解题方法
1 . 血管新生在肿瘤发生和发展中起关键作用,为了研究血管生成素(Ang)是否能促进血管生成及作用原理,科学家构建了绿色荧光蛋白(GFP)基因和血管生成素融合基因,将其导入大肠杆菌来生产GFP -Ang融合蛋白,过程如图,字母a~h代表引物,序号①~⑤表示过程。(1)Ang的cDNA可在细胞中提取mRNA后经___ 获得。为了过程②形成正确的GFP-Ang融合基因,在进行过程①(PCR)时需选择正确的引物并在引物___ (填字母)的5'端添加BamHⅠ限制酶识别序列,且添加的识别序列位于CFP基因中终止密码子编码序列的___ (“内侧”或“外侧”)。
(2)过程③的目的是___ 。此时,为了使融合基因定向插入载体,要选用___ 两种限制酶切割融合基因和载体。生产中需要大肠杆菌在某些特定诱导物作用下表达GFP-Ang融合蛋白,则要在载体上构建___ 。
(3)以大肠杆菌作为受体细胞的优点有___ (答出两点)。经过程④后的大肠杆菌需培养在含有___ 的培养液中,破碎大肠杆菌并提取到发绿色荧光的物质就是GFP-Ang融合蛋白。
(4)鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异,科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的CFP-Ang融合蛋白处理,统计鸡胚毛细血管生成情况,结果如下表。
统计结果说明了___ 。若进一步观察到绿色荧光分布于毛细血管表面,则说明,Ang发挥作用的方式可能是与细胞表面的___ 相结合来实现的。
(2)过程③的目的是
(3)以大肠杆菌作为受体细胞的优点有
(4)鉴定GFP-Ang融合蛋白与天然Ang作用效果差异,科学家取鸡胚分别用缓冲液、缓冲液溶解的天然Ang、缓冲液溶解的CFP-Ang融合蛋白处理,统计鸡胚毛细血管生成情况,结果如下表。
组别 | 血管数量 |
缓冲液 | 7.38 |
缓冲液溶解的天然Ang | 36.5 |
缓冲液溶解的GFP-Ang融合蛋白 | 29.94 |
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2024-05-10更新
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113次组卷
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2卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
解题方法
2 . 巢式PCR是一种使用两对引物扩增完整的片段的PCR。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对为内部引物结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增,其过程如下图所示。下列说法错误的是( )
A.两轮扩增所需引物不同,原料和酶相同 |
B.DNA的合成总是从子链的5'端向3'延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关 |
C.用内引物进行PCR时,扩增n次后理论上需要2n个引物 |
D.巢式PCR可增强扩增的特异性 |
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2024-05-10更新
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89次组卷
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2卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
名校
3 . 科学家从某植物中提取乙烯受体基因(Ers1),通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中,筛选出转入反义Ersl基因的该种植物,其果实的储藏期将延长,过程如图所示。下列说法错误的是( )
A.PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhoI、HpaI酶切序列 |
B.过程②可用氯化钙处理农杆菌,有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中 |
C.过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选 |
D.可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因 |
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2024-05-01更新
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108次组卷
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3卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
解题方法
4 . 在基因工程中可利用PCR进行体外DNA片段的扩增,PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列说法错误的是( )
A.PCR利用DNA热变性原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚及与引物的结合 |
B.耐高温的DNA聚合酶需要激活,PCR反应缓冲液中需要添加Mg2+ |
C.电泳时DNA分子会向它所带电荷相反的电极移动,迁移速率与凝胶浓度、DNA分子大小和构象有关 |
D.琼脂糖凝胶中的DNA扩增引物分子被核酸染料染色后可在紫外灯下被检测出来 |
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2024-05-01更新
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95次组卷
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2卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题
解题方法
5 . 下图表示获得抗除草剂转基因玉米的技术路线,其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能使某种能被细胞吸收的无色物质K呈现蓝色。回答下列问题:(1)基因工程的核心是____________ ,该步骤中通常选用两种不同的限制酶,其优点是___________ 。
(2)图示过程中选用农杆菌,是因其Ti质粒上有一段包含报告基因的T-DNA序列,该片段能进入植物细胞并_____________ ,从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔遗传定律。
(3)农杆菌转化愈伤组织的过程中,常残留在愈伤组织表面,可能会导致未转化的愈伤组织在含除草剂的培养基中生长。因此,进行筛选2时,应在培养基中添加____________ ,并挑选___________ 的愈伤组织细胞,用于植物组织培养。
(4)通过PCR技术扩增G基因,需要以____________ 为原料,扩增6次需要两种引物各____________ 个。为了将获得的C基因准确连接至质粒上,需要在两种引物的________ (填“5′”或“3′”)端分别添加相应限制酶的识别序列;同时G基因必须正确插入到____________ 和___________ 之间,其中后者是位于基因前端的片段,其作用是___________ 。
(2)图示过程中选用农杆菌,是因其Ti质粒上有一段包含报告基因的T-DNA序列,该片段能进入植物细胞并
(3)农杆菌转化愈伤组织的过程中,常残留在愈伤组织表面,可能会导致未转化的愈伤组织在含除草剂的培养基中生长。因此,进行筛选2时,应在培养基中添加
(4)通过PCR技术扩增G基因,需要以
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2024-04-27更新
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670次组卷
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3卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下二学期期中考试生物试题
6 . 下列关于生物工程和技术的表述正确的是( )
A.杂交瘤细胞制备过程中,可用减毒的病毒诱导细胞融合 |
B.胚胎移植中,供体和受体相当于双亲中的父本和母本 |
C.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,需要加指示剂且要在紫外灯下观察 |
D.用PCR技术扩增目的基因时,为保证准确复制需要提前知道基因的全部序列 |
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2024-04-23更新
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311次组卷
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2卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下二学期期中考试生物试题
名校
7 . 科研人员按照如图所示流程从盐湖土壤中分离筛选出了一株高产α-淀粉酶的耐盐性菌株NWU-8,并通过He-Ne激光照射提高该菌株产α-淀粉酶的能力,实验中需要a、b两种培养基,a的组分为牛肉膏、蛋白胨、高浓度NaCl、水,相比培养基a,培养基b的组分增加了可溶性淀粉。回答下列问题。(1)配制好的培养基通常采用的灭菌方法是____________ 。实验小组为获得耐盐纯培养物,使用的培养基应是____________ (选填“普通培养基”或“选择培养基”),使用的接种方法是____________ 。
(2)为获得纯培养物的耐盐基因X,实验小组应用纯培养物提取了DNA,检测DNA所用的试剂及原理是____________ 。获得PCR产物后,用琼脂糖凝胶电泳对PCR产物进行鉴定,影响DNA分子迁移速率的主要因素有______________ (答出两点即可)。
(3)要在培养基上形成菌落,a、b培养基中均还应加入____________ ,挑取a培养基平板上的菌落进一步划线纯化时,下列图示中正确的操作示意图为____________ 。(4)培养基a的作用是_____________ ,b培养基平板滴加碘液后,部分菌落周围出现透明圈,根据菌落直径和透明圈大小,____________ 的菌落初步判断为产酶能力较高的菌株。
(5)He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选,因为He-Ne激光照射引起的变异具有不定向的特征。最后获得的纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵,摇瓶培养的目的是_____________ ,发酵过程中可通过____________ 法检测活菌的数量。
(2)为获得纯培养物的耐盐基因X,实验小组应用纯培养物提取了DNA,检测DNA所用的试剂及原理是
(3)要在培养基上形成菌落,a、b培养基中均还应加入
(5)He-Ne激光照射诱导后的菌种需要对耐盐性和产酶能力等进行检测和筛选,因为He-Ne激光照射引起的变异具有不定向的特征。最后获得的纯净高产菌种进行液体摇瓶发酵,摇瓶培养的目的是
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2024-04-07更新
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319次组卷
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3卷引用:山东省烟台市招远市第二中学2023-2024学年高二下二学期期中考试生物试题
名校
8 . RT-PCR是将mRNA逆转录获得cDNA的方法和cDNA聚合酶链式反应相结合的技术。某兴趣小组为该过程设计了相关引物并进行实验。下列说法错误的是( )
A.PCR过程主要涉及的酶是耐高温的DNA聚合酶,反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+ |
B.一般情况下,引物A和B的长度越长C和G比例越高,则PCR循环步骤中的复性温度设定就越低 |
C.PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,其中的DNA分子可用核酸染料染色 |
D.实验后发现几乎不能得到扩增产物,原因可能是引物B自身出现了局部碱基互补配对而失效 |
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2023-08-09更新
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353次组卷
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8卷引用:山东省烟台市2022-2023学年高二4月期中生物试题
名校
9 . 人凝血酶Ⅲ是一种分泌蛋白,可预防和治疗急慢性血栓。重组人凝血酶Ⅲ是世界上首个上市的动物乳腺生物反应器生产的重组蛋白药物。下列相关叙述错误的是( )
A.可从人细胞中提取RNA后利用逆转录PCR技术获取目的基因 |
B.目的基因的上游需连接在乳腺细胞中特异表达基因的启动子 |
C.用显微注射技术将表达载体导入乳腺细胞来获得转基因动物 |
D.若用大肠杆菌作为受体细胞难以获得活性高的人凝血酶Ⅲ |
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2023-01-07更新
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1048次组卷
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10卷引用:山东省烟台市招远一中2022-2023学年高二下学期期中生物试题
山东省烟台市招远一中2022-2023学年高二下学期期中生物试题北京市东城区2022-2023学年高三1月期末生物试题(已下线)3.3基因工程的应用(课后)北京市海淀区2023高三下学期期中(一模)生物试题变式题11-15江西南昌市二中2022-2023学年高二下学期第三次月考生物试题河南省南阳市唐河县一中2022-2023学年高二2月月考生物试题北京市二中2023-2024学年高三10月月考生物试题河北师范大学附属实验中学2023-2024学年高三9月月考生物试题期末冲刺卷03-2022-2023学年高二生物下学期期中期末考点大串讲第3章 基因工程(测试卷)-2022-2023学年高二生物下学期期中期末考点大串讲
名校
10 . 研究发现光合作用光反应产生的ATP与NADPH数量比是2.57∶2,而暗反应消耗的ATP与NADPH数量比是3∶2,NADPH积累成为光合作用限速因素之一。我国科学家向蓝细菌中导入合成异丙醇(一种工业原料)的三种关键酶基因辅酶A转移酶(CTFAB)基因、乙酰乙酸脱羧酶(ADC)基因、仲醇脱氢酶(sADH)基因,以期提高细胞光合速率,相关机理如下图1.(1)蓝细菌光反应将光能转化为_____ ,完成这一过程需要光合片层上附着的_____ 等参与。根据图示引入异丙醇合成途径可能提高光合速率,原因是______ 。
(2)研究人员培育出了两种蓝细菌SM6、SM7,提取两种蓝细菌的总RNA利用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)对SM6、SM7细胞中三种关键酶基因进行扩增,对扩增产物进行电泳得到图2所示结果。与野生型蓝细菌相比SM6细胞中积累的物质最可能是______ 。野生型、SM6、SM7三种菌株在适宜条件下,光合速率最快的可能是________ ,原因是________ 。
(3)挑选出符合要求的菌株后,需进一步探究引入异丙醇合成途径对其光合速率的影响。取等量的野生型和符合要求的菌株分别置于两个密闭的透明装置中,在适宜光照条件下培养,测定一段时间内装置中氧气的增加量再将装置进行______ 处理,测定_____ ,通过计算得出______ 。
(2)研究人员培育出了两种蓝细菌SM6、SM7,提取两种蓝细菌的总RNA利用RT-PCR(逆转录-聚合酶链反应)对SM6、SM7细胞中三种关键酶基因进行扩增,对扩增产物进行电泳得到图2所示结果。与野生型蓝细菌相比SM6细胞中积累的物质最可能是
(3)挑选出符合要求的菌株后,需进一步探究引入异丙醇合成途径对其光合速率的影响。取等量的野生型和符合要求的菌株分别置于两个密闭的透明装置中,在适宜光照条件下培养,测定一段时间内装置中氧气的增加量再将装置进行
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306次组卷
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5卷引用:山东省烟台市2022-2023学年高三11月期中学业水平诊断考试生物试题