1 . 研究人员用质粒pBR322和目的基因构建基因表达载体，质粒pBR322和目的基因的结构与相关限制酶的识别位点如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．应选用酶B和酶C切割pBR322和目的基因

B．氨苄青霉素抗性基因的作用是便于重组DNA的筛选

C．图中质粒用限制酶切割后，会产生4个游离的磷酸基团

D．导入重组质粒的受体菌应接种于含四环素的培养基中培养

2 . 下图是转乳糖酶基因试管牛和克隆牛的培育过程，回答下列问题：

(1)细胞1为__________，是动物基因工程中常用的受体细胞，可通过_______法导入目的基因。
(2)胚胎移植前需要将细胞1在发育培养液中培养成胚胎，培养时的气体环境条件为_________。胚胎移植前可对早期胚胎进行胚胎分割和性别鉴定，性别鉴定一般用发育到囊胚期的细胞，对囊胚期胚胎进行分割时，要注意将_________ 均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
(3)克隆牛的培育是通过_______技术实现的，属于_______（填“有性”或“无性”）生殖。从进化角度分析，试管牛相比于克隆牛的优势是________。

3 . 下列关于基因工程基本工具的叙述，正确的是（       ）

A．限制酶能特异性地识别6个核苷酸序列

B．限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键，产生2个游离的磷酸基团

C．有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端，又能连接双链DNA片段的平末端，从而恢复被限制酶切开的氢键

D．用做分子运输车的质粒常有特殊的抗性基因，便于基因表达载体的构建

4 . 基因工程自20世纪70年代起得到迅猛的发展，在农牧业、医药卫生和食品工业等方面得到广泛的应用。下列叙述错误的是（       ）

A．将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物

B．目前利用基因工程技术可以生产细胞因子、抗体和疫苗等

C．利用基因工程技术通过乳腺分泌乳汁生产药物叫作乳腺生物反应器

D．将乙烯合成相关基因导入番茄，获得的延熟番茄储存时间大大延长

5 . “黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　）

A．要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子

B．显微注射将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”

C．“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”会造成环境污染

D．乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点

6 . 如图表示一项重要生物技术的关键步骤，X是获得了外源基因并能够将其表达的细胞。下列有关叙述，错误的是（　　）

   

A．X是含有人胰岛素原基因并能合成人胰岛素原的细菌细胞

B．质粒是细胞核或拟核外能进行自主复制的小型环状DNA

C．目的基因与质粒的结合体现的变异类型是基因突变

D．该技术又叫基因拼接技术，能定向改变生物性状

7 . 下图为DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（       ）

A．DNA 连接酶、限制酶、解旋酶

B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶

C．限制酶、DNA连接酶、解旋酶

D．解旋酶、限制酶、DNA连接酶

8 . 白色污染问题已引起全社会广泛关注，降解塑料的研究和开发是解决白色污染的理想途径之一。地膜的主要成分是聚乙烯[化学式为（C₂H₄）_n]。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示的操作。X培养基是选择培养基，聚乙烯分解菌在该培养基上会形成抑菌圈。回答下列同题：

(1)在筛选聚乙烯分解图过程中，应选择__________的土壤，制作培养基时，应将________作为X培养基中的唯一碳源。
(2)为了证明所配制X培养基具有选择作用，在恒温培养前，需要将接种后的X培养基平板和接种后的完全培养基平板同时进行培养，待两种培养基平板上的菌落生长稳定时，比较两种平板培养基上的菌落数。若结果为_______________，则可证明上述观点。
(3)可挑选X培养基中的__________（填序号）中的单菌落接种到Y培养基上进行培养。配制Y培养基时，其pH一般调至__________。
(4)在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品0.1mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为28、50，52，54，313，则每升原菌液样品中细菌数为_________个。

9 . “中天杨”是由我国科学家采用生物转基因技术，历经8年时间培育成功的抗盐碱、耐干旱的杨树新品种。该品种以八里庄杨为实验材料，经转mtl-D基因培育获得。如图为培育“中天杨”的操作流程，①～⑥表示操作过程，该过程中可能用到的限制酶如表所示。回答下列问题。

   

注：Ti质粒中的 Tet^r为四环素抗性基因，Amp^r为氨苄青霉素抗性基因。

限制酶	Bcl I	EcoR I	Xba I	Sau3A I	BamHI
切割位点	T↓GATCA	G↓AATTC	T↓CTAGA	↓GATC	G↓GATCC

(1)与杂交育种相比，基因工程育种的优点有________(填序号)。
①操作方法简便   ②目的性强，能定向改造生物性状   ③育种周期短   ④不受生殖隔离限制，能克服远缘杂交不亲和障碍   ⑤安全性高，对生态没有威胁
(2)过程①需要的酶是_____________，过程②需要的工具是__________________。
(3)采用PCR技术扩增目的基因时，在PCR反应体系中需加入引物，引物的作用是_________________，至少经过______次循环，可获取与目的基因等长的DNA单链。PCR完成以后，常采用____________法来鉴定PCR的产物。
(4)培育转基因杨树的核心工作是___________，在进行该工作时，应在mtl-D基因的两侧添加限制酶______________的识别序列。
(5)将目的基因导入受体细胞除图示方法外，我国科学家还独创了一种方法是__________。为了确认目的基因在植物细胞中是否成功表达，从分子水平通常使用_____________法进行检测。

10 . 某同学选用新鲜洋葱为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，下列叙述错误的是（       ）

A．研磨切碎的洋葱时加入适量的纤维素酶有利于DNA释放

B．可用预冷的体积分数为75%的酒精粗提取DNA

C．丝状DNA能够溶解于2mol/L的NaCl溶液

D．沸水浴条件下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色