9 . 普通小麦（6n=42）的籽粒中主要是直链淀粉，表现为非糯性，直链淀粉的含量与Wx基因呈高度正相关。小麦具有3对Wx基因（Wx-A1、Wx-B1和Wx-D1），当这3对基因同时隐性纯合或缺失时，籽粒中主要是支链淀粉，表现为糯性。自然界中通常不存在糯小麦。请回答下列问题。
(1)在遗传学中，小麦的糯性和非糯性可被称为_____。
(2)研究人员将两种非糯性小麦进行杂交，白火麦（缺失Wx-D1）为母本，关东107（缺失Wx-A1和Wx-B1）为父本，最终筛选出2株纯糯单株。在进行人工杂交时，需在花粉成熟前对亲本中的_____去雄再套袋，这些操作的目的是防止_____。该育种方法的原理是_____。
(3)利用玉米诱导小麦单倍体技术已被许多学者应用于糯小麦育种工作中，育种过程如下图所示。

   
①玉米与小麦的F₁进行杂交，所得到的受精卵中玉米染色体全部丢失，原因可能是玉米与小麦为不同物种，存在_____。
②单倍体小麦体细胞中有_____个染色体组。用秋水仙素诱导可使染色体数目加倍，其作用原理是_____。该育种方式的优势是_____。
③进一步研究发现，玉米能够诱导单倍体的形成与玉米花粉中一种特异性磷脂酶基因（MTL）的突变有关。该突变体的产生是由于MTL基因中插入了4个碱基对，因此转录形成的mRNA提前出现了_____，导致磷脂酶肽链变短而失去功能。
(4)利用CRISPR/Cas9技术对普通小麦进行基因定点编辑，也可获得糯小麦。经鉴定该普通小麦含有Wx-A1和Wx-D1基因，天然缺失Wx-B1基因。CRISPR/Cas9系统主要包含向导RNA（gRNA）和核酸酶Cas9蛋白两个部分。应该根据基因_____的碱基序列设计gRNA靶位点。gRNA与靶基因结合，引导_____在靶基因相应位置剪切，从而对靶基因序列进行编辑。

   

10 . 非霍奇金淋巴瘤是一种原发于淋巴组织的血液系统恶性肿瘤，其细胞表面高表达CD19蛋白。CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）疗法是利用基因工程的方法使T细胞表面表达能够靶向特定抗原的受体（CAR），改造后的T细胞被称为CAR-T，可以识别并攻击带有特定抗原的肿瘤细胞，同时激活机体自身免疫从而达到抗肿瘤的效果。请回答下列问题：
(1)目前制备CAR-T细胞大多是采用慢病毒感染的方式使T细胞表达CAR。
①获取CAR基因（实质为抗CD19蛋白的抗体基因）：将抗CD19蛋白的抗体基因作为PCR反应的模板，并依据_____设计一对特异性引物来扩增该基因。
②构建基因表达载体：图1为所用载体示意图，表格为限制酶的识别序列及切割位点。为使目的基因与载体正确连接，在扩增目的基因时，应在其一对引物的_____端分别引入
_____两种不同限制酶的识别序列。在目的基因和载体连接时，可选用_____（选填“E。coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。
③将目的基因导入受体细胞：将重组质粒通过_____技术导入到T细胞。
④重组质粒的筛选与鉴定：将转化后的T细胞置于含_____的培养基上进行培养，进一步通过流式细胞术验证CAR-T细胞的构建是否成功。


(2)采用病毒作为递送载体存在随机插入的安全隐患，CRISPR/Cas9技术作为第三代基因编辑工具（图2），sgRNA可引导Cas9蛋白在特定位点进行切割来完成基因的编辑。科学家利用该技术制备的CAR-T细胞，在非霍奇金淋巴瘤临床前的治疗中取得理想效果。其操作原理如图3所示。
①sgRNA能与靶基因特异性识别、结合的原理是_____，基因编辑工具中对基因进行剪切的是_____。
②肿瘤细胞表面的PD-L1蛋白和T细胞表面的PD-1受体结合，发出免疫抑制信号，实现免疫逃逸。该研究团队利用CRISPR/Cas9技术切割T细胞中PD-1基因的同时导入靶向PD-1基因的同源重组序列，利用同源重组修复的原理将_____重组在PD-1基因内部，制备了非病毒定点整合的CAR-T细胞，如图3。
③综合上述信息分析，与慢病毒制备的CAR-T细胞相比，该方案制备的CAR-T细胞在非霍奇金淋巴瘤的治疗中的优点有：可以_____插入抗CD19蛋白的抗体基因，降低随机插入的安全隐患，提高CAR-T细胞的安全性；可以使PD-1基因突变，降低肿瘤细胞____　的可能性，提高CAR-T细胞的有效性。