1 . 酶是细胞合成的生物催化剂，几乎所有的生命活动都离不开酶。目前，更多的酶已经走出实验室， 走进人们的生产和生活。菠萝汁生产时加入果胶酶不仅能提高产量，还能改善果汁的口感。
(1)果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括果胶分解酶、____（答出两点即可）等酶。分离混合物中的果胶酶时，若用凝胶色谱法，在装填凝胶色谱柱时，不能有气泡存在，因为气泡会____而降低分离效果。
(2)利用微生物生成果胶酶可以大大提高其产量，微生物培养时，需要使用____法对培养基进行灭菌。为确定灭菌是否彻底，通常会随机选用____先行培养一段时间。
(3)固定化酶技术在生产实践中也得到了广泛应用，固定化酶技术是指____。一般来说，酶更适合采用____法固定化。使用固定化酶技术生产菠萝汁的优点是____（答出一点即可）。

2 . 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是水体中常见的威胁人类健康的致病菌。研究者为探究枯草芽孢杆菌对这两种病原体的抑制效果，研究者设计了相关实验。请回答下列问题：
实验一：从不同环境中筛选枯草芽孢杆菌
(1)从不同环境中取样进行扩大培养，培养时采用摇床震荡，可知枯草芽孢杆菌为______（填“厌氧”或“好氧”）微生物。培养过程中抽样检测活菌数时，应采用的计数方法是________________。（填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”），不选用另一种计数法的原因是__________。
实验二：检测不同类型的枯草芽孢杆菌对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用
(2)取适量金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的菌液分别涂布于固体培养基上，该操作过程中防止杂菌污染的措施有______________（答出两点）。
(3)将无菌滤纸片在培养过不同________的滤液中浸泡后覆盖于上述固体培养基上（如图所示），培养后测量抑菌圈（图中黑色区域）的大小以判定抑菌效果。

左为金黄色葡萄球菌：右为大肠杆菌。1—6为枯草芽孢杆菌的序号
如果将筛选出的枯草芽孢杆菌用于水质净化，则最好将图中____（填数字）所示的菌种进行细胞固定化，可采用的固定方法是______。

3 . 四川盛产橘子，利用橘子生产果汁，生产过程中会产生大量的残渣（皮渣），目前这些皮渣主要用作饲料或肥料。为了提高橘子产业的经济收益，研究人员正在采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：
(1)生产果汁时，为解决果肉的出汁率低、耗时长，榨取的果汁浑浊、容易发生沉淀等问题，可以向果肉中加入果胶酶，果胶酶的作用是__________。制成果汁后，果汁中的酶很难回收，为了解决这一问题，可采用固定化酶或者固定化细胞技术，常用的固定方法有包埋法、__________。固定化酶时，通常不宜采用包埋法的原因是__________
(2)橘子皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取效率主要取决于萃取剂的__________。萃取步骤依次为：皮渣→粉碎→干燥→萃取→__________→浓缩→花色苷。
(3)为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取1mL上清液，1×10⁴倍稀释后，用稀释涂布平板法分别将0.1mL菌液接种于三个培养基上。在适宜的条件下培养一段时间后，对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为__________个。
(4)皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至__________性。培养筛选得到的醋酸菌，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为__________。

4 . 大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：
(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_____。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_____培养基。
(2)将大熊猫新鲜粪便样液经过系列梯度稀释，在平板上接入0．1mL稀释液并涂布（每个稀释度至少涂布三个平板），经适当时间培养后，在平板上计数菌落，据此可计算出每毫升培养液中的纤维素分解菌活菌数。这种计数方法得到的结果一般比实际值偏小，原因可能有_____和涂布器上还残留少量细菌等。
(3)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从大熊猫新鲜粪便中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37 ℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_____，理由是_____。

菌株	秸秆总干重（g）	秸秆残重（g）	秸秆失重率（%）	秸秆纤维素降解率（%）
A	2．00	1．51	24．50	16．14
B	2．00	1．53	23．50	14．92
C	2．00	1．42	29．00	23．32

(4)如果纤维素酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择_____法固定化工艺。使用分泌纤维素酶的细菌与使用固定化纤维素酶进行生产，都需要适宜的_____（填入下面选项的序号）。①温度②水③营养④pH

5 . 为了体验固定化酶在生产中的优势，某兴趣小组用注射器制作了固定化酶反应柱，示意图如下。下列相关说法错误的是（　　）
   

A．固定化酶技术能在节约成本的同时提高产品质量

B．在气门芯上部装一个筛板可以防止固定化酶漏出

C．此装置中酶的固定应该使用化学结合法或者物理吸附法

D．为防止杂菌污染，该装置制作完成后应进行高温灭菌

6 . 下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述中正确的是（　　）

A．用海藻酸钠固定酵母细胞的方法属于物理吸附法

B．若底物是大分子，固定化酶和固定化细胞都能催化该反应

C．固定化酶和固定化细胞在应用上的主要区别之一是后者需要一定的营养

D．用化学结合法一定不会对固定化酶的活性产生影响

7 . 下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述，正确的是（       ）

A．活化酵母时，将适量干酵母与自来水混合并搅拌成糊状

B．配制海藻酸钠溶液时，为了充分融化，需要一直用大火加热并不断搅拌

C．将海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合液滴加到CaCl2溶液中时，凝胶珠成形后应即刻取出

D．海藻酸钠溶液浓度过低时凝胶珠呈白色，过高时凝胶珠不能成规则的圆形或椭圆形

8 . 科研人员利用固定化酵母直接发酵甜菜汁生产燃料乙醇，下图表示相关的工艺流程。分析回答：
   
(1)在固定化酵母细胞时要先将酵母细胞活化，活化的作用是__________。步骤①中，溶化海藻酸钠时要注意_______________。
(2)如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明海藻酸钠浓度________(填“过低”或“过高”)。步骤②中加入果胶酶的目的是__________。
(3)酵母细胞相对于酶分子来说比较大，如果用固定化细胞技术将这些细胞固定，可以采用__________法。固定酵母细胞操作一般是在甜菜汁制备________(填“前”或“后”)。在酒精发酵时应控制的温度条件是___________℃。试验后，将洗涤过的固定的凝胶珠在低温环境中保存若干天，仍可以用于发酵，说明固定化细胞可被___________使用。研究表明使用固定化酵母的酒精产量平均值高于游离酵母的对照组，从酵母细胞发酵的环境条件考虑，可能的原因是____。

9 . 桑果营养丰富，是一种药食同源食物。研究人员通过固定化乳酸菌对桑果发酵工艺进行改进。回答下列问题：
(1)将桑果和适当比例的水进行破碎得到果浆，过滤后获得桑果果汁。在保存营养物质的同时杀死果汁中的杂菌，可将果汁进行_______________（填消毒或灭菌方法）。
(2)将乳酸菌培养基装入三角瓶后封口，然后置于灭菌锅中进行灭菌。影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、时间，以及_______________（写出1点即可）。
(3)研究人员发现氯化钙浓度对乳酸菌包埋率有影响，实验结果如下表：

氯化钙浓度／％	10	15	20	25	3.0
包埋率／％	58	72	83	80	78

请根据所学知识分析，上述结果形成的原因是_______________。
(4)若要分离乳酸菌膜蛋白，将除去了细胞壁的乳酸菌原生质体加入蒸馏水使其吸水涨破，再用_______________法分离得到乳酸菌细胞膜，加_______________瓦解细胞膜后，再用固定化_______________技术将磷脂分子分解为甘油、脂肪酸和胆碱，经其他方法除去杂质得到含多种膜蛋白的溶液，将该溶液用_______________法分离，再做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，在电冰中用SDS处理的作用是_______________。

10 . 糙米含有蛋白质等丰富的营养成分。以糙米为原料，用酶解法可生产新型降血糖药物----降血糖活性肽。请回答：
   
(1)在用酶解法生产降血糖活性肽前，需对酶的活性进行测定。酶的活性是指_____________________。
(2)生产降血糖活性肽应选用______________（填“脂肪酶”、“淀粉酶”或“蛋白酶”）。若使用固定化酶技术，一般用_____________法对酶进行固定。
(3)为缩短生产时间，在底物量和酶量相同、条件适宜的情况下，科研小组研究了 酶解时间与底物水解度的关系，结果如上图所示。
①游离酶与固定化酶最优酶解反应时间均为__________分钟；超过该时间后底物水解度趋于平缓，原因是___________________________。
②应采用____________（填“游离酶”或“固定化酶”）来生产降血糖活性肽，不选择另一种的原因是________________________。（至少答出2点）