2 . 某小组为构建含有双标记基因的通用型动物转基因载体（质粒b），将1种标记基因（Neo基因）插入到质粒a中。但Neo基因两端无相应的限制酶识别序列，因此需要先设计一对引物，让Neo基因的两端分别增加相应的序列，然后通过PCR扩增得到DNA序列1，再经过酶切和连接后得到质粒b。构建动物转基因载体的过程如下图所示。（其中扩增DNA序列1的引物为：P1 5＇-TATGTCGAC……3＇；P2 5＇-TATATCGAT……3＇。限制酶及其识别序列为Hind Ⅲ： A^↓AGCTT、Sal Ⅰ：G^↓TCGAC、ClaⅠ： AT^↓CGAT NheⅠ ： G^↓CTGGC）回答下列问题：   

(1)根据引物分析，应使用______________（填限制酶名称）对DNA序列1和质粒a进行切割，经_______酶连接后得到质粒 b。
(2)含有Neo基因的细胞对G418 （一种抗生素）具有抗性，可用含G418的培养基筛选转基因细胞。为检测质粒b是否成功插入了Neo基因，首先将质粒b转染羊成纤维细胞，然后对细胞进行抗性检测。
①培养成纤维细胞的过程中，需要用_______________处理贴壁细胞，使之分散成单个细胞，离心收集后再进行传代培养。
②将转染质粒b的成纤维细胞分为两组（T₁、T₂），CTR组为未转染质粒b的成纤维细胞，进行细胞培养，结果如下表，T₂组的细胞生长情况为________________时说明质粒b成功插入了Neo基因，理由是___________________________________________________________。

组别	T1	T2	CTR
培养基	不含G418	含G418	含G418
细胞生长情况	未死亡	？	全部死亡

4 . 随着生活水平提高，糖尿病发病率逐年增长，研究显示，我国糖尿病发病率跃居全球第一，可能与我国饮食文化中主食多以碳水化合物为主有关。下表是市场上几种糖尿病药物及作用机理，回答下列问题：

药物	作用机理
格列本脲	刺激相关胰岛细胞分泌胰岛素
二甲双胍	抑制肝糖原分解，同时增强相关细胞胰岛素受体的敏感性
曲格列酮	通过增加细胞内葡萄糖转运体的生成，提高细胞 摄取葡萄糖的效率，但会增加心脑血管疾病的发生概率
阿卡波糖	通过延缓小肠对碳水化合物的吸收来降 低餐后血糖峰值并且降低血糖波动

(1)人体血糖的主要来源有_____________、肝糖原分解和脂肪等非糖物质的转化这三条途径。
(2)根据表中信息可知，格列本脲作用的受体细胞是___________，二甲双胍和曲格列酮不适合用于治疗_______________（填“1”或“2”）型糖尿病。
(3)某研究小组推测阿卡波糖的降糖效果强于二甲双胍，并设计了以下实验来验证此推测，请完善实验方案，并预期实验结果。
材料：生理状况相同的健康雄性小鼠若干，生理盐水，升血糖药物X，药物二甲双胍，药物阿卡波糖。药物均用生理盐水配制。
①实验方案：
Ⅰ.将生理状况相同的健康雄性小鼠随机均分为A、B、C三组，每天每只小鼠注射__________，使它们成为高血糖模型小鼠，在相同且适宜的条件下饲养一段时间，定期测量血糖，并计算各组小鼠血糖平均值。
Ⅱ.A组每天每只小鼠注射__________； B组每天每只小鼠注射等量的二甲双胍药物；C组作为对照组，每天每只小鼠注射______________。在相同且适宜的条件下饲养一段时间，定期测量血糖，并计算各组小鼠血糖平均值。
Ⅲ.比较各组小鼠血糖变化的平均值。
②预期实验结果：_______________。