2 . 镉（Cd）作为一种重金属元素，会严重威胁人体健康。科研人员将Cd响应启动子CadR与绿色荧光蛋白基因（EGFP）组合在一起导入大肠杆菌，构建能够检测环境中Cd污染的生物传感器。已知LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。相关信息如图所示，其中P1、P2、P3表示引物。

   

限制酶识别序列及切割位点：
Mun I：5'-C↓AATTG-3'   Xho I：5'-C↓TCGAG-3'   EcoR I：5'-G↓AATTC-3'   Sal I：5'-G↓TCGAC-3'
(1)构建重组质粒的过程中需要用到E．coli DNA连接酶，该酶的作用是______________________。据图分析，应选用___________酶切割质粒，以保证质粒与目的基因高效重组。
(2)已知EGFP基因转录得到的RNA中缺乏起始密码子AUG。利用PCR技术获取EGFP基因时，为保证EGFP基因能正确插入载体且可以正常表达，除选择引物P1外，还需要选择引物___________，并在其5'端增加碱基序列5'-___________-3'。
(3)通过琼脂糖凝胶电泳可将不同的DNA片段区分开来，该技术所依据的原理是______________________。对PCR产物进行电泳检测，结果显示除EGFP基因条带外，还有多条非特异性条带（引物和模板不完全配对导致）。为减少非特异性条带的产生，可适当___________（填“提高”或“降低”）PCR中复性过程的温度。
(4)为筛选出成功导入重组质粒的目标菌，需要将转化后的大肠杆菌接种到含有四环素和X-gal的培养基上，结果发现长出了蓝色和白色两种菌落。若需进一步鉴定该生物传感器是否制备成功，需要进行的操作是______________________。

4 . 科研人员为研究捕食者是否能够通过改变捕食行为响应变化的环境，统计了2017-2020年某地块增温组和未增温组洛桑尖蛛结网网眼的变化，结果如图所示。已知网眼大小与捕食对象有关。下列有关说法正确的是（       ）

A．增温导致洛桑尖蛛的生态位发生改变

B．增温引起的网眼变化是基因定向突变的结果

C．增温会引起食物链的改变，这是对生物和无机环境变化的适应

D．可推测，增温后洛桑尖蛛提升了中小体型猎物的捕食比例

7 . 孟加拉虎的性别决定方式为XY型。野生型虎毛色为黄底黑纹（黄虎），此外还有白底黑纹（白虎）、浅黄底棕纹（金虎）、白底无纹（雪虎）等多种毛色。关于孟加拉虎的毛色的遗传和进化机制，科研人员经过基因测序发现白虎、金虎分别是控制黄底的S1基因、控制黑纹的Cn基因（位于Ⅱ号染色体）突变导致各自功能丧失产生的突变体，请根据以下杂交实验结果，回答问题：

实验一	实验二	实验三
P：白虎×黄虎 ↓ F1：       黄虎 ↓ F2：黄虎：白虎=3：1	P：金虎×黄虎 ↓ F1：       黄虎 ↓ F2：黄虎：金虎=3：1	P：金虎×白虎 ↓ F1：       黄虎 ↓ F2：黄虎：金虎：白虎：雪虎=9：3：3：1

(1)由杂交实验可知，有关孟加拉虎毛色的显性性状是______。
(2)根据上述实验结果推测S1基因______（填“位于”或“不位于”）Ⅱ号染色体上，原因是______。从实验三中的F₂代筛选出金虎和白虎，并让雌雄随机交配，后代的表现型及比例是______。
(3)孟加拉虎还有一种黑虎，其形成的原因是黑纹纹路加粗和部分融合导致体表黑色面积增加。科研人员分别将黑虎与黄虎、白虎、金虎杂交后，得到的F₁均为黄虎，说明______。现有多只黄虎、黑虎的纯合个体，请设计实验验证黑虎的突变基因位于常染色体上。实验思路：______。预期结果：______。

9 . 线粒体置换技术是一种预防人类线粒体遗传病的技术手段。极体中主要内容物为排出的核基因组，所含线粒体数量较少，因此可以将其作为良好的核供体用于线粒体置换，其过程如下图所示。下列说法正确的是（       ）

   

A．图中获取的极体1为第一极体，极体2为第二极体

B．图中“？”处指受精作用，精子需进行获能处理，为受精提供能量

C．该过程也可直接用患者的体细胞作为核供体

D．图中极体2的遗传物质来自于供卵卵母细胞