1 . 木质纤维素是地球上最为丰富的可再生资源，中国科学家利用基因工程的方法构建了一株嗜热厌氧杆菌H，以花生壳、玉米芯等为原料发酵生产生物燃料乙醇，以期提高农业废弃物的整体利用价值。据此回答下列问题：
(1)研究者将取样器放入温泉底部取样，将样本加入到含有_________的锥形瓶中稀释，利用厌氧技术将稀释液接种到以纤维素为_______的培养基中初步获得能降解纤维素的嗜热厌氧杆菌。培养过程所用的玻璃器皿需用______（填方法）灭菌。
(2)基于嗜热厌氧杆菌的特殊代谢能力（图 a），研究人员构建了双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）的过量表达载体，图b为构建表达载体时所需的关键条件。

①为保证双功能醇醛脱氢酶基因（Adh）能通过双酶切以正确方向插入质粒，需设计引物1和引物2，其中引物1的序列为5’______3’。
②将重组表达载体导入嗜热厌氧杆菌，然后置于含有_______的选择培养基中进行筛选，经鉴定及扩大培养得到工程菌。
(3)将构建的工程菌进行摇瓶发酵，结果发现乙醇产量提高，副产物乙酸产量下降。结合其代谢途径，分析出现这种结果的原因_______。
(4)嗜热厌氧杆菌最适生长温度为55-75℃，产物乙醇在温度超过50℃即可快速蒸馏出。相对于传统的发酵菌株，利用嗜热厌氧杆菌发酵产乙醇主要有优势________（写出两点即可）。

7 . 我国十分重视对环境污染的治理，随着生物技术的发展，利用微生物降解污染物成为环境治理的重要方法之一。工业污水中含有的多环芳烃类化合物会造成农田土壤污染。请围绕污染土壤修复的微生物筛选，回答下列问题。
(1)为了获得能降解多环芳烃化合物的菌株，配制的培养基中_____________是唯一碳源；培养基配制好后须立即灭菌，目的是_____________；在目标菌株分离纯化过程中必须使用固体培养基，原因是_____________。
(2)在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是_____________。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用_____________法进一步分离纯化。
(3)为进一步提高菌株降解多环芳烃的效率，可采用物理化学（如紫外线、亚硝酸钠等）等诱变方法进行微生物育种，其原理是_____________；也可采用_____________等技术定向改造菌株。

8 . 柴油是重要的燃料油之一，泄漏或不当排放会造成环境污染。研究者从被柴油污染的土壤中获取了3种柴油降解菌进行研究，结果见下表。下列叙述不正确的是（       ）

柴油浓度（%） 菌株降解率（%）	1	2	4	5
Y1	90．9	60．8	53．5	41．0
Y2	92．8	-	-	-
Y3	70．1	42．5	-	-

注：“-”表示菌株不能生长

A．为获得降解菌，应用以柴油为唯一碳源的培养基

B．所用培养基和土壤样液均需进行严格灭菌

C．可采用稀释涂布平板法获得降解菌的单菌落

D．Y1对高浓度柴油的耐受性更强