2 . 基因工程中的载体分为克隆载体和表达载体。克隆载体用来克隆和扩增DNA片段，而表达载体是使外源基因在宿主细胞中有效表达。图1为利用乳腺生物反应器生产某种药用蛋白过程中使用的一种载体，其中含有氨苄青霉素抗性基因（Amp^r）、四环素抗性基因（Tet^r）及多种限制酶的识别位点；图2为目的基因及限制酶的识别位点。回答下列问题：

(1)图1所示的载体为______载体，判断依据是__________________。
(2)质粒上一般具有两种抗生素抗性基因，且其中一个会因目的基因的插入而失活。这种双标记和插入失活能使____________（质粒）的受体细胞在含有抗生素的培养基中得以区分。
(3)构建重组质粒时不能使用SmaI的原因是________。限制酶的最好选择为______。
(4)重组质粒的受体细胞和目的基因表达的细胞分别是____________和___________。

3 . 糖尿病是近年来高发的“富贵病”，常见类型有遗传型糖尿病和Ⅱ型糖尿病。遗传型糖尿病的主要病因之一是胰岛受损。科研机构做出如下设计：取糖尿病患者的细胞，将人的正常胰岛素基因导入其中，然后进行细胞培养，诱导产生胰岛组织，重新植入患者的胰岛，使胰岛恢复功能。Ⅱ型糖尿病需要注射胰岛素治疗。目前临床使用的胰岛素制剂注射120min后才出现高峰，与人体生理状态不符。科研人员通过一定的工程技术手段，将胰岛素B链的28号和29号氨基酸互换，获得了速效胰岛素，速效胰岛素已通过临床试验。
(1)对遗传型糖尿病患者进行治疗的基因工程步骤中的核心步骤是________________。
(2)科研人员利用蛋白质工程合成速效胰岛素，该技术的实验流程为

   

其中，流程A是_________，流程B是____________。
(3)与基因工程相比，蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因______________或基因______________，对现有蛋白质进行______________，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产生活需要。

4 . 草甘膦是农业生产中使用的除草剂，从某种细菌中提取草甘膦抗性基因转入棉花植株，获得抗草甘膦的转基因棉花。回答下列问题。
(1)提取到的草甘膦抗性基因可通过_____扩增。
(2)草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5′——ATGGCT………AGGAAC——3′
3′——TACCGA………TCCTTG——5′
根据上述序列，应选择_____（填字母）作为引物进行草甘膦抗性基因的扩增。
A.引物：5′-TACCGA-3′       B.引物：5′-GTTCCT-3′
C.引物：5′-AUGGCU-3′       D.引物：5′-ATGGCT-3′
(3)要使草甘膦抗性基因能在受体细胞中正常表达，需要利用质粒构建成_______________，不能直接将草甘膦抗性基因导入受体细胞，原因是___________。
(4)农杆菌转化法把草甘膦抗性基因导入棉花细胞，脱分化形成__________后，草甘膦抗性基因没有表达，再分化发育成棉花植株后，草甘膦抗性基因正常表达，原因是______。

5 . 放牧可以开发草原的经济价值，但也是生态系统结构和功能变化的重要干扰因素。为探讨高寒草原生长季禁牧（CK）、轻度放牧（LC）、中度放牧（MG）和重度放牧（HG）等不同放牧强度对多年生混播人工草地的影响，研究人员开展了相关实验，结果如下表所示。回答下列问题：

放牧强度	Ck	LG	MG	HG
植被物种丰富度（种）	24	31	28	21
植被地上生物量（g·m-2）	110.5	178.2	126.9	119.9

(1)为获得原始数据，研究小组使用样方法来调查高寒草地植被丰富度，取样的关键在于要保证______。而样方法只能获得植被丰富度而不能获得草地动物的丰富度，其原因是______。
(2)由表可知。随着放牧强度增大。该高寒草地生态系统的自我调节能力总体变化趋势是______。多年观察发现，过度放牧会导致草地严重退化甚至出现土壤沙化，高山沙化土壤上很难再长出植被，这种现象说明了______。
(3)______和______都会使高寒牧区物种丰富度下降，从保护生物多样性的角度，这说明人类在自然资源的利用上应______。
(4)分析表中结果。请给出保护高寒牧区生态系统稳定性的可行性措施和依据。
可行性措施：__________________________
依据：___________________________

6 . 甜菜是我国重要的糖料作物之一，为提高其光合作用效率和产量。科研工作者利用基因工程技术将SBPase基因（编码卡尔文循环过程中的关键酶）导入甜菜中进行遗传改造。该过程所利用的质粒载体和SBPase基因分别如图1和图2所示。回答下列问题：

   

注：真核启动子可启动下游基因在真核细胞内的表达，原核启动子可启动下游基因在原核细胞内的表达。
(1)获取SBPase基因后利用______技术进行扩增，经______技术鉴定后，回收其中包含目的基因的DNA片段。
(2)SBPase基因两端不具有限制酶切割位点，为保证SBPase基因正确连接在质粒载体上，应在SBPase基因左、右两端分别添加限制酶______的识别序列，具体操作是在扩增SBPase基因时______。将质粒载体与扩增得到的目的基因用限制酶切割后再用______酶处理。构建重组质粒。
(3)已知卡那霉素和潮霉素可与原核细胞核糖体以及真核细胞线粒体、叶绿体中的核糖体结合，进而阻止基因表达的______过程，而不能与真核细胞细胞质基质中的核糖体合，据此分析，重组质粒导入农杆菌后，需在含______（选填“卡那霉素”或“潮霉素”）的培养基上培养。从而筛选出含重组质粒的农杆菌。
(4)将含有重组质粒的农杆菌与甜菜叶柄共培养一段时间后。再转入含有潮霉素的选择培养基，可筛选出抗性植株，机理为________________________。
(5)随机选取8株上述抗性植株，利用SBPase基因引物进行扩增。产物的电泳结果如图3所示，初步判断目的基因______（选填“是”或“否”）已经整合到甜菜染色体中，判断的依据是________________。

   

注：M－DNA标准样品；CK⁺－阳性质粒；CK⁰－空白对照；CK^-―野生型健策；1-8－转基因植株。

7 . 研究表明。相对于动物。植物的细胞呼吸还包括另一条由交替氧化酶（AOX）主导的途径，该呼吸途径可帮助其抵抗强光等逆境，具体过程如图所示，其中iATP为细胞内ATP，eATP为细胞外ATP。

   

(1)若要将叶肉细胞中叶绿体与线粒体等其他细胞器分离，常采用的方法是______（答1种即可）。从结构上来看，二者都具有______层膜。
(2)据图推测，图1中的光系统Ⅰ和光系统Ⅱ应位于______膜上。在暗反应阶段，NADPH参与卡尔文循环时的具体作用是______（答出2点即可）。
(3)强光下，光反应产生的NADPH量大于暗反应的消耗量，使叶绿体内NADP⁺含量______。植物细胞通过“苹果酸—草酰乙酸穿梭”途径，将过多的NADPH转移出叶绿体，并最终通过AOX呼吸途径将其中大部分能量以______的形式散失，从而有效缓解强光对植物细胞内光系统的损伤。同时，eATP通过DORN1受体可缓解因交替呼吸抑制引起的光系统反应效率下降，进一步避免光抑制现象产生，因此强光照射下植物可避免光抑制，该调节过程为______（填“正反馈”或“负反馈”）。
(4)目前尚未发现在植物细胞的表面或质膜上存在ATP合酶，eATP可来源于______（填场所）产生的iATP，据图判断，eATP最可能是作为一种信号分子调节植物的光合作用，理由是______。

8 . 热性惊厥（FC）是指当患儿上呼吸道感染或其他感染性疾病导致体温在38～40℃时发生的惊厥。幼儿由于脑发育不成熟。对体温的控制力不强。当机体高热时。患儿的神经细胞会释放大量的谷氨酸。下图为其部分调节过程示意图。分析回答问题：

(1)机体的体温调节中枢位于______。安静状态下，人体热量主要来自______等器官。
(2)大量的谷氨酸释放后，与______上的A受体结合，促进Ca²⁺进入细胞内，正常生理状态下，当细胞内Ca²⁺过多时，可通过______的方式逆浓度将过多的Ca²⁺排出，以避免可能引起的神经细胞衰老或死亡。大量Ca²⁺进入幼儿神经细胞细胞内，会促进产生过量的一氧化氮，使神经元与肌肉细胞的细胞膜对钠离子通透性______引发动作电位。导致惊厥发作。
(3)病原体感染后，机体体温升高的直接原因是______。病原体感染会引起机体释放致热性细胞因子，导致体温调定点（正常生理状态下为37℃）上升。一方面，下丘脑发出的神经支配肌肉收缩。使产热量增加。同时毛细血管收缩，______，使散热量减少；另一方面，下丘脑分泌______，调节甲状腺激素分泌增加，细胞代谢加强，产热量增加，最终导致体温升高。
(4)为验证某种中药材X具有解热作用并通过影响体温调节中枢调控体温，将X的粉末溶解于生理盐水后，采用灌胃的方法利用发热大鼠进行实验，简要写出实验思路：______。

9 . 玉米是二倍体植物（2N=20），同株异花，是遗传学上常用的实验材料。回答下列问题：
(1)若要对玉米的基因组进行测序。则需要测______条染色体上的DNA序列。
(2)已知玉米抗病与易感病是一对相对性状，受一对等位基因控制。让抗病玉米为父本与易感病玉米为母本进行杂交育种时，需要进行人工杂交实验，具体的做法是____________。在一对等位基因控制的相对性状中（只考虑完全显性的情况），杂合子表现出的性状称为______。
(3)科研人员用耐盐碱抗病纯合品系与不耐盐碱易感病品系为亲本进行杂交，F₁全为耐盐碱抗病个体。F₁自交。F₂中耐盐碱抗病:耐盐碱易感病:不耐盐碱抗病:不耐盐碱易感病=6:3:2:1，该实验结果说明说明耐盐碱基因与抗病基因的遗传遵循______定律，F₂出现6:3:2:1的比例的原因可能是____________。

10 . 已知红玉杏花朵颜色由两对基因(A、a和B、b)控制，A基因控制色素合成，该色素随液泡中细胞液 pH 降低而颜色变浅；B基因与细胞液的酸碱性有关。其基因型与表型的对应关系见下表：

基因型	A_ bb	A_ Bb	A_BB、aa _
表型	深紫色	淡紫色	白色

(1)纯合白色植株和纯合深紫色植株作亲本杂交，F₁ 全部是淡紫色植株，则该杂交亲本的基因型组合是_______。
(2)有人认为A、a和B、b基因位于一对同源染色体上，也有人认为A、a和B、b基因分别位于两对同源染色体上。现利用淡紫色红玉杏(AaBb)设计实验进行探究。
实验步骤：让淡紫色红玉杏(AaBb)植株自交，观察并统计子代红玉杏花的颜色和比例(不考虑互换)。
实验预测及结论：
①若子代红玉杏花色及比例为，则 A、a和B、b基因分别在两对同源染色体上。
②若子代红玉杏花色及比例为_______，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和B在一条染色体上。
③若子代红玉杏花色及比例为_______，则A、a和B、b基因在一对同源染色体上，且A和b在一条染色体上。
(3)若A、a和B、b基因分别位于两对同源染色体上，则淡紫色红玉杏(AaBb)自交，F₁中白色红玉杏的基因型有_______种，其中纯种个体占_______。