5 . 为研究Atu5117启动子能否独立启动下游基因的表达，研究人员利用重叠延伸PCR技术，获得“Atu5117启动子和绿色荧光蛋白基因（GFP）”的“嵌合序列”，再构建基因表达载体（仅使用1种限制酶），以获得含有“嵌合序列”的重组DNA分子。相关过程、基础质粒及限制酶的酶切位点如图1所示。回答下列问题：

(1)重叠延伸PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg²⁺，以激活______，PCR中预变性时间比循环过程中变性时间长，其原因是______。
(2)由阶段2“变性后杂交”的原理可知，引物2和引物3在碱基序列上的要求是_____。
(3)阶段3构建基因表达载体需要的酶有______，它们作用的化学键是______。
(4)本实验中，在阶段3需破坏基础质粒上T7启动子的结构，从而使得GFP的表达仅受Atu5117启动子的调控，因此，在设计阶段1和2的引物时，需确保______（填引物名称）上含有______（填限制酶的名称）的识别序列。
(5)提取受体细胞的相应DNA，利用与阶段3相同的限制酶酶切，进行DNA电泳检测，结果如图2。已知Atu5117启动子、GFP基因、基础质粒的序列大小分别约为490bp、750bp、2750bp（bp代表碱基对），据图判断受体细胞______中成功导入了重组DNA分子。

9 . 自新冠肺炎疫情爆发以来，“公勺公筷”成为了人们的热议话题。使用公勺公筷能否有效降低细菌和真菌的传播风险？兴趣小组在老师的带领下进行了如下实验：
步骤1：在食堂选取8道实验菜品，每道菜分别用无菌餐具均分为三份，并分别放在标明“空白”“使用公勺公筷”、“不使用公勺公筷”的无菌盘子里。“空白”组静置于就餐环境中作为空白留样，并加盖密封。
步骤2：公开招募十六名健康就餐同学，按年龄、性别等因素将其均分为两组，分别作为“使用公勺公筷”组、“不使用公勺公筷”组菜品的食客。
步骤3：兴趣小组同学对餐后的剩余菜品和空白组分别进行无菌采样。样品经过48小时培养，结果如表。
步骤4：重复两遍以上实验，测试结果与下表类似。
八道实验菜品菌落总数含量（单位 CFU/g）

实验菜品	泡菜	凉拌黄瓜	烧白	红烧牛肉	青椒肉丝	家常豆腐	炒时蔬	蛋花汤
空白组	320	380	4	2	6	5	10	4
“使用公筷”组	400	450	6	120	20	18	280	18
“不使用公筷”组	9.6×103	1.1×103	180	420	320	30	480	30
CFU/g是每克样品培养的菌落个数

(1)每道菜均进行空白留样的目的是_________________，将采样的样品放到培养基上相当于微生物一般培养方法中的_______________。
(2)根据表格数据，凉菜的菌落总数远比热菜多的可能原因是______________。（写一点即可）
(3)经过重复实验，分析实验数据，发现“使用公勺公筷”组比“不使用公勺公筷”组的菌落数目________(填“较多”或“较少”) ，实验结论是________________________________。
(4)根据上表格中数据，你对“使用公勺公筷”的态度是_________________。（写一点即可）