2 . 黑索金是一种危险的污染物，会渗入到土壤和饮用水中。柳枝稷是一种可修复部分土壤污染物的植物，但其吸收黑索金的能力很弱，研究者利用基因工程技术，导入XplA基因可提高柳枝稷修复黑索金污染土壤能力，据此回答相关问题：

(1)欲获得转基因柳枝稷植物，还需要将图中的农杆菌细胞感染___细胞，再经过___技术培养出植株。
(2)将XplA基因与质粒构建表达载体时，应选择___和___两种酶进行酶切，与只用一种酶切割相比，优点是___。
(3)为了筛选含有目的基因的农杆菌，应先培养在含有___的培养基A上，再培养在含有___的培养基B中。若某农杆菌在培养基A、B中都长出菌落，则___（填“是”或“不是”）含有目的基因的农杆菌。
(4)从个体水平思考，写出鉴定柳枝稷是否具有分解黑索金的实验思路___。

3 . 油菜素内酯（BL）是植物生长发育所必需的植物激素。为研究其跨膜运输机制，我国科研人员进行了如下实验。
实验一：ABCB19过去被认为是运输生长素的转运蛋白，但对ABCB19蛋白突变体植株进行培育，发现其表型与其他的生长素运输蛋白突变体表现出明显差异。
实验二：为探究ABCB19的底物特异性，用纯化的ABCB19分别与生长素（IAA）、赤霉素（GA）、BL在适宜条件下混合，加入足量ATP后，测定各组ATP酶活性，结果见图1。

请回答下列问题
(1)BL在细胞内合成，含有多个亲水基团，可能难以通过______的方式运出细胞。
(2)ABCB19蛋白具有ATP酶活性，与底物结合时会被激活，ATP酶活性可以反映ABCB19的活性。据此分析，图1结果表明______。
(3)结合实验一和二的结果，提出关于转运蛋白ABCB19的假说：______。为验证上述假说，科研人员利用³H标记的BL、脂质体WT和EQ、ATP、ATP酶抑制剂等进行转运实验。请根据图2的结果，补全实验设计表格。

分组	脂质体	3H-BL	ATP	ATP酶抑制剂
甲	①_____	+	+	②_____
乙	WT	+	+	③_____
丙	EQ	+	+	-
丁	④_____	+	+	+

注：WT为含ABCB19蛋白的脂质体，EQ为含突变型ABCB19蛋白的脂质体，突变型ABCB19蛋白不具有ATP酶活性；+表示添加，-表示不添加
(4)图2中曲线甲后期趋于平缓的原因是_____。

4 . 吲哚乙酸（IAA）是人类最早发现的促进植物生长的激素，也是最丰富的天然生长素，是影响植物生长发育的重要激素。回答下列问题：
(1)生长素是由_________经过一系列反应转变而来的。从对生长素的敏感性来讲，芽尖细胞_________（填“大于”“等于”或“小于”）黄化老叶的叶肉细胞。
(2)某实验小组进行了如下实验，并观察实验结果后发现：甲组，具有顶端的植株侧芽生长受抑制；乙组，去除顶芽后侧芽开始生长。由上述实验__________（填“能”或“不能”）得出“顶芽产生的生长素抑制侧芽生长”的结论，若能，说明理由，若不能，请说明理由并在上述实验基础上完善实验并预期结果。________。
(3)研究人员发现拟南芥bud1突变体出现矮小丛生的性状，通过检测野生型和突变体细胞中bud1基因转录的mRNA量，发现突变体的RNA量显著高于野生型。
①上述信息说明，突变体性状产生的原因是________。
②顶端优势由生长素的_________运输引起，为了探究bud1基因与该运输方向的关系从而探讨bud1突变体矮小丛生的内在机理，某科研人员提出“________”这一假设。科研人员分别在突变体和野生型拟南芥胚芽鞘顶端施加放射性的IAA，4h后检测胚芽鞘基部的放射性。若检测结果出现________，则支持该假设。

8 . 某课题组将盐生植物碱茅的抗盐碱基因（PuCAT）导入紫花苜蓿，培育紫花苜蓿新品种。回答下列问题。

   

注：图1中①④、②③为两对引物，PuCAT基因内部无SacI、BamHI、XbaI酶切位点：图2为构建表达载体的P3300质粒，Sac1、BamH1、Xba1为可以切出不同黏性末端的三种限制酶的识别位点，Bar为抗草铵膦基因，Kan^r为卡那霉素抗性基因、Amp^r为氨苄青霉素抗性基因。农杆菌对头孢霉素敏感。
(1)目的基因的获取和表达载体构建。依据_______设计引物，用PCR技术从碱茅的基因组中获取目的基因，然后与P3300质粒连接构建基因表达载体。为保证扩增出的PuCAT与P3300质粒正向连接且不出现自身环化，据图1和2分析，应分别在引物_______的5’端分别添加_______限制酶的识别序列。
(2)采用农杆菌转化法将目的基因导入苜蓿的子叶细胞。转化农杆菌时，应向培养液中添加_______以利于重组质粒进入农杆菌；然后利用含_______的选择培养基对完成转化的农杆菌进行筛选：农杆菌与紫花苜蓿子叶共培养时，重组P3300质粒上的_______可以携带PuCAT和Bar基因转移至植物细胞并整合至植物细胞的染色体DNA上：共培养后立即将子叶转移到含有_______的固体培养基上培养，以获得转化成功的子叶细胞。
(3)转基因植株的培育与检测。将完成转化的紫花苜蓿子叶接种到MS培养基中培养，经过_______或器官发生途径形成转基因植株。PCR检测转基因紫花苜蓿是否含目的基因，需用_______为阴性对照，水为空白对照，含目的基因的重组质粒为阳性对照。进一步检测目的基因表达，提取检测阳性的转基因紫花苜蓿总RNA，并使用逆转录酶，合成_______，进行PCR。经凝胶电泳检测结果为阳性，可以确定目的基因表达出了_______。

9 . 喹啉是一种典型的含氨杂环污染物，广泛存在于焦化废水中，具有致畸、致癌、致突变作用，易通过水体污染环境。为高效处理喹啉污染，科研人员通过对焦化废水处理厂的活性污泥进行逐级驯化，筛选出高效喹啉降解复合菌群，实现含喹啉废水的高效工业化处理。图1为构建过程示意图，请回答下列问题：

(1)富集培养基的成分有胰蛋白胨10g、NaCl10g、酵母粉5g、蒸馏水1000mL，其中属于氮源的有___。将富集培养基的pH调整到7.0，应在___操作前。过程①将污泥样品接种至富集培养基中30℃、200r·min^-1摇床振荡培养7d，摇床振荡培养有利于___，进而促进菌群的生长。
(2)过程②中，逐级提高无机盐培养基中喹啉浓度的目的是___。从用途角度分析，无氮无机盐培养基属于___培养基。
(3)过程④的接种工具为___。在统计甲上的菌落时，需每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以免___。
(4)过程⑤接种的方法为___。与③中培养基相比，乙平板的培养基需添加的物质为___。
(5)图2为复合菌群对不同浓度喹啉降解曲线。据图分析，该复合菌群降解喹啉的最高水平浓度为___。喹啉的代谢涉及一系列的代谢过程，单菌降解喹啉最高水平为700mg·L^-1（48h），复合菌群具有更佳降解效果的原因可能有___；不同菌种的培养条件存在差异，为进一步提高复合菌群的降解效率，后续实验可探究___等对菌群降解效率的影响。