中编号为A6的100%复制，原因是：___________。
(4)通过动物核移植获得新个体，体细胞核移植的难度___________(填“高于”或“低于”)胚胎细胞核移植。

7 . 近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见图）。下列相关叙述错误的是

A．Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成

B．向导RNA中的双链区遵循碱基配对原则

C．向导RNA可在逆转录酶催化下合成

D．若α链剪切点附近序列为……TCCACAATC……，则相应的识别序列为……UCCACAAUC……