1 . MLM型结构脂是一类新型油脂产品，该产品具有产能快、易吸收等特点。某研究团队通过构建基因工程菌的方法，将MLM型结构脂合成所需的关键基因（酰基转移酶基因CnGPAT9）导入大肠杆菌，从而构建MLM型结构脂合成途径。

   

(1)在基因工程中常以大肠杆菌为受体细胞，原因是_______（答出2点即可）。图中PO片段的作用是_______。
(2)设计引物时往往需要添加限制酶识别序列，已知CnGPAT9左端①处的碱基序列为-CCTTTCAGCTCA-，欲通过PCR扩增获得CnGPAT9，则其中一种引物设计的序列是5'-_____-3'。
(3)已知LacZ基因编码的β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。据此推断，筛选具有MLM型结构脂合成途径工程菌的基本过程是，将大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，再将大肠杆菌接种到添加了_______的培养基上培养，筛选出_______色的菌落即可。
(4)通过研究酰基转移酶的结构发现，将第154位脯氨酸替换为苏氨酸后，可增强酰基转移酶的活性，进一步提高大肠杆菌生产MLM型结构脂的能力。根据这一研究结果，请写出利用蛋白质工程培育生产MLM型结构脂能力更强的大肠杆菌的基本思路_________。

2 . 科研人员把兔子的角蛋白基因转入棉花细胞，使棉花纤维具有了兔毛的品质，从而培育出“兔毛棉花”。图1是利用巢式PCR技术获取角蛋白基因的过程，该技术使用两对PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物（也称外引物）扩增片段的过程和常规PCR相似第二对引物称为巢式引物，结合在第一次PCR产物内部，也称内引物，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。图2是转基因“兔毛棉花”的培育流程。请回答：

(1)巢式PCR反应体系中除模板DNA、引物外，还需要加入______（答出2点）。巢式PCR获得目标产物时，从内引物的________端开始连接脱氧核苷酸。
(2)用限制酶切割角蛋白基因和质粒时，选择HindⅢ和SalI比只选择SalI的优点有_______。构建的重组质粒中除含该基因外，还应包括________（至少答出3点）。
(3)利用农杆菌转化法将角蛋白基因导入棉花体细胞并稳定遗传的理论依据是_______。
(4)为鉴定是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用的检测方法是________。

3 . CD47是一种跨膜糖蛋白，可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6~5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。研究表明，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用。科学家设计了如下实验流程。请回答：

(1)制备小鼠的脾脏组织细胞悬液的步骤是______。
(2)图示融合步骤与植物体细胞杂交技术都利用了______原理，共同使用的融合方法有__________。
(3)第二次筛选过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬液稀释到7~10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是_______。对阳性反应孔中的细胞还需多次稀释培养并用_________检测，即可得到需要的杂交瘤细胞。

(4)使用抗CD47的单克隆抗体可以有效缓解癌症病情，原因是______。

5 . 究人员采用“异源囊胚补全法”将人源iPS细胞培育出的肾元祖细胞导入囊胚，然后移植到去除肾元祖细胞的仔猪体内，培育出100%人源iPS细胞来源的肾单位并用于移植治疗（如图所示）。下列说法错误的是（　　）

A．图中人源iPs细胞能培育成为肾单位是由于基因的选择性表达

B．过程②需要将荧光蛋白标记的人源肾元祖细胞植入囊胚的滋养层

C．过程③操作之前需对代孕母猪进行超数排卵和同期发情处理

D．该技术培育的人源肾脏移植时可有效避免免疫排斥反应

6 . 人血清白蛋白（HSA）作为血浆容量扩充剂，广泛应用于出血性休克、烧伤等的治疗。如图表示利用基因工程生产人血清白蛋白的两条途径。下列说法正确的是（　　）

   

A．若HSA基因是从人细胞内提取mRNA经逆转录形成的，则该基因不含启动子

B．利用PCR技术专一性扩增HSA基因时，应选用图中A、D两种引物

C．途径a需选用性染色体组成为XX的受精卵作为受体细胞

D．途径b构建重组质粒时，需给HSA基因添加人血清白蛋白基因的启动子

7 . 近来，市场上一种叫做“手指植物”的工艺品受到很多人的欢迎。“手指植物”通常是指将经过植物组织培养形成的植物体，移栽到装有彩色培养基的小玻璃瓶中进一步培育，无需额外补充营养物质和水分即可生长三四个月。相关叙述中正确的是（　　）

A．为保证“手指植物”正常生长，玻璃瓶盖密封性越高越好

B．将“手指植物”根部培养基冲洗后可直接移栽到土壤中继续培养

C．配制“手指植物”培养基母液时使用富含矿物质的山泉水更好

D．培育“手指植物”的原理是植物细胞具有全能性

8 . 山西老陈醋的制作工艺可上溯至西周时期，经过多年的传承和发展，形成了一套与现代科学相匹配，以手工技艺为经验的“蒸、酵、熏、淋、陈”的独特工艺，被认定为国家非物质文化遗产。下列说法错误的是（　　）

A．工艺流程中的“酵”主要包括酒精发酵和醋酸发酵

B．糖源充足和缺乏时，获得的主要发酵产品不同

C．老陈醋的发酵过程需要一直在30~35℃条件下进行

D．接种醋酸菌和通入氧气可以缩短老陈醋的发酵过程

9 . 为筛选高效降解淀粉的微生物，提高“生化”处理的效率，研究人员将厨余垃圾机械处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备厨余垃圾浸出液，然后进行微生物的培养，如图所示。下列叙述正确的是（　　）

A．X培养基属于选择培养基，图示接种方法是稀释涂布平板法

B．①处菌落的周围没有透明圈，可能是一种异养型的杂菌

C．获得高效降解淀粉的微生物，应挑取⑤处的菌落进行纯培养

D．将分解淀粉的微生物扩大培养时，需要用液体培养基并振荡培养

10 . 大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA.用两种限制酶处理提取的产物经PCR扩增，然后进行琼脂糖凝胶电泳，结果如图。下列说法错误的是（　　）

A．提取质粒DNA时可加入预冷的酒精，使不溶于酒精的DNA等物质析出

B．利用PCR既可快速扩增特定基因，也可用于特定基因的检测

C．电泳鉴定DNA利用了其在电场作用下会向着它所带电荷相反的电极移动的原理

D．用限制酶I和Ⅱ分别处理提取的产物，电泳结果说明未提取到质粒