1 . 我国科研人员通过基因治疗,成功治愈了全球首例β-地中海贫血症患者。研究人员运用高精准变形式碱基编辑器(tBE),对患者自体造血干细胞中的单个碱基进行编辑,以重新激活γ-珠蛋白的表达,最终使患者血红蛋白水平恢复正常,过程如图1 所示。相较于图2中基于 CRISPR 技术的β-地贫基因编辑疗法,该方法见效更快、疗效更好,且不引发患者基因组突变或片段缺失。请回答下列问题。____________ 。
(2)据图2分析CRISPR 技术中gRNA 起____________ (填“导向”或“切割”)的作用。相比 CRISPR 技术(切断双链),tBE 不需要破坏DNA 双链就能对致病的碱基突变进行校正,由此可知tBE 具有________ 优点(写出1点即可)。
(3)为了检测目的基因是否翻译成γ-珠蛋白,可采用的技术为____________ 。采用自体造血干细胞编辑移植的优点为________________________________ (写出1点即可)。
(4)欲验证图1中基因治疗方法对β-地中海贫血症患者的疗效,请写出大致实验思路。(注:使用的测量工具无需说明,β-地中海贫血症志愿者、健康志愿者多人)__________________
(2)据图2分析CRISPR 技术中gRNA 起
(3)为了检测目的基因是否翻译成γ-珠蛋白,可采用的技术为
(4)欲验证图1中基因治疗方法对β-地中海贫血症患者的疗效,请写出大致实验思路。(注:使用的测量工具无需说明,β-地中海贫血症志愿者、健康志愿者多人)
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2024-05-10更新
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129次组卷
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3卷引用:2024届东北三省四市教研联合体高三模拟(二)生物试题
解题方法
2 . CRISPR/Cas9基因编辑技术是将编码Cas9酶和sgRNA的基因作为目的基因,构建基因表达载体后导入受体细胞,可对细胞内某个基因定点切割,引发被切割部位的随机突变(图1)。科研人员在CRISPR/Cas9编辑系统基础上开发了CBE单碱基编辑系统,该系统由三个元件构成,其中“dCas9蛋白+脱氨酶”在sgRNA的引导下,对结合区域第4-8位点的碱基C脱氨反应变成U,最终实现C→T的不可逆编辑,不需要DNA链断裂(如图2)。请回答下列问题:____ 键。CRISPR/Cas9编辑系统能特异性识别某段特定DNA序列的原理是依靠____ 与特定DNA序列进行____ 。
(2)CBE编辑系统将靶位点胞嘧啶脱氨基后,细胞复制____ 次,子代DNA中靶位点碱基对由C-G彻底替换成____ ,实现单碱基编辑。
(3)基因编辑可能造成非目标序列的碱基改变,称为脱靶。下图是我国科研工作者建立了一种脱靶检测技术。在小鼠受精卵分裂到2细胞时期,编辑其中1个细胞,并使用红色荧光蛋白将其标记。当小鼠胚胎发育到14.5天时,将整个小鼠胚胎消化成为单细胞,再利用细胞分选技术,进行全基因组测序,比较两组差异。____ 中采集或通过____ 技术获得。当小鼠胚胎发育到14.5天时,将整个小鼠胚胎先用____ 处理,分散成单细胞再进行分选。
②图中的标记基因的作用是____ 。
③在该实验中,没有编辑的那个细胞发育出的细胞的作用是____ 。经检测,如果两种细胞之间存在基因组碱基序列上的差异,这种差异就是____ 引起的。与用同一品系小鼠不同受精卵进行脱靶检测相比,上述脱靶检测技术更加精准,这是因为____ 。
(2)CBE编辑系统将靶位点胞嘧啶脱氨基后,细胞复制
(3)基因编辑可能造成非目标序列的碱基改变,称为脱靶。下图是我国科研工作者建立了一种脱靶检测技术。在小鼠受精卵分裂到2细胞时期,编辑其中1个细胞,并使用红色荧光蛋白将其标记。当小鼠胚胎发育到14.5天时,将整个小鼠胚胎消化成为单细胞,再利用细胞分选技术,进行全基因组测序,比较两组差异。
②图中的标记基因的作用是
③在该实验中,没有编辑的那个细胞发育出的细胞的作用是
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解题方法
3 . 单细胞生物并没有免疫系统,但是科学家发现细菌中存在消除入侵病毒
的功能系统,并发明了
基因编辑技术。该系统主要包含单链向导
和
蛋白两个部分,能特异性识别并结合特定的
序列,从而引导
蛋白到相应位置并剪切
,最终实现对靶基因序列的编辑。下列叙述错误的是( )
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A.![]() ![]() |
B.![]() |
C.识别序列与![]() ![]() ![]() ![]() ![]() |
D.向导![]() |
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2024-04-14更新
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371次组卷
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4卷引用:重庆市2024届高三下学期第二次联考诊断检测生物试题
解题方法
4 . 回答与生物技术有关的下列两小题:
Ⅰ.甘蓝型油菜引入我国历史较短,其遗传基础狭隘。菘蓝(别名“板蓝根”)是传统中药材,具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜(体细胞中染色体数为38)与菘蓝(体细胞中染色体数为14)进行体细胞杂交,培育抗病毒的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系,过程如图1。__________ 酶处理后获得原生质体,再经__________ 诱导获得融合细胞。融合细胞接种到含有营养物质和__________ 的培养基上,经__________ 过程形成愈伤组织,发育形成完整的再生植株F1。植物体细胞杂交技术依据的生物学原理有:__________ 。(至少答出两个)
(2)将F1与甘蓝型油菜回交,获得BC1,其染色体组成为__________ (只用字母表示)。用BC1与甘蓝型油菜再一次回交,得到的BC2植株群体的染色体数目范围是_______ 。
(3)研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系(A、B、C、D、E、F、G)。为探究甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在抗新冠病毒(SARS-CoV-2)中的作用,研究人员用其提取物处理动物细胞,24h后感染新冠病毒,一段时间后收集病毒细胞培养液,检测病毒的含量,结果如图2。__________ ,可排除无关变量对实验结果的影响。
②结果表明:__________ 。
③尝试说出建立甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在育种方面的意义:__________ 。(答出两个方面)
Ⅱ.母源因子是初级卵母细胞在减数分裂Ⅰ前期的后段开始产生并积累的mRNA和蛋白质,其对于调控动物早期胚胎的发育十分重要。为研究不同母源因子的功能,相应母源突变体的培育显得尤为重要。
(4)母源因子由母源效应基因通过基因__________ 过程产生,其产生并积累的时期由于同源染色体未分离,因此只有纯合突变的雌性个体的后代才是母源突变体。
(5)获得母源突变体的传统方法是反复交配与筛选。以母源效应基因A为例,科学家利用基因编辑技术将斑马鱼的一个A基因敲除后获得杂合子,记作(+/-)。如图1是获得母源突变体的杂交方案,请补全下图__________ 。
①sgRNA编码序列能与相应靶基因序列发生碱基互补配对。为构建含有sgRNA编码序列的重组质粒,需对含有特定sgRNA编码序列的DNA用__________ 处理,然后将其插入到经相同酶处理过的质粒上。斑马鱼的卵母细胞与精子受精前停滞在减数分裂Ⅰ前期,此时还未开始合成母源因子,在此阶段前对卵母细胞进行基因敲除可避免母源因子的积累。
②为了实现卵母细胞中基因的特异性敲除,如图2所示,科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上,形成新的重组质粒后导入卵母细胞。
从理论上分析,一个sgRNA便能实现靶基因的敲除,请分析3个sgRNA串联有何优势,请答出2点__________ 。
(7)I-SecI介导的基因插入率并不能达到100%,请根据上述研究分析如何在斑马鱼早期胚胎中筛选出突变体,并说明理由_____ 。
Ⅰ.甘蓝型油菜引入我国历史较短,其遗传基础狭隘。菘蓝(别名“板蓝根”)是传统中药材,具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜(体细胞中染色体数为38)与菘蓝(体细胞中染色体数为14)进行体细胞杂交,培育抗病毒的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系,过程如图1。
(2)将F1与甘蓝型油菜回交,获得BC1,其染色体组成为
(3)研究人员从BC2筛选出7种只含有1条菘蓝染色体的甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系(A、B、C、D、E、F、G)。为探究甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在抗新冠病毒(SARS-CoV-2)中的作用,研究人员用其提取物处理动物细胞,24h后感染新冠病毒,一段时间后收集病毒细胞培养液,检测病毒的含量,结果如图2。
②结果表明:
③尝试说出建立甘蓝型油菜-菘蓝单体附加系在育种方面的意义:
Ⅱ.母源因子是初级卵母细胞在减数分裂Ⅰ前期的后段开始产生并积累的mRNA和蛋白质,其对于调控动物早期胚胎的发育十分重要。为研究不同母源因子的功能,相应母源突变体的培育显得尤为重要。
(4)母源因子由母源效应基因通过基因
(5)获得母源突变体的传统方法是反复交配与筛选。以母源效应基因A为例,科学家利用基因编辑技术将斑马鱼的一个A基因敲除后获得杂合子,记作(+/-)。如图1是获得母源突变体的杂交方案,请补全下图
①sgRNA编码序列能与相应靶基因序列发生碱基互补配对。为构建含有sgRNA编码序列的重组质粒,需对含有特定sgRNA编码序列的DNA用
②为了实现卵母细胞中基因的特异性敲除,如图2所示,科学家将含有3个不同的但靶向相同基因的sgRNA编码基因的重组质粒组装到具有特殊元件的载体上,形成新的重组质粒后导入卵母细胞。
从理论上分析,一个sgRNA便能实现靶基因的敲除,请分析3个sgRNA串联有何优势,请答出2点
(7)I-SecI介导的基因插入率并不能达到100%,请根据上述研究分析如何在斑马鱼早期胚胎中筛选出突变体,并说明理由
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2024-03-28更新
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374次组卷
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2卷引用:2024届浙江省宁波市高三二模模拟考试生物试题
5 . 为研究组蛋白去乙酰化酶8(HDAC8)基因的生物学功能,研究者以斑马鱼为研究对象,通过CRISPR/Cas9技术构建HDAC8基因缺失的突变模型(如图1所示)。
(1)据图1分析可知:CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现靶向切除HDAC8基因的原理是Cas9蛋白—sgRNA复合体中sgRNA识别并与目标DNA中的靶点序列结合,其中sgRNA与靶点序列结合的碱基序列为____ ;Cas9蛋白作用于目标DNA的____ (填化学键)使双链断裂,实现对HDAC8基因敲除。
(2)sgRNA是由体外转录形成的,其基因的上游具有____ ,该结构的作用是____ 。
(3)通过对野生型斑马鱼和实施HDAC8基因敲除的斑马鱼HDAC8进行检测,结果如图2所示(数字表示HDAC8氨基酸的数量)。研究人员认为HDAC8基因敲除成功,理由是____ ,功能丧失。出现图2结果的原因可能是HDAC8基因转录的mRNA中____ 提前出现。____ 。
(1)据图1分析可知:CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现靶向切除HDAC8基因的原理是Cas9蛋白—sgRNA复合体中sgRNA识别并与目标DNA中的靶点序列结合,其中sgRNA与靶点序列结合的碱基序列为
(2)sgRNA是由体外转录形成的,其基因的上游具有
(3)通过对野生型斑马鱼和实施HDAC8基因敲除的斑马鱼HDAC8进行检测,结果如图2所示(数字表示HDAC8氨基酸的数量)。研究人员认为HDAC8基因敲除成功,理由是
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2024-03-15更新
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362次组卷
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2卷引用:2024届河北省唐山市高三一模生物试题
名校
6 . “脑彩虹”是一项最新的大脑成像技术, 通过荧光蛋白“点亮”大脑内的神经元, 帮助科学家了解大脑。该技术利用 Cre/loxP 系统标记神经元。Cre/loxP 系统是在基因或染色体水平上对生物基因进行遗传改造的一种技术。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/7/22997215-d82a-4eee-b534-6da3198e35ea.png?resizew=418)
(1)图 1 是利用 Cre/ loxP 系统敲除基因的过程。loxP 序列具有方向性,由中间的间隔序列和两侧的反向重复序列组成。其中决定 loxP 方向的序列是________ 。当某一个 DNA片段上待敲除基因的两端存在同向 loxP 序列时, Cre 酶识别并结合到 loxP 序列的反向重复序列区。两个 loxP 序列的间隔序列被 Cre 酶定点切开, 4 个黏性末端序列交错两两连接, 其中待敲除基因两端的序列进行连接, 连接时形成的化学键是________ , 敲除的基因片段会形成________ (填“线状”或“环状”)结构, 保留的 DNA片段中是否还存在 loxP序列?________ (填“是”或“否”)
(2)若经 Cre 酶作用使得 2 个 loxP 位点间的序列发生反转, 其原因可能是___________ 。
(3)现以小鼠为材料,利用“脑彩虹”技术研究其大脑内的神经元。研究者需先用___________ 酶处理三种荧光蛋白基因、两种 loxP 序列, 将它们与脑组织特异表达启动子 M 相连接,构建图 2 所示的基因表达载体,再用显微注射法将该基因表达载体导入小鼠的___________ 中,进而得到仅含一个图 2 所示片段的转基因小鼠, 再经过进一步操作, 获得纯合的转基因小鼠 a。
(4)图 2 所示序列的两个 loxP1 之间或两个 loxP2 之间的基因, 只会被 Cre 酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中 Cre 酶的表达受调控, 研究者将 Cre 酶基因与启动子 N(由信号分子 X 开启) 连接, 经一系列操作, 获得纯合转基因小鼠 b, 将纯合小鼠 a 和 b 杂交,得到 F1。
①无信号分子 X 作用时, F1脑组织和其他组织细胞的颜色分别是________ 、________ 。
②有信号分子 X 作用时, F1出现“脑彩虹”, 请阐述机理:________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/7/22997215-d82a-4eee-b534-6da3198e35ea.png?resizew=418)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/7/d3a89b62-e7df-4494-b913-09cd74dab36f.png?resizew=371)
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/7/9514301f-42a0-4d17-b2ca-4060850f65da.png?resizew=268)
(1)图 1 是利用 Cre/ loxP 系统敲除基因的过程。loxP 序列具有方向性,由中间的间隔序列和两侧的反向重复序列组成。其中决定 loxP 方向的序列是
(2)若经 Cre 酶作用使得 2 个 loxP 位点间的序列发生反转, 其原因可能是
(3)现以小鼠为材料,利用“脑彩虹”技术研究其大脑内的神经元。研究者需先用
(4)图 2 所示序列的两个 loxP1 之间或两个 loxP2 之间的基因, 只会被 Cre 酶识别并切割一次。为使脑组织细胞中 Cre 酶的表达受调控, 研究者将 Cre 酶基因与启动子 N(由信号分子 X 开启) 连接, 经一系列操作, 获得纯合转基因小鼠 b, 将纯合小鼠 a 和 b 杂交,得到 F1。
①无信号分子 X 作用时, F1脑组织和其他组织细胞的颜色分别是
②有信号分子 X 作用时, F1出现“脑彩虹”, 请阐述机理:
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名校
7 . Pikm是水稻的稻瘟病抗性基因,近些年的研究表明,它是由两个紧密连锁且功能独立的基因——Pikml-TS和Pikm2-TS组成(以下简称P1、P2)。GS3基因控制水稻的短粒型。Gnla基因编码一种降解细胞分裂素的酶,在花序分生组织中表达强烈,而在茎尖、根与胚中不表达。基因和染色体的位置关系如图1所示。回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/3ae5c799-bf7b-44a1-8bc6-b4272811d648.png?resizew=326)
(1)P1和P2是______ (填“等位”或“非等位”)基因,在遗传时_______ (填“遵循”或“不遵循”)自由组合定律。
(2)利用PCR技术对多个水稻品种的基因进行检测,检测结果以带型表示,比较具有代表性的性状与带型的关系概括为图2。实验结果表明P1、P2基因与抗稻瘟病的关系为_____________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/70fc3e84-fbb9-425f-9f5e-c66c9faf33d6.png?resizew=338)
(3)有研究发现,GS3基因功能缺失的水稻粒型变长,产量提高,转化GS3基因后恢复短粒型;Gnla基因功能缺失会增加稻穗上的开花数,进而增加每穗粒数,使产量提高。育种工作者利用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除GS3和Gnla基因以提高水稻产量。对于敲除后获得的植株,利用PCR技术对其进行鉴定,鉴定结果概括为图3,图中_________________ 为高产gS3gnla突变体。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/f54e922b-d9f9-4850-a956-ffa4068f9f67.png?resizew=313)
(4)以无上述抗稻瘟病基因的gS3gnla突变体品系和选育出的纯合抗稻瘟病品系为亲本,通过杂交育种可培育抗病高产水稻纯合体,该纯合体最早可以在F2中出现,由于P1、P2连锁紧密,通常不发生互换,理论上推测,具有抗病高产表型的植株在F2中所占的比例为_______ 。在F2中已经出现一定数量的具有该表型的植株的前提下,利用传统杂交育种实验方法获得目的植株的思路是___________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/3ae5c799-bf7b-44a1-8bc6-b4272811d648.png?resizew=326)
(1)P1和P2是
(2)利用PCR技术对多个水稻品种的基因进行检测,检测结果以带型表示,比较具有代表性的性状与带型的关系概括为图2。实验结果表明P1、P2基因与抗稻瘟病的关系为
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/70fc3e84-fbb9-425f-9f5e-c66c9faf33d6.png?resizew=338)
(3)有研究发现,GS3基因功能缺失的水稻粒型变长,产量提高,转化GS3基因后恢复短粒型;Gnla基因功能缺失会增加稻穗上的开花数,进而增加每穗粒数,使产量提高。育种工作者利用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除GS3和Gnla基因以提高水稻产量。对于敲除后获得的植株,利用PCR技术对其进行鉴定,鉴定结果概括为图3,图中
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/3/6/f54e922b-d9f9-4850-a956-ffa4068f9f67.png?resizew=313)
(4)以无上述抗稻瘟病基因的gS3gnla突变体品系和选育出的纯合抗稻瘟病品系为亲本,通过杂交育种可培育抗病高产水稻纯合体,该纯合体最早可以在F2中出现,由于P1、P2连锁紧密,通常不发生互换,理论上推测,具有抗病高产表型的植株在F2中所占的比例为
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8 . 我国科学家首次成功在猪胚胎中培育出了含有人类细胞的肾脏。科学家首先利用基因编辑技术培育出肾脏缺陷的猪胚胎,然后将多个人源诱导多能干细胞(iPS细胞)注射入早期胚胎中构建嵌合胚胎,培养一段时间后,胚胎被植入代孕母猪获得嵌合猪胎,最终培育拥有人细胞且功能正常的肾脏。下列有关叙述正确的是( )
A.iPS,细胞在理论上可发育成任何一种组织器官 |
B.移植处于原肠胚期的胚胎可提高移植成功率 |
C.常通过饲喂含性激素的饲料以促进母猪超数排卵 |
D.在嵌合猪胎的组织细胞内含有人和猪的染色体 |
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名校
解题方法
9 . 研究人员利用最新基因编辑工具CRISPR/Cas9,成功敲除了比格犬的载脂蛋白E(APOE)基因,培育出动脉粥样硬化疾病模型犬“苹果”。利用“苹果”腹部皮肤体细胞作为样本,建立细胞系,取其细胞核注入比格犬去核卵母细胞中,形成早期胚胎后进行胚胎移植,得到了我国首只克隆犬“龙龙”。如图为克隆犬“龙龙”诞生的流程图,回答下列问题:_________ 负责识别并结合特定DNA序列,引导Cas9蛋白对目的基因进行编辑,在实践中发现该系统有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”的现象,实验发现sgRNA的序列长短影响成功率,sgRNA序列越长脱靶率越_____________ (填“高”或“低”)。
(2)取“苹果”的皮肤细胞,并进行体细胞建系。皮肤细胞在培养过程中,首先应保证其处于______________ 的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要一定的气体环境是____________ 。
(3)为了获得较多的卵母细胞,需要对供体实验比格犬注射_______________ ,获得的卵母细胞应在体外培养到_______________ 期。在对卵母细胞去核时,可采用的方法有________________________(至少答出两种)。
(4)克隆本质上是一种无性繁殖,该过程的最后一道工序是胚胎移植,其实质是________________ 。胚胎移植前,需对供、受体犬进行_____________ 处理,为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。重构胚通常需要发育到_____________ 阶段才能进行胚胎移植。
(2)取“苹果”的皮肤细胞,并进行体细胞建系。皮肤细胞在培养过程中,首先应保证其处于
(3)为了获得较多的卵母细胞,需要对供体实验比格犬注射
(4)克隆本质上是一种无性繁殖,该过程的最后一道工序是胚胎移植,其实质是
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2024-02-23更新
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360次组卷
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5卷引用:海南省省直辖县级行政单位琼海市琼海市嘉积中学2023-2024学年高三下学期开学生物试题
解题方法
10 . CRISPR-Cas系统包含CRISPR基因和Cas基因(CRISPR关联基因)两部分,其中CRISPR是细菌等原核生物基因组内的一段重复序列,当病毒入侵后,某些细菌能够把病毒基因的一小段存储到 CRISPR,Cas基因则位于CRISPR基因附近或分散于基因组其他地方,该基因编码的蛋白均可与CRISPR序列区域共同发生作用,CRISPR-Cas系统的组成如下图所示,现在CRISPR-Cas9(由一条单链向导RNA和内切核酸酶Cas9组成)已发展成为对靶向基因进行特定修饰的第三代基因编辑技术。回答下列有关问题:_____________ 的结果,在CRISPR-Cas系统中,前导区作为启动子,是______________ 识别和结合的部位,能驱动__________________ 基因的表达过程。
(2)CRISPR—Cas系统中,间隔区应是_______ ,该系统在细菌中的作用是____________ 。
(3)CRISPR—Cas9基因编辑技术取代早期基因工程的原因是____________________ ,根据其组成成分推测其工作的原理并简要叙述_______________ 。
(2)CRISPR—Cas系统中,间隔区应是
(3)CRISPR—Cas9基因编辑技术取代早期基因工程的原因是
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2024-02-22更新
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151次组卷
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3卷引用:【名校面对面】2022-2023学年高三大联考(5月) 理综生物试题