1 . 氢能是潜力巨大的可再生清洁能源。利用产气肠杆菌制氢具有条件温和、环保等优点。E.as菌是产氢率较高的菌种，为进一步提高其产氢率，科研人员开展了相关研究。回答下列问题。
(1)为获得 E.as菌纯培养物，可采用________法进行纯培养。在培养过程中，设置未接种的平板作为对照，这样做的目的是________。
(2)为确定 E.as菌产氢率的最适温度，某同学进行了相关实验，请简要写出实验思路。________
(3)E.as菌细胞中hycA基因表达会抑制产氢代谢，科研人员通过同源重组方式使hycA蛋白失活，获得了产氢率更高的工程菌E.as⁃A，其技术流程如图所示。
   
①过程I中可采用________法处理 E.as 菌，以促进DNA片段P的导入 。
②过程II中，同源重组导致 hycA蛋白失活，其机制是_______。依据基因工程原理，采取其他手段也可达到同样的失活效果，可采用的其他手段有_______（写出一项即可）。
③过程Ⅲ应将菌种接种到含有________的培养基上进行筛选，最终获得E.as-A工程菌。

2 . 三糖铁培养基（TSI）含有牛肉膏、蛋白胨、糖类（乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10：10：1）、酚红（在酸性条件下呈黄色、碱性条件下呈红色）等成分。TSI琼脂试验法通过观察肠杆菌科细菌对三种糖的分解产生酸（少量的酸能被空气缓慢氧化）量的多少来鉴别其种类。操作过程是：用接种针挑取待测菌落后，刺入斜面TSI内，后缓慢抽出接种针，在斜面上进行“之”字划线。下列分析错误的是（       ）

A．牛肉膏可为细菌提供氮源和维生素等

B．穿刺和划线的过程需严格控制杂菌污染

C．若培养基中底层与斜面均呈黄色，推测细菌只能分解乳糖

D．若底层呈黄色、斜面先呈黄色后变红，推测细菌可能只分解葡萄糖

3 . 常见的酿酒酵母能利用葡萄糖，不能利用木糖发酵。若用转基因技术将发酵木糖的关键基因——木糖还原酶（XYL1）或木糖异构酶基因（XYLA）转入酿酒酵母中，均能培育出能利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母。图表示XYL1基因与细菌pYMILP质粒重组的过程示意图。图中AMP^r是氨苄青霉素抗性基因，其基因产物可使“碘—淀粉”复合物脱色，从而在含有“碘—淀粉”的固体平板上形成透明圈。转化成功的酿酒酵母中含AMP^r基因的重组质粒拷贝数越多，透明圈越大。

（1）据图可知，目的基因的长度是________________bp；图中获取目的基因和切割质粒所用的限制性核酸内切酶分别是___________、__________，最终能形成重组质粒的原因是________________。
（2）图是四个成功导入重组质粒的酵母菌的菌株（品系），在“碘—淀粉”的固体平板上的生长情况，其中目的基因表达量最高的是________，根据题意，分析原因是_____________________。此“碘—淀粉”培养基从功能上看属于_____________培养基。

（3）图是不同温度条件下重组酿酒酵母菌株的木糖异构酶活性。据图推测，此酶最初来自于(       )

A．嗜热细菌                   B．大肠杆菌                   C．葡萄球菌                  D．乳酸杆