5 . Cre-lox重组是一种用于细胞DNA的特定位点上的特异性重组酶技术，其特点在于可以对指定的特定细胞群进行DNA修改。该技术使用Cre重组酶对loxP序列（由反向重
复序列和间隔序列组成）的间隔序列进行切割，机制如图1所示。回答下列问题：

(1)Cre酶切开的化学键为______。Cre酶切开一个loxP序列后形成的黏性末端分别可表示为______（标出3′端或5′端）。
(2)科研人员利用Cre-lox重组技术研究小鼠（小鼠的基因型均为AA）基因A的功能。若欲通过受精卵改造小鼠，则要将受精卵的所有A基因两侧都加入同向loxP序列（即），至少需要向受精卵加入______个loxP序列。在小鼠的部分细胞中，A基因会被Cre酶切下，切下的A基因片段由于自身含有______的黏性末端，因此容易发生______现象，进而导致该结构被清除。
(3)图2为同源重组模式图。通过这种原理可以将小鼠靶基因A两侧的序列换成loxP序列，其中同源臂中具有相同或相似的DNA序列。a～f片段中包含loxP序列的是______，包含靶基因A的是______。

9 . CD3D严重联合免疫缺陷（SCID）是由CD3D基因突变引起的，该突变阻止了T细胞生长发育所需的CD3D蛋白的合成。科研人员对第3代CRISPR/Cas9基因编辑系统进行改造，获得一种超精确的腺嘌呤碱基编辑系统（ABE），该系统主要由向导sgRNA、Cas9切口酶和腺嘌呤脱氨酶组成，作用机制如图1。利用该系统在CD3δ-SCID患者的造血干细胞中可以更正约71.2％的致病突变。

(1)研究发现、Cas9切口酶只能对DNA的单链剪切，腺嘌呤脱氨酶催化腺嘌呤核苷酸转变成次黄嘌呤核苷酸，次黄嘌呤核苷酸可以和胞嘧啶核苷酸碱基互补配对，据此推测，至少通过________________次DNA复制可以完成修复。
(2)sgRNA是人工合成的一段能与靶基因互补配对的特殊序列，由23个连续碱基组成。研究发现，sgRNA会识别与之匹配的其它区域，导致sgRNA脱靶，试分析其原因是___________________，对此，你的解决措施是_________________________。
(3)为了对改造后的CD3D基因进行研究，把CD3D基因和His标签基因（His标签由6个组氨酸组成）连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，图2为载体、CD3D基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，已知组氨酸的密码子为CAU，终止密码子为UAG。

①写出His的基因编码链的碱基序列5'____________________3'。
②为构建融合基因并将其插入载体，科研人员设计了一对与CD3D基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物________________________（填“A”或“B”）的5'端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5'__________________3'。