组卷网 > 知识点选题 > 固定化酶和固定化细胞及其应用
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1 . 融合蛋白是指利用基因工程等技术将某种具有生物学活性的功能蛋白分子与其他蛋白融合而产生的新型蛋白,常用于亲和蛋白质纯化和抗体药物的研发。图是原核细胞融合蛋白基因表达载体,科研工作者在启动子Pc下游插入了两个与分离纯化有关的编码序列——谷胱甘肽转移酶基因(GST基因)及凝血蛋白酶切割位点的编码序列。

回答下列问题:
(1)构建基因表达载体时,需要用到的工具有__________。上述融合表达载体中启动子Ptac的作用是____________________
(2)当外源基因插入后,可表达出由__________(填“二”或“三”)部分序列组成的融合蛋白。
(3)GST对谷胱甘肽有很强的结合能力。将谷胱甘肽固定在琼脂糖树脂上形成亲和层析柱,当表达融合蛋白的全细胞提取物通过层析柱时,__________将吸附在树脂内,其他细胞蛋白先被洗脱出来。接着用含游离的还原型谷胱甘肽的缓冲液将融合蛋白洗脱。最后用__________切割融合蛋白,即可获得纯化的目的蛋白。
(4)Fc融合蛋白由某种具有生物学活性的功能蛋白分子与抗体恒定区的Fc片段融合而成。该类融合蛋白不仅保留了功能蛋白分子的生物学活性,并且还具有一些抗体的性质,如长效半衰期。抗原在血浆中游离时间越久,越容易被蛋白酶降解。
①利用哺乳动物细胞表达Fc融合蛋白比在原核细胞中表达更具优势的理由是____________________
②目前疫苗设计的关键在于有效活化抗原呈递细胞(APC),APC表面能够表达Fc受体,常利用抗原—Fc融合蛋白作为抗原运载工具,其原因是____________________
2 . 富含木聚糖(一种多糖)的工业废料直接排入水体,会导致水体富营养化,严重破坏生态环境。现广泛利用木聚糖酶处理工业废料中的木聚糖,但存在木聚糖酶热稳定性差的局限性。科研人员欲从某热泉沉积物样品中分离、纯化出产木聚糖酶的微生物,以解决该局限性。请回答下列问题:
(1)研究者先制备以_________为碳源的富集培养基,然后采用__________法灭菌,再接入沉积物样品培养一段时间。这次培养的目的是_________
(2)为了获得纯净微生物,除了平板划线法,还可采用_________法,这两种方法操作的共同点是_________(答出一点即可)。
(3)研究发现,将采集的样品接种于多种培养基中培养,仍有很多微生物不能生长繁殖,推测其原因可能是_________(答一点即可)。
(4)初步从热泉中筛选出木聚糖酶活性较高、生长较好的菌株G,其产生的木聚糖酶除具有酶的一般共性外,推测可能还有_________的特性。
(5)温度是影响木聚糖酶广泛用于工业生产的重要因素,在运用于工业生产前,需对该酶的_________进行测定,之后还需将该酶在此温度下保温足够长的时间后测残余酶的活性。残余酶活性越高,说明其热稳定性____________
3 . 加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果(“+”越多表示去渍效果越好),实验结果见下表。

加酶洗衣粉A

加酶洗衣粉B

加酶洗衣粉C

无酶洗衣粉(对照)

血渍

+++

+

+++

+

油渍

+

+++

+++

+

根据实验结果回答下列问题:关于酶的应用,除上面提到的加酶洗衣粉外,固定化酶也在生产实践中得到应用,如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指___________。固定化酶在生产实践中应用的优点是_________(答出1点即可)。
2024-01-05更新 | 218次组卷 | 1卷引用:专题10 生物技术与工程-2024年高考生物二轮热点题型归纳与变式演练(新高考通用)
4 . 目前,纤维素酶的应用主要面临工业发酵菌株生产性能不佳、酶系分泌不全等挑战。研究人员利用重离子诱变技术对产酶菌株——长枝木霉进行辐照诱变,并选育获得突变菌株LC-M4和LC-M16,较野生菌株产酶效率分别提高了46.91%和35.5%。请回答下列相关问题:

(1)纤维素酶是一种复合酶,它包含___________三种组分,请你举出纤维素酶在生活中的具体应用包括:___________(说出2点)。
(2)为了分离出目的菌株,研究人员配制出的培养基中主要碳源应该是__________,分离后可加入___________试剂鉴定。图示结果中的A、B、C分别对应的题干中的菌株是__________
(3)获得高产菌株后,还需要对纤维素酶活性进行测定,请你根据所学知识提出一种思路:__________。工业生产中常利用___________法固定化纤维素分解菌。
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5 . 谷氨酸是味精的主要成分,下图1是谷氨酸生产的机理:谷氨酸棒状杆菌以葡萄糖为底物合成谷氨酸:图2是工业上谷氨酸发酵装置示意图。请回答问题:

(1)与酵母菌相比,谷氨酸棒状杆菌在细胞结构上的主要特点是______。根据图1可知,谷氨酸棒状杆菌细胞中谷氨酸积累过量,会抑制_______的活性,从而导致该合成途径中断,这种现象称为________
(2)实验室可以利用_______技术培育对谷氨酸脱氨酸对高浓度谷氨酸浓度不敏感酶的菌种或者菌体细胞膜通透性________的优育菌种。获得的菌种还要进行_______,才能投入工业生产。
(3)图2所示发酵罐中,1、2为水的进出口,通水的目的是________;3为搅拌器,发酵过程不断搅拌,不仅可使营养物质得到充分利用,还能_______________
(4)谷氨酸工业生产中,_______是发酵工程的中心环节,生产谷氨酸的发酵液pH应为________。发酵结束后需要进行_______,以获得产品。
6 . 乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下图所示。回答下列问题:

(1)用于培养产乳糖酶的微生物L的培养基在接种前需要通过_____________法进行灭菌。研究人员通常根据菌落的___________特征来初步区分不同种的微生物,统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次,直到____________时。
(2)为了得到产乳糖酶微生物L的单菌落,可用____________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。对于需要长期保存的菌种,可以采用_____________的方法。
(3)采用凝胶色谱法分离纯化其中的乳糖酶时﹐比乳糖酶相对分子质量大的蛋白质先被洗脱分离出来,原因是_____________
(4)工业生产中往往将乳糖酶固定在_____________(填“溶于水”或“不溶于水”)的载体上﹐将其装入反应柱内后,需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱﹐以除去未吸附的乳糖酶。一般来说,酶不适合采用包埋法固定化,原因是_____________
22-23高三下·江西赣州·开学考试
7 . 橘子是一种深受人们喜爱的水果,可以压榨果汁,也可以提取橘皮精油。回答下列问题:
(1)将橘子榨汁后,橘汁比较混浊,透光率较低,导致果汁澄清度不高。生产上常用________酶处理果汁以提高品质。但这样会增加生产成本,为了使酶制剂重复使用,可采用________(答出一种)法将酶固定化。与固定化酶相比,固定化细胞催化反应时具有的优点是________
(2)某地橘子含糖量很高,学习小组的同学认为可直接用其发酵获得橘醋,这样考虑的依据是_________。实验后发现,此种方法容易导致发酵产品腐败变质,原因是________
(3)实验室常采用________法提取橘皮精油,用该方法提取橘皮精油时,需要用石灰水浸泡橘皮,这样做的目的是________,不用水蒸气蒸馏法提取橘皮精油的原因是________
2017·江苏连云港·三模
8 . 下列关于固定化酵母细胞制备过程的叙述中,错误的是(       
A.将干酵母与蒸馏水混合并搅拌,有利于酵母菌的活化
B.配制海藻酸钠溶液时要进行小火或间断加热
C.将溶化并冷却的海藻酸钠溶液直接转移至注射器中
D.将制备好的凝胶珠放入氯化钙溶液中浸泡半小时左右
9 . 天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图:

(1)糖化阶段是在____________和温度较高的条件下进行的,这一过程可由酒曲中的黑曲霉来完成,下列适于黑曲霉扩大培养的培养基是____________(A.LB培养基B.尿素固体培养基C.MS培养基D.添加蔗糖的豆芽汁培养基)。
(2)酒精发酵时,进行定期搅拌,其原因主要是____________。发酵完毕后过滤除去渣,并用手挤压滤渣的目的是____________
(3)醋酸发酵时,发酵设备的控制系统需感应____________(填两个)等理化性质的变化,以监测发酵进程。与固定化酶相比,固定化醋杆菌需_____________等条件(填两个)。
(4)发酵后的残渣需要灭菌后才能放置于垃圾桶,这属于垃圾的____________处理。
2022-07-07更新 | 231次组卷 | 2卷引用:专题32 传统发酵技术和发酵工程的应用(练)-2023年高考生物一轮复习讲练测(新教材新高考)
10 . (一)纤维素分解菌用于燃料酒精生产的大致流程为:

(1)过程①通常将纤维素分解菌固定化处理,有同学提出可采用锯末作为固定化介质,该方法不恰当的原因是_____________。为了得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产_____________实验,用于过程②的酵母菌应具有耐酸和耐______________(写出2点)的优点才能提高酒精出产率。
(二)蛋白质是生命活动不可缺少的物质。随着人类基因组计划的进展以及多种生物基因组测序工作的完成,人类跨入了后基因组和蛋白质组时代。血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中氧气和二氧化碳的运输。
(2)分离血红蛋白的方法是凝胶色谱法,其原理是根据_________________来分离蛋白质。
(3)本实验用的是交联葡聚糖凝胶(Sephadex   G-75),其中“G”表示______________________,“75”表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸收水分7.5g。在装填凝胶时色谱柱内不能出现气泡的原因是________________,给色谱柱添加样品的方法是_________________
共计 平均难度:一般