1 . 现有纯系果蝇若干，性状及表型如下表。控制体色、眼色、翅型的基因R/r、T/t、V/v位于Ⅱ号染色体上，对杀虫剂联苯菊酯的敏感性由另一条染色体上D/d基因控制。回答下列问题：

   

性状	野生型	突变型
对杀虫剂联苯菊酯敏感性	无抗性	有抗性
体色	灰体	黑体
眼色	红眼	紫眼
翅型	长翅	残翅

(1)野生型雄蝇和对杀虫剂联苯菊酯有抗性雌蝇杂交，F₁均为有抗性果蝇，F₁雌雄果蝇相互交配，F₂中有抗性果蝇与无抗性果蝇的比为3：1。某生物兴趣小组通过PCR获取亲本果蝇、F₁雄果蝇(A)及F₂果蝇(B、C)的抗性相关基因并进行电泳，结果如图。①实验结果说明，对杀虫剂联苯菊酯敏感为___________性状，电泳结果支持D/d基因位于___________染色体上，请说明判断依据：___________。②果蝇B的性别为___________，果蝇C 的基因型为__________。根据电泳结果分析，在野生型基因的突变过程中最可能发生了碱基对的__________。
(2)若选择2对相对性状研究自由组合定律，可以选用野生型纯合亲本与表型为__________(写出一种)的亲本果蝇进行交配，且实验需进行到___________代。
(3)减数分裂过程中，一条染色体上的两个基因位点间的距离越小，发生互换的概率就越小，产生的重组类型的配子就会越少。科研人员将基因型为RrTtVv的雌果蝇与基因型为___________的雄果蝇杂交，所得后代基因型和比例如下表所示。据此推测该雌果蝇RrTtVv这三对等位基因在染色体的分布情况为___________(在图上标出基因)。

基因型	RrTtVv	RrTtvv	RrttVv	Rrttvv	rrTtVv	rrTtvv	rrttVv	rrttvv
比例	163	1455	1	148	192	1	1158	130

2 . 果蔬生产过程中，农药、化肥、土壤微生物等均可产生NO（一氧化氮），NO作为一种气体信号分子对植物的生命活动产生一定影响；NO同时也是重要的环境响应因子，在植物的抗逆境生理中发挥重要作用。某研究小组为探究NO对某果蔬植株光合作用强度的影响进行了如下实验。实验中用SNP（硝普钠）作为NO的供体。回答下列问题。
(1)实验中测定了叶片的NO含量、叶绿素和类胡萝卜素含量、气孔导度，结果如图1。测定色素含量时，需用___提取色素并测定含量。提取液中的叶绿素主要吸收___光。相较于甲组，推测乙组叶片的光合作用强度较弱，依据是___。

(2)进一步检测发现，转录因子（HY5）基因敲除的植株叶绿素含量下降。PORC基因是叶绿素合成的关键基因，推测HY5蛋白可直接结合PORC基因的启动子调控其转录。为研究HY5基因与PORC基因的关系，研究者利用亮氨酸合成缺陷型酵母菌进行相关转基因实验，其操作步骤如下。
①先将载体1导入亮氨酸缺陷型酵母细胞，但始终无法在添加金担子素（AbA，一种抗生素）和亮氨酸的培养基上获得重组酵母菌菌落，因此，可采过___技术筛选出重组酵母细胞。
②再将载体2导入①步骤获得的重组酵母细胞，接种到选择培养基上，能筛选获得如图2所示的重组酵母细胞。关于该选择培养基的配方正确是___。

A．加亮氨酸和AbA       B．不加亮氨酸加AbA
C．不加亮氨酸和AbA   D．加亮氨酸不加AbA
③据此分析步骤①中培养基上无法培养得到菌落的原因是___。
(3)己知NO不直接影响PORC基因的表达也不影响其表达产物的活性，综合上述研究，阐明NO降低植物叶绿素的可能机制：___叶绿素合成减少。
(4)NO作为环境响应因子，还能通过抑制需氧呼吸中___、三羧酸（TCA）循环、电子传递链途径中关键酶的活性，抑制了呼吸速率，延缓了植物衰老，此功能与___（植物激素）的作用相互拮抗。

4 . 下图为马拉松运动员在比赛前后体内由下丘脑参与的生命活动调节的部分过程。下列叙述错误的是（       ）

A．运动员剧烈运动时，交感神经兴奋促进激素a分泌以升高血糖

B．运动员大量出汗导致激素b分泌增加，促进肾小管和集合管对水分的重吸收

C．比赛时紧张的情绪引起肾上腺髓质分泌的激素d增加，促进肝糖原分解

D．若遇寒风刺激，激素c分泌增加可促进甲状腺分泌激素d以增加产热

6 . Ⅰ、裸鼠几乎不得癌症，其寿命可超过30年，同样大小的家鼠最长寿命为4年。为探究其原因，科研人员做了以下研究。
Ⅱ、Period2（Per2）基因是一种抑癌基因，干扰Per2基因表达有利于肿瘤细胞存活和促进肿瘤发生。p53肿瘤抑制因子是一个关键的转录因子，调节DNA修复、细胞周期、衰老凋亡等相关细胞途径，是抵抗癌症发病和进展的重要防御因子，并且是通过与癌蛋白MDM2负调控作用调节其功能。为探究裸鼠体内下调Per基因对人胶质瘤细胞U343细胞株中P53的可能调控机制，科研人员做了如下实验：
(1)裸鼠胶质瘤模型构建：将裸鼠皮肤成纤维细胞置于______培养箱进行体外培养，经检测发现其分泌大量粘稠的高分子量透明质酸（HA），可抑制细胞过度增殖。
(2)研究者检测不同来源成纤维细胞中HA合成酶（HAS）的含量，结果如图1.另外，发现裸鼠组织的HA降解酶（HAase）的活性远低于人和小鼠。结合图文信息，分析裸鼠皮肤成纤维细胞分泌大量高分子量HA的原因是______。

结果显示，裸鼠胚胎期HA合成酶低表达，推测其意义是______。
(3)为进一步研究高分子量HA能否提高小鼠的寿命，研究人员进行了下列实验（图2）。

NeoR：新霉素抗性基因；nmrHas2：裸鼠 HA 合成酶 2 基因；CE：cre 重组酶-雌激素受体融合基因     
注：启动子仅启动相邻基因的表达
①通过转基因技术获得转基因小鼠A：为了将目的基因插入小鼠6号染色体的特定位点，需在其两端设计与6号染色体同源序列，实现同源序列之间的重组。由此获得的转基因小鼠A暂时无法表达HA合成酶2，原因是______。
②B鼠为导入表达CE的纯合子，CE也插入6号染色体的相同位点。外源雌激素可诱导cre重组酶活化，活化的cre重组酶能识别并切除loxP位点间的序列。A、B鼠交配获得C、D鼠，请画出C鼠的基因组成情况______。
③利用C、D鼠进行实验，测得实验组小鼠HA含量升高，癌症概率降低、炎症反应减少，寿命也得到了延长。请写出对照组的选材______（“C”或“D”）及实验处理。
(4)请简述本研究的应用前景_______。
(5)培养U343细胞常在培养基中加入_______，一段时间后用_______消化，制成细胞悬液。
(6)人工合成低表达Per2基因，以某种病毒作为运载体，构建重组DNA，导入到培养好的U343胶质瘤细胞中（实验组），同时还需要设置2组对照组，分别为：________（对照组1）、空白对照组（U343）（对照组2）。
(7)每组等量同龄健康裸鼠，皮下相同部位分别对应注入上述组别的U343细胞，适宜条件下培养，定期记录瘤体体积，记录到成瘤（体积达1000mm3）的时间，处死小鼠，取出瘤体，提RNA和蛋白质。
实验结果：实验组小鼠成瘤时间短于两对照组，且相同时间内实验组瘤体体积大于两对照组。检测各组U343胶质瘤细胞中Per2 蛋白含量（各组mRNA含量关系同Per2蛋白含量关系），如图3所示。

注：图中从左向右依次为实验组、对照组1、对照组2.
由图3结果可知，细胞中GAPDH蛋白表达量相对稳定，在实验中可作为参照，作用是_________。该实验结果说明实验组Per2基因低表达体系构建成功。
(8)已知当DNA损伤后，DNA检测点基因ATM被激活，随后诱发p53激活，而c-myc是原癌基因，p53可与c-myc的启动子相结合发生乙酰化反应，已知c-myc的转录，相关基因表达后蛋白检测如图4（各组mRNA含量关系同蛋白含量关系）

注：图中从左向右依次为实验组、对照组1、对照组2.
由图4可推测，Per2基因的作用为_____。下调Per基因对人胶质瘤细胞U343细胞株中p53的可能调控机制
(9)综上，Per2基因低表达可明显促进胶质瘤的发生发展，请你提出一种可能的调控机制________，导致胶质瘤的发生和发展。

7 . 草甘膦是一种除草剂，但会影响水稻产量。水稻产量与高产基因有关，研究人员拟采用农杆菌转化法对水稻高产基因进行定位，并进一步培育能稳定遗传的抗草甘膦高产水稻新品种。回答下列问题：
Ⅰ.水稻高产基因定位水稻穗粒数可影响水稻产量。农杆菌 Ti质粒的 T－DNA 可以转移并随机插入野生型水稻基因组中（可在基因组单一位点插入也可以同时插入多个位点），导致被插入的基因功能丧失，从而得到一系列水稻突变体。研究者从中筛选得到一株穗粒数异常突变体，并进行下列研究。
(1)提取 DNA。采集适量突变体和野生型水稻的幼嫩叶片，分别冷冻后研磨成粉末状，依次加入SDS、RNA酶等试剂，去除蛋白质和____ 等大分子杂质。提取过程中需加入____酶抑制剂并保持轻柔操作，以避免____，从而提高总 DNA提取率。
(2)PCR扩增。对提取获得的两组总DNA分别进行PCR 扩增。为避免外源DNA等因素的污染，微量离心管、枪头和蒸馏水等在 PCR 前需进行____处理。可以通过在紫外灯下直接观察电泳结果中DNA条带的____及粗细程度来评价扩增是否成功。
(3)结果鉴定。分别用EcoRI、Hind Ⅲ、BamHI三种限制酶处理突变体总DNA 扩增产物，处理后进行电泳，并与野生型 DNA 和 Ti质粒对照。电泳后的 DNA 与含放射性同位素标记的 DNA 探针（T－DNA的一条单链） 进行杂交，得到突变体总 DNA 不同酶切处理后的放射性检测结果如图1所示。

①不同酶切结果的杂交带位置不同的原因是：不同酶切后含____的片段长度不同，因此各组 DNA片段在凝胶中电泳时的____不同，最终导致分布于不同位置。
②若杂交结果显示突变体在不同限制酶处理时均出现杂交带，野生型组____（填“有”或“无”） 杂交带， Ti质粒组____（填“有”或“无”） 杂交带，则表明T－DNA 成功插入水稻染色体基因组中，且可判断突变体为T－DNA____位点插入，依据是____ 。（注：T－DNA 上没有 EcoRI、HindⅢ、BamHI三种限制酶的酶切位点）。
(4)用某种限制酶处理突变体的DNA（如图2所示），断开DNA 分子中的____个磷酸二酯键，再用____将两端的黏性末端连接成环，以此为模板，利用下表中的引物①②进行 PCR，扩增出____序列，扩增产物____（填“不含”或“含”）T－DNA 完整序列。经过与野生型水稻基因组序列比对，确定T－DNA 插入2号染色体上的B基因中。

T-DNA序列	引物序列
5ˊ-AACTATGCGC…….CGTAGCCTAT-3ˊ	①5ˊ-GCGCATAGTT-3ˊ
3ˊ-TTGATACGCG…….GCATCGGATA-5ˊ	②5ˊ-CGTAGCCTAT-3ˊ

(5)研究发现，该突变体产量明显低于野生型，据此推测 B基因可____（填“促进”或“抑制”） 水稻穗粒的形成，可控制高产性状。
Ⅱ.抗草甘膦高产水稻培育，研究者构建如图3所示的Ti表达载体，采用农杆菌转化法将抗草甘膦基因R 和基因B转入野生型水稻中，培育稳定遗传的抗草甘膦高产水稻新品种。

(6)转基因技术的理论基础有：T－DNA 和水稻 DNA 均为____结构、生物界共用一套____等。
(7)根据基因表达载体的结构组成分析，Ti质粒中的CaMV35S 是____，其功能是____酶的识别和结合部位。Ti 表达载体中，B基因和R基因转录的模板链的方向____（填“相同”或“相反”）。
(8)现需选出单一位点插入R基因和B基因且稳定遗传的水稻新品种，筛选方案如下：
①转基因后的水稻植株自交，收获种子（F₁） 并播种在含____的选择培养基上，若能够萌发并生长的个体即为____的个体；
②F₁存活个体自交所得种子（F₂） 按单株收种并播种于选择培养基上，选择存活率约____的培养基中的幼苗继续培养获得F₂植株；
③将F₂植株自交所得种子（F₃）按单株收种并播种于选择培养基上，选择种子全部存活的培养基中的幼苗即为单一位点插入且____的抗草甘膦植株。
④为实现最终育种目标，研究人员还需检测____。

10 . 某果蝇精原细胞的一对常染色体上有五对等位基因，其中一条染色体b、c、d基因所在的片段发生了染色体结构变异倒位。该精原细胞减数分裂联会时，倒位片段会扭曲与同源片段形成倒位环，且联会后两条非姐妹染色单体在基因B、C（b、c）之间或基因C、D（c、d）之间发生了一次交换，交换后形成了无着丝粒片段和双着丝粒桥，无着丝粒片段会因水解而丢失，双着丝粒桥会发生随机断裂，假设断裂处发生在相邻两基因之间。最终该精原细胞完成减数分裂形成四个配子，整个过程如图所示。不考虑基因突变，下列叙述正确的是（　　）

   

A．若一缺失配子基因型为 ad，则另一缺失配子基因型为 ABc

B．若一缺失配子基因型为 ABC，则交换位点发生在基因B、C（b、c）之间

C．若一缺失配子基因型为 a，则双着丝粒桥断裂位点一定发生在 a、d之间

D．若该精原细胞无穷多，且均按图示过程完成减数分裂，则可形成 14 种配子