1 . 水稻是人类重要的粮食作物之一，种子的胚乳由外向内分别为糊粉层和淀粉胚乳，通常糊粉层为单层活细胞，主要累积蛋白质、维生素等营养物质；淀粉胚乳为死细胞，主要储存淀粉。选育糊粉层加厚的品种可显著提高水稻的营养。
(1)用诱变剂处理水稻幼苗，结穗后按图1处理种子。埃文斯蓝染色剂无法使活细胞着色。用显微镜观察到胚乳中未染色细胞层数_____________的即为糊粉层加厚的种子，将其对应的含胚部分用培养基培养，筛选获得不同程度的糊粉层加厚突变体ta_l、ta₂等，这说明基因突变具有_____________的特点。

(2)突变体tal与野生型杂交，继续自交得到F₂种子，观察到野生型：突变型=3=1，说明该性状的遗传遵循基因_____________定律。利用DNA的高度保守序列作为分子标记对F₂植株进行分析后，将突变基因定位于5号染色体上。根据图2推测突变基因最可能位于_____________附近，对目标区域进行测序比对，发现了突变基因。
(3)由ta_l建立稳定品系t，检测发现籽粒中总蛋白、维生素等含量均高于野生型，但结实率较低。紫米品系N具有高产等优良性状。通过图3育种方案将糊粉层加厚性状引入品系N中，培育稳定遗传的高营养新品种。

①补充完成图3育种方案_____。
②运用KASP技术对植物进行检测，在幼苗期提取每株植物的DNA分子进行PCR，加入野生型序列和突变型序列的相应引物，两种引物分别携带红色、蓝色荧光信号特异性识别位点，完成扩增后检测产物的荧光信号（红色、蓝色同时存在时表现为绿色荧光）。图3育种方案中阶段1和阶段2均进行KASP检测，请选择其中一个阶段，预期检测结果并从中选出应保留的植株。______
③将KASP技术应用于图3育种过程，优点是________。

2 . 科研人员获得了携带两种抗稻瘟病的抗性基因Pib和Pikm的水稻品系——川抗30，以及携带螟虫抗性基因CrylC的水稻品系——昌恢。为获得同时携带抗螟虫基因和两种抗稻瘟病基因的改良株系，开展了相关研究。
(1)水稻的稻瘟病抗性与敏感为一对______。利用川抗30品系与野生型稻瘟病敏感水稻杂交，F₁表现为稻瘟病抗性，F₁与野生型杂交，子代性状及分离比为______，证明Pib和Pikm位于非同源染色体上。
(2)吕恢品系水稻在品质和产量上明显优于川抗30，科研人员结合分子标记技术筛选目标基因进行杂交育种，以获得改良优质水稻。请写出制备优质、高产的纯合双抗（抗螟虫和抗稻瘟病）水稻的杂交育种技术路线（总体思路）______。
(3)研究者利用PCR技术检测改良优质水稻中是否含有Pib基因。
①下表为利用PCR进行检测的反应体系的配方，请将表格补充完整。
PCR反应体系

组分	总体积/10μL
10倍浓缩的扩增缓冲液	1μL
i______	1.5μL
4种脱氧核苷酸等量混合液（2.5mmol·L-1）	0.5μL
引物I/II（5.0μmol·L-1）	1/1μL
Taq DNA聚合酶	0．20μL
H2O	ii______

②图为Pib基因的部分序列。
5'—…AATGCCC…ATGTGGA…—3'
3'—…TTACGGG…TACACCT…—5'
根据图，选择______作为引物对Pib基因进行扩增。
A．5'—…AATGCCC…—3'       B．5'—…TCCACAT…—3'
C．5'—…TTACGGG…—3'       D．5'—…ATGTGGA…—3'
研究者最终确定改良优质水稻具备了相关抗性基因，成功培育出优质、高产的双抗水稻。
(4)检测发现本研究获得的优质双抗水稻的部分性状与昌恢品系相比出现株高上升、千粒重下降的现象，但是利用基因定点编辑技术获得的纯合抗性突变株系，其他性状未发生改变，原因可能是______。请从育种的角度对这两种技术进行评价。

4 . ⁶⁰Co辐射可使部分花粉活力降低， 通过受精过程可诱导卵细胞发育成单倍体幼胚。科研人员利用此原理， 通过下图所示操作培养西葫芦优良品种。

下列相关叙述不正确的是（       ）

A．雌花套袋的目的是防止外来花粉的干扰

B．经②得到的部分幼苗体细胞染色体数目可能与④获得的品种相同

C．④处理可在有丝分裂前期抑制纺锤体的形成

D．③应挑选幼苗中叶片大、茎秆粗壮的个体即为单倍体

5 . 马铃薯软腐病是一种细菌性病害，常引起马铃薯栽培品种的块茎腐烂现象。马铃薯二倍体野生种不结块茎，但对软腐病具有高水平的抗性；该抗性遗传模式比较复杂，涉及到的基因分布于整个基因组的12条染色体上。马铃薯栽培种与野生种有性杂交很难成功，研究人员尝试通过植物体细胞杂交技术将抗性基因转移到马铃薯栽培种中。
(1)利用植物体细胞杂交技术，获得了马铃薯四倍体栽培种品系甲（染色体：2n=48）和二倍体野生种乙（染色体：2m=24）的杂种植株丙（染色体：2n=72）若干，对体细胞杂种丙的叶片组织进行离体培养，获得了四倍体株系丁。用马铃薯四倍体栽培种品系甲做父本，与体细胞杂种丙进行回交，获得了五倍体回交后代（戊）。
①马铃薯栽培品种与二倍体野生种有性杂交很难成功的原因是________。
②用文字和箭头表示通过植物体细胞杂交技术获得丙的基本过程。
③杂种植株丙是_________倍体。如图1所示，上述育种过程得到的丙、丁、戊大部分都能产生块茎，但是形成的块茎在形态和皮色方面呈现出一定的变异。图1中2所示的对照品种为__________。

(2)按照下列方法对图1所示的块茎进行软腐病抗性的测定：每个株系取10个重约100g的块茎，用打孔器在块垄上打孔后，注入50μL软腐病菌菌液，再将打孔器打出的块茎放回原处，用凡士林密封伤口，称重。放置一周后，将腐烂的块茎组织用水洗掉，用吸水纸吸干水分，重新称重，结果如图2。块茎的病变组织与健康组织间存在明显的界限，不抗软腐病株系的块茎接种部位周围的组织变软腐烂，呈浅黄色或褐色。

实验结果说明_________。
(3)若要向马铃薯栽培种转入软腐病的抗性基因从而使其获得抗性，具有较大困难。根据本文资料信息分析其原因是___________。
(4)科研人员选育出广谱抗软腐病菌的枯草芽孢杆菌，制成菌剂。从发酵工程应用的角度，该菌剂属于___________。

10 . 水稻是我国主要的粮食作物，获得具有杂种优势的杂交种子是提高水稻产量的重要途径。
(1)水稻花是两性花，杂交实验中，为了防止母本_____，须进行人工去雄。水稻花非常小，人工去雄操作难度大。科学家发现的安农S-1温敏不育系突变体水稻在温度高于26℃时表现为花粉败育，在杂交时只能做_____，免去了人工去雄的工作，因此作为重要材料用于水稻杂交育种。
(2)将野生型与安农S-1杂交，F₁均为野生型，F₁自交后代中野生型：雄性不育=3：1，说明_____。（答出2条）
(3)安农S-1在不同的温度条件下既可作为不育系用于杂交制种，又可以自身繁殖，简化了制种程序，使杂交水稻的大规模种植成为可能。请写出利用安农S-1和野生型水稻繁殖不育系、制备杂交种子的流程_____。（用文字或图示作答均可）
(4)研究者用γ射线处理安农S-1种子，筛选获得了两个在32℃及以上表现为花粉败育的隐性突变体t₁和t₂，请设计实验验证t₁和t₂是同一基因突变引起的雄性不育，写出设计思路和预期结果_____。
(5)在制种时偶遇低温天气会影响杂交种子的纯度进而影响杂交稻产量，与安农S-1相比，突变体t₁和t₂是否更有利于制种？判断并说明理由_____。