名校
1 . 脱氧核苷三磷酸(dNTP)和双脱氧核苷三磷酸(ddNTP，ddN-Pα~Pβ~Pγ)的结构均与核苷三磷酸(NTP)类似，其中dNTP核糖的第2位碳原子上的羟基(—OH)被氢原子取代而ddNTP核糖第2位和第3位碳原子上的羟基均被氢原子取代。DNA复制时，ddNTP可以与dNTP竞争核苷酸链延长位点，并终止DNA片段的延伸。现有一些序列为5’—GCCTAAGATCGTA—3’的DNA分子单链片段，拟通过PCR获得被32P标记且以碱基“A”为末端(3’为碱基A)、不同长度的子链DNA。在反应管中加入单链模板、引物、底物、TaqDNA聚合酶、Mg2+及缓冲溶液。下列叙述正确的是（ ）
| A．实验结束后最多可得到3种被32P标记的子链DNA |
| B．反应底物是dCTP、dGTP、dTTP和γ位32P标记的ddATP |
| C．ddNTP与dNTP竞争的延长位点是脱氧核苷酸链的5’末端 |
| D．TaqDNA聚合酶在PCR中的作用是形成氢键和磷酸二酯键 |
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3693次组卷
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17卷引用：山东省日照市2021-2022学年高三上学期期末校际联合考试生物试题
山东省日照市2021-2022学年高三上学期期末校际联合考试生物试题（已下线）二轮拔高卷07-【赢在高考·黄金20卷】备战2022年高考生物模拟卷（山东专用）福建省厦门市集美中学2021-2022学年高二4月月考生物试题（已下线）生物-2022年高考押题预测卷01（浙江专用）（含考试版、全解全析、参考答案、答题卡）江西省赣州厚德外国语学校、丰城中学2022-2023学年高三10月联考生物试题江西省赣州市厚德外国语学校、丰城中学2023届高三第一次联考生物试题2022年全国中学生生物学联赛四川省(初赛)试题热考主题16——原子及分子的“标记”问题2023届湖北省天门市高三信息卷生物试题2023届重庆市万州二中高三第三次诊断测试生物试题山东省威海市文登一中2022-2023学年高二6月阶段检测生物试题（已下线）专题06 遗传物质的本质与生物的变异-2023年高考生物真题题源解密山西省晋城市一中2022-2023学年高二4月月考生物试题河北省2022-2023学年高三10月期中生物试题选择性必修三 3.2 基因工程的基本操作程序? 课后作业（巩固）黑龙江省哈尔滨市双城区兆麟中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题黑龙江省哈尔滨市双城区兆麟中学2023-2024学年高二下学期6月月考生物试题
名校
2 . 摩尔根等人用纯合体灰身长翅果蝇和黑身残翅果蝇交配，子一代（F1）都是灰身长翅。已知灰身和黑身是由等位基因B和控制，长翅和残翅是由等位基因V和v控制，下列叙述正确的是（ ）
| A．若两对等位基因位于两对常染色体上，F1雌雄果蝇相互交配，随机取16只果蝇，则其中有9只是灰身长翅 |
| B．由于F1雌雄果蝇的表现型相同，故两对等位基因均位于常染色体上 |
| C．若两对等位基因位于常染色体，则F1的测交后代有四种表现型且比例为1：1：1：1 |
| D．若F1测交后代中灰身长翅：灰身残翅：黑身长翅：黑身残翅=4：1：1：4，则可能BV在一条染色体上，bv在另一条同源染色体上 |
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2022-02-20更新
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1738次组卷
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6卷引用：广东省广州市五校（省实，广雅，执信，二中，六中）2021-2022学年高一下学期期末联考生物试题
3 . 科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了该基因的真核表达载体，进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如下，SLA-2基因长度为1100bp，质粒B的总长度为4445bp，其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。请回答：
(1)过程①中，PCR扩增SLA-2的原理是__________ ，下列4种引物中应选择的是____________ 。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是__________ ，该过程需要用__________ 处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。然后将大肠杆菌涂布在含有___________ （抗生素）的培养基上培养。
(3)若用Sau3AI和XbaI完全酶切质粒C后电泳，请在答题纸相应位置画出可能得到的电泳条带。
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是：既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让__________ 。实验结果如图，根据实验结果最佳的嘌呤霉素筛选浓度为__________ 。
(5)过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，其原理是__________ ，单克隆抗体能检测其是否具有正确的__________ ，从而是否具有生物活性。
| 限制酶 | BclI | NotI | XbaI | Sau3AI |
| 识别序列及切割位点 | T↓GATCA | GC↓GGCCGC | T↓CTAGA | ↓GATC |
(1)过程①中，PCR扩增SLA-2的原理是
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是
(3)若用Sau3AI和XbaI完全酶切质粒C后电泳，请在答题纸相应位置画出可能得到的电泳条带。
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是：既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让
(5)过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，其原理是
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2022-02-11更新
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2071次组卷
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6卷引用：江苏省海安市2021-2022学年高三上学期学业质量监测生物试题
江苏省海安市2021-2022学年高三上学期学业质量监测生物试题（已下线）二轮拔高卷08-【赢在高考·黄金20卷】备战2022年高考生物模拟卷（江苏专用）湖南省衡阳县四中2022-2023学年高三下学期开学摸底考试生物试题2023届山东省青岛市高三第一次模拟考试生物试题（已下线）专题12 基因工程-学易金卷：2023年高考生物一模试题分项汇编（山东专用）山东省潍坊市诸城市繁华中学2023-2024学年高三12月月考生物试题
4 . 为研究水稻D基因的功能，研究者将T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后的基因记为d。现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验，统计母本植株的结实率，结果如下表所示。
(1)表中数据表明，D基因失活使___________ 配子育性降低。为确定配子育性降低是由于D基因失活造成的，可将___________ 作为目的基因。与载体连接后。导入到___________ （野生/突变）植株的幼芽经脱分化形成的愈伤组织中。观察转基因水稻配子育性是否得到恢复。
(2)进一步研究表明，配子育性降低是因D基因失活直接导致配子本身受精能力下降，若让杂交①的F1给杂交②的F1授粉。预期结实率为___________ ，所获得的F2植株的基因型及比例为___________ 。
(3)为验证F2植株基因型。研究者根据D基因，T-DNA的序列，设计了3种引物，如图所示
随机选取F2植株若干，提取各植株的总DNA。分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR，检测是否扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR）。若___________ ，则相应植株的基因型为Dd；同理可判断其他基因型。
| 杂交编号 | 亲本组合 | 结实数授粉的小花数 | 结实率 |
| ① | ♀DD×♂dd | 16/158 | 10% |
| ② | ♀dd×♂DD | 77/154 | 50% |
| ③ | ♀DD×♂DD | 71/141 | 50% |
(2)进一步研究表明，配子育性降低是因D基因失活直接导致配子本身受精能力下降，若让杂交①的F1给杂交②的F1授粉。预期结实率为
(3)为验证F2植株基因型。研究者根据D基因，T-DNA的序列，设计了3种引物，如图所示
随机选取F2植株若干，提取各植株的总DNA。分别用引物“Ⅰ+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR，检测是否扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR）。若
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5 . 某昆虫的紫眼（A）对红眼（a）为显性、红眼（B）对白眼（b）为显性，已知A与a基因位于常染色体上，B与b基因位于X染色体上，某基因型纯合会导致受精卵不能发育而致死（缺乏相应的等位基因也认为是纯合）。现有1只白眼雌性昆虫和1只红眼雄性昆虫杂交，所得F1的表型及所占比例如下表所示。
回答下列问题：
(1)上述昆虫的眼色遗传___________ （填“遵循”或“不遵循”）自由组合定律；F1雌性昆虫的基因型为___________ ；F1雄性昆虫中只有白眼的原因是___________ ；自然状态下（不考虑变异），欲验证某只雄性昆虫是否为纯合子，___________ （填“可以”或“不可以”）将其与双隐性纯合雌性昆虫进行测交实验。
(2)若让F1中全部的雌雄昆虫随机交配，所得F2昆虫中，紫眼：红眼：白眼=___________ ；F2昆虫中杂合紫眼雄性昆虫所占比例为___________ 。
(3)用遗传图解表示F1中的红眼昆虫与白眼昆虫杂交产生子代雌性昆虫的过程。___________
| 紫眼 | 红眼 | 白眼 | |
| 雌昆虫 | 1/3 | 1/3 | 0 |
| 雄昆虫 | 0 | 0 | 1/3 |
(1)上述昆虫的眼色遗传
(2)若让F1中全部的雌雄昆虫随机交配，所得F2昆虫中，紫眼：红眼：白眼=
(3)用遗传图解表示F1中的红眼昆虫与白眼昆虫杂交产生子代雌性昆虫的过程。
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6 . 果蝇成体中的神经干细胞（NSC）可在机体需要时增殖，也可分化为神经细胞、神经胶质细胞等以达到稳定细胞数量或修复机体的目的。研究证明果蝇胚胎早期发育时NSC中，trbl基因的表达会使NSC进入暂不增殖的状态，且有相当部分（约75%）的细胞停滞在了G2期。图1显示了果蝇胚胎发育早期NSC细胞进入或解除停滞状态的分子机理，其中Trbl、Akt、dILPs都是蛋白质分子。
(1)据题信息推断，神经干细胞属于______
(2)根据图1中的信息以及学习过的知识，处于增殖期I的细胞和停滞期的细胞，在_______ 方面（填下面的编号）可能存在差异。
①DNA含量 ②RNA种类 ③蛋白质种类 ④细胞形态 ⑤细胞核相对大小
(3)Trbl可促进并维持NSC细胞进入停滞期，dILPs则可以解除细胞的停滞状态，结合图1的信息，判断以下表述正确的是_____
(4)一般认为，细胞处于暂不增殖状态时，所处的时期应为G0期。最近研究发现了一种全新的细胞周期停滞方式。通过对比分析处于不同暂不增殖状态下的细胞重新进入细胞周期的比例差异，得到了如图2的结果。有人提出“处于G2期NSC细胞是更好的修复神经损伤的材料”。你是否同意这种观点？请根据图2中的信息，结合所学的知识阐述理由。____________________________________ 。
(5)NSC细胞累积一定的数量并在合适的时候进行分化是保持内环境稳态以及修复神经系统损伤的关键。科研人员希望在Trbl、Akt、dILPs中选择一种作为“分子开关”以控制细胞的增殖和分化状态。你认为哪一种蛋白质分子更适合，请结合题干信息和所学知识说明理由。__________________ 。
(1)据题信息推断，神经干细胞属于______
| A．胚胎干细胞 | B．单能干细胞 | C．多能干细胞 | D．全能干细胞 |
①DNA含量 ②RNA种类 ③蛋白质种类 ④细胞形态 ⑤细胞核相对大小
(3)Trbl可促进并维持NSC细胞进入停滞期，dILPs则可以解除细胞的停滞状态，结合图1的信息，判断以下表述正确的是_____
| A．trbl基因在增殖期I开始转录 |
| B．Trbl蛋白质分子的氨基酸序列由trbl基因的碱基序列决定 |
| C．Akt可以促进NSC脱离停滞期、能促进细胞分裂 |
| D．dILPs可能是一种激素分子，通过与细胞内的Akt结合可抑制Trbl发挥作用 |
(5)NSC细胞累积一定的数量并在合适的时候进行分化是保持内环境稳态以及修复神经系统损伤的关键。科研人员希望在Trbl、Akt、dILPs中选择一种作为“分子开关”以控制细胞的增殖和分化状态。你认为哪一种蛋白质分子更适合，请结合题干信息和所学知识说明理由。
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2022-02-02更新
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923次组卷
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2卷引用：2022届上海市徐汇区高三一模生物试题
7 . 重组工程是一项新型的基因操作技术，其基本原理是通过重组酶将特定的单链 DNA片段与双链 DNA分子在同源序列处重组，从而实现基因的敲除、替换和突变等修饰。下图1表示DNA单链重组过程示意图，请回答问题：
(1)基因工程的核心是在体外构建_____ ，该过程中使用的酶是_____ 。
(2)图2是大肠杆菌 pBR322-Red质粒的示意图。科研人员欲利用重组工程技术敲除该质粒上从 kil基因至 N基因之间的 DNA序列，设计的单链多核苷酸引物应为_____ 的连接序列（在①、②、③、④中选填）。
(3)将单链多核苷酸与含有 pBR322-Red质粒的大肠杆菌感受态细胞混合、电击转化，在重组酶的作用下，理论上 1％ ～6％的大肠杆菌会发生体内同源重组。已知线性化质粒无法转化大肠杆菌。为了从大肠杆菌混合物中筛选出发生重组的克隆，科研人员进行了下列操作。请完成表格相关内容。
(4)图 3为用琼脂糖凝胶电泳鉴定的结果，其中泳道_____ （填“1”或“2”）对应的是kil-N基因缺失的质粒。
(5)常规的基因工程和重组工程都能将外源基因插入质粒。一般情况下，限制酶在质粒上存在多个作用位点，因此常规的基因工程技术构建重组质粒时会出现_____ 现象，而重组工程技术可以提高精准度。
(1)基因工程的核心是在体外构建
(2)图2是大肠杆菌 pBR322-Red质粒的示意图。科研人员欲利用重组工程技术敲除该质粒上从 kil基因至 N基因之间的 DNA序列，设计的单链多核苷酸引物应为
(3)将单链多核苷酸与含有 pBR322-Red质粒的大肠杆菌感受态细胞混合、电击转化，在重组酶的作用下，理论上 1％ ～6％的大肠杆菌会发生体内同源重组。已知线性化质粒无法转化大肠杆菌。为了从大肠杆菌混合物中筛选出发生重组的克隆，科研人员进行了下列操作。请完成表格相关内容。
目的 | 简要操作 |
扩大培养 | ①将大肠杆菌混合物全部转入含 |
质粒提取、酶切 | ②提取质粒，选择限制酶 |
转化 | ③用酶切产物转化 |
鉴定、筛选 | ④菌落 PCR技术、琼脂糖凝胶电泳 |
(4)图 3为用琼脂糖凝胶电泳鉴定的结果，其中泳道
(5)常规的基因工程和重组工程都能将外源基因插入质粒。一般情况下，限制酶在质粒上存在多个作用位点，因此常规的基因工程技术构建重组质粒时会出现
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8 . 糖尿病是一种严重危害健康的常见病，其中1型糖尿病需定期注射胰岛素进行治疗。研究者研制了一种“智能”胰岛素（IA）（见图1），IA中的X能与葡萄糖竞争结合GT（葡萄糖进入细胞的载体蛋白），从而抑制GT的功能且避免IA被灭活。研究表明1型糖尿病患者注射IA在降血糖过程中效果更持久。回答下列问题：
(1)1型糖尿病患者体内，血糖浓度升高时，由于_____________ 细胞功能减退，导致分泌的胰岛素不足，进而影响细胞对血糖的_____________ ，使血糖高于正常值。
(2)为测试葡萄糖对IA与GT结合的影响，研究者将足量的带荧光标记的IA加入红细胞膜悬液中处理30分钟，使IA与胰岛素受体、GT充分结合。之后，分别加入葡萄糖至不同的终浓度，10分钟后检测膜上的荧光强度，实验结果如图2所示。荧光强度随葡萄糖浓度增加而逐渐下降的原因是_____________ 。
(3)胰岛素一经靶细胞接受并起作用后就失活，因此，体内需要源源不断地产生胰岛素，以维持其含量的动态平衡。用常规胰岛素治疗1型糖尿病需每天注射一次，而使用IA只需每周注射一次。请构建IA降血糖作用效果更持久的机制图___________ 。（在方框中以文字和箭头的形式作答。）
(1)1型糖尿病患者体内，血糖浓度升高时，由于
(2)为测试葡萄糖对IA与GT结合的影响，研究者将足量的带荧光标记的IA加入红细胞膜悬液中处理30分钟，使IA与胰岛素受体、GT充分结合。之后，分别加入葡萄糖至不同的终浓度，10分钟后检测膜上的荧光强度，实验结果如图2所示。荧光强度随葡萄糖浓度增加而逐渐下降的原因是
(3)胰岛素一经靶细胞接受并起作用后就失活，因此，体内需要源源不断地产生胰岛素，以维持其含量的动态平衡。用常规胰岛素治疗1型糖尿病需每天注射一次，而使用IA只需每周注射一次。请构建IA降血糖作用效果更持久的机制图
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9 . 科研人员在直刚毛果蝇品系中发现一只焦刚手雌果蝇突变体，将直刚毛果蝇与该突变体杂交，后代雌果蝇全为直刚毛，而雄果蝇全为焦刚毛。科研人员将一DNA片段导入到子一代直刚毛雌蝇的体细胞中.通过克隆技术获得一只转基因焦刚毛果蝇。进一步研究发现插入的 DNA片段本身不控制具体性状，果蝇体内存在该 DNA片段可导致直刚毛基因不表达而表现为焦刚毛，并且受精卵中若不存在 B、b基因将导致胚胎致死。（注∶控制刚毛性状的基因可以用B、b表示）
(1)控制果蝇刚毛性状的基因位于____ 染色体上，且_____ 为显性性状。
(2)该 DNA 片段插入到果蝇染色体上的位置有4种可能，如图1所示。让该转基因果蝇与直刚毛雄果蝇进行杂交，若后代中焦刚毛♀∶焦刚毛♂∶直刚毛♀∶直刚毛♂=1∶1∶1∶1，则DNA插入的位置是____ （填序号）；若后代中直刚毛♀∶焦刚毛♂=2 ∶1，则DNA插入的位置是____ （填序号）。
(3)将转基因焦刚毛果蝇中B基因与直刚毛果蝇中B基因及二者的cDNA（相应mRNA 逆转录形成的 DNA）进行扩增后电泳，结果如下图所示∶
根据图2可知，转基因焦刚毛果蝇中导入的DNA片段插入的位置为图1中的___ （填序号）。真核生物基因转录的 RNA需要通过剪接加工后才能形成具有功能的 mRNA，试分析说明两种果蝇cDNA扩增结果不同的原因是______ 。
(1)控制果蝇刚毛性状的基因位于
(2)该 DNA 片段插入到果蝇染色体上的位置有4种可能，如图1所示。让该转基因果蝇与直刚毛雄果蝇进行杂交，若后代中焦刚毛♀∶焦刚毛♂∶直刚毛♀∶直刚毛♂=1∶1∶1∶1，则DNA插入的位置是
(3)将转基因焦刚毛果蝇中B基因与直刚毛果蝇中B基因及二者的cDNA（相应mRNA 逆转录形成的 DNA）进行扩增后电泳，结果如下图所示∶
根据图2可知，转基因焦刚毛果蝇中导入的DNA片段插入的位置为图1中的
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10 . 亚洲棉的光籽（无短绒）和毛籽（有短绒）是一对相对性状，为探究棉绒的遗传规律并揭示其发育的分子机制，研究者进行了系列实验。
(1)利用表型为光籽的不同突变体与野生型毛籽棉进行杂交，统计F1自交结果如下表：
据表可知，突变体甲光籽性状的遗传遵循__________ 定律；②组F2光籽棉中的纯合子所占比例为__________ ；推测③组F1测交后代表型及比例为__________ 。综合三组杂交实验结果，表明__________ 之间并非简单的一一对应关系。
(2)研究发现，8号染色体的～880kb至～903kb区间与突变体甲的光籽表型相关。根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物，提取突变体甲和野生型的__________ 进行PCR，产物扩增结果如下图。
据图可知分子量较大的扩增产物与点样处的距离较__________ （选择“大”或“小”填写），推测8号染色体上第__________ 对引物对应的区间（简称M）__________ 是突变体甲光籽出现的根本原因。
(3)研究者对杂交组合①的F2进行扩增，证实甲的光籽表型与区间M密切相关。得出此结论的扩增结果应该是__________ 。
(4)研究者从野生型和突变体甲中克隆出区间M后，运用基因工程技术分别导入棉花原生质体，检测基因表达水平，结果如下图。
内参基因REN是为了排除转化效率不同对实验结果的干扰，因此图中LUC/REN用来衡量__________ 的表达水平。实验结果说明突变体甲的区间M促进下游基因的表达，且其作用的发挥与区间M的_____ 有关。
(5)基因GaFZ的表达会影响棉花短绒的发育，检测发现突变体甲GaFZ蛋白结构与野生型一致。综合上述研究推测突变体甲光籽表型出现的原因是__________ 。
(1)利用表型为光籽的不同突变体与野生型毛籽棉进行杂交，统计F1自交结果如下表：
| 组别 | 亲本 | F2表型及比例 |
| ① | 突变体甲×毛籽棉 | 光籽∶毛籽＝3∶1 |
| ② | 突变体乙×毛籽棉 | 光籽∶毛籽＝13∶3 |
| ③ | 突变体丙×毛籽棉 | 光籽∶毛籽＝9∶7 |
(2)研究发现，8号染色体的～880kb至～903kb区间与突变体甲的光籽表型相关。根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物，提取突变体甲和野生型的
据图可知分子量较大的扩增产物与点样处的距离较
(3)研究者对杂交组合①的F2进行扩增，证实甲的光籽表型与区间M密切相关。得出此结论的扩增结果应该是
(4)研究者从野生型和突变体甲中克隆出区间M后，运用基因工程技术分别导入棉花原生质体，检测基因表达水平，结果如下图。
内参基因REN是为了排除转化效率不同对实验结果的干扰，因此图中LUC/REN用来衡量
(5)基因GaFZ的表达会影响棉花短绒的发育，检测发现突变体甲GaFZ蛋白结构与野生型一致。综合上述研究推测突变体甲光籽表型出现的原因是
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2241次组卷
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4卷引用：北京市朝阳区2021-2022学年高三上学期期末质量检测生物试题
