名校
1 . 马铃薯是重要的块茎类粮食作物。二倍体马铃薯普遍存在自交不亲和的现象，导致无法使用种子种植马铃薯。二倍体马铃薯的自交不亲和是由核糖核酸酶基因（S-RNase）控制的，我国科研人员通过基因编辑技术敲除了马铃薯的S-RNase基因，获得自交亲和的二倍体马铃薯，为马铃薯杂交育种提供了全新的技术体系。下图是科研人员用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除S-RNase基因的示意图，回答下列问题：
(1)用于编辑不同基因的CRISPR/Cas9复合物中向导RNA碱基序列不同，因此首先要确定S-RNase基因中的待编辑序列，可以通过PCR技术扩增S-RNase基因，作为编码特定向导RNA的模板。扩增时需要根据__________ 设计引物，引物的作用是__________ 。
(2)CRISPR/Cas9系统能精准识别相关基因，依据的原理是向导RNA与目标DNA发生__________ ；Cas9蛋白可催化__________ （填化学键名称）水解，剪切特定DNA片段。
(3)欲检测经上述基因编辑技术得到的植株是否已具有自交亲和性状，最简便的方法是__________ 。
(4)实验发现，CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，向导RNA的序列长短影响成功率，序列越短，脱靶率越高。脱靶最可能的原因是__________ 。
(1)用于编辑不同基因的CRISPR/Cas9复合物中向导RNA碱基序列不同，因此首先要确定S-RNase基因中的待编辑序列，可以通过PCR技术扩增S-RNase基因，作为编码特定向导RNA的模板。扩增时需要根据
(2)CRISPR/Cas9系统能精准识别相关基因，依据的原理是向导RNA与目标DNA发生
(3)欲检测经上述基因编辑技术得到的植株是否已具有自交亲和性状，最简便的方法是
(4)实验发现，CRISRP/Cas9基因编辑技术有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”，向导RNA的序列长短影响成功率，序列越短，脱靶率越高。脱靶最可能的原因是
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2022-03-11更新
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758次组卷
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3卷引用：山东省淄博市四中2021-2022学年高二下学期期中生物试题
2 . 研究发现，帕金森等人类神经退行性疾病与R环结构有关。R环（
转录形成的mRNA分子难与模板链分离，而形成的RNA—DNA杂交体，由一条mRNA与DNA杂合链及一条DNA单链所组成。
(1)mRNA与模板链通过___________ 连接。
(2)mRNA形成需要___________ 酶催化，依据___________ 原则mRNA能准确获取其模板链所携带的遗传信息。
(3)据题意推测R环区域模板DNA单链中___________ 碱基比例比较高（填A、T或G、C），因此我们可以依据密码子的简并性，通过基因定点编辑技术（在精确的位点剪断靶标DNA片段并插入新的基因片段），降低R环形成的概率，基因定点编辑过程中有_______ 键的断裂和重新形成。
(4)R环中，嘌呤碱基总数与啶碱基总数一定相等吗？________ （填“一定”或“不一定”），请说明理由：___________________ 。
转录形成的mRNA分子难与模板链分离，而形成的RNA—DNA杂交体，由一条mRNA与DNA杂合链及一条DNA单链所组成。(1)mRNA与模板链通过
(2)mRNA形成需要
(3)据题意推测R环区域模板DNA单链中
(4)R环中，嘌呤碱基总数与啶碱基总数一定相等吗？
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名校
3 . 近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（见下图）。下列相关叙述错误 的是（ ）
| A．Cas9蛋白由相应基因指导在核糖体中合成，作用是破坏磷酸二酯键 |
| B．向导RNA与基因形成的双链区也要遵循碱基配对原则 |
| C．向导RNA可以在逆转录酶的催化下合成，合成的原料包括四种核糖核苷酸 |
| D．若α链剪切点附近序列为……TCCACAATC……，则相应的识别序列为……UCCACAAUC…… |
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4 . 2018年我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，将人亨廷顿舞蹈病致病基因（HTT基因） “敲入”猪基因组内，获得了人－猪“镶嵌”HTT基因，该技术主要由Cas9蛋白和引导RNA复合物完成（如图1所示），再利用生物工程技术成功地构建了亨廷顿舞蹈病的动物模型（如图2所示）。
(1)图1中引导RNA能准确识别猪DNA特定序列，并引导Cas9蛋白切割，由此推测Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的___________ 酶，但Cas9蛋白的特性与该酶的区别是___________________ 。
(2)引导RNA在识别猪DNA特定序列时，存在的碱基配对识别有_______ （填编号）
① A-T ② U-A ③ G-C ④ T-T ⑤ A-A ⑥ U-U
(3)通过CRISPR/Cas9技术基因编辑，将含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞的细胞核导入去核的卵母细胞后发育出模型4号猪，整个过程用到了哪些工程技术___（多选）
(4)图2中1-4号猪中可能成为亨廷顿舞蹈病动物模型的是______ 号。如果经基因编辑后，人－猪“镶嵌”HTT基因只在猪成纤维细胞的一条染色体DNA上，那么想获得纯合能稳定遗传“人－猪“镶嵌”HTT基因”的亨廷顿舞蹈病动物模型猪，你的思路是______ 。
(1)图1中引导RNA能准确识别猪DNA特定序列，并引导Cas9蛋白切割，由此推测Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的
(2)引导RNA在识别猪DNA特定序列时，存在的碱基配对识别有
① A-T ② U-A ③ G-C ④ T-T ⑤ A-A ⑥ U-U
(3)通过CRISPR/Cas9技术基因编辑，将含有“敲入”序列的猪胚胎成纤维细胞的细胞核导入去核的卵母细胞后发育出模型4号猪，整个过程用到了哪些工程技术___（多选）
| A．转基因技术 | B．动物细胞培养技术 |
| C．动物细胞融合技术 | D．细胞核移植技术 |
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名校
5 . 帝王蝶的幼虫吃一种叫作“乳草”的有毒植物，乳草产生的毒素“强心甾”能够结合并破坏动物细胞钠钾泵，帝王蝶的幼虫能将“强心甾"储存在体内以防御捕食者。研究人员发现帝王蝶的钠钾泵的119和122位氨基酸与其他昆虫不同，如果利用基因编辑技术修改果蝇钠钾泵基因，发现122位氨基酸改变使果蝇获得抗“强心甾”能力的同时导致果蝇“瘫痪”，119位氨基酸改变时表现型不变，但能消除因122位氨基酸改变导致的“瘫痪”作用。下列叙述正确的是（ ）
| A．帝王蝶在进化过程中119、122位氨基酸的改变一定是同时发生的 |
| B．帝王蝶钠钾泵突变基因是由于强心甾与钠钾泵结合后诱发突变形成的 |
| C．通过基因编辑技术研究果蝇钠钾泵基因功能时设置了两个实验组 |
| D．强心甾与钠钾泵结合的普通动物细胞，兴奋传导发生异常 |
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2021-12-22更新
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947次组卷
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2卷引用：河北省石家庄市藁城区一中2021-2022学年高二12月月考生物试题
6 . DDX5基因在细胞周期调控、肿瘤发生等方面发挥重要作用。研究人员运用CRISPR-Cas9基因编辑技术对口蹄疫病毒易感的PK-15细胞株中的DDX5基因进行敲除，为后续研究DDX5基因在病毒感染中的作用提供基础。请据图回答下列问题。
(1)图1中，Ori是_______ （酶）首先结合的核苷酸序列。构建CRISPR-Cas9表达载体时使用的工具酶主要有______ 。 结合对图2中CRISPR-Cas9技术原理的理解，图1表达载体中需要插入两种sgRNA基因，原因是_____ 。
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a，再将菌液利用________ 法接种到加有________ 的细菌培养基上，待菌落长成后，直接挑取菌落加入到PCR反应系统中进行基因鉴定。PCR过程中不需要先提取细菌DNA的原因是______ 。
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比，利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有________ 、____________ 。
(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释，再接种到6孔培莽板上，一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测，结果如图（其中B-actin是真核细胞骨架蛋白）。对细胞悬液有限稀释法的目的是________ ， 细胞培养时CO2培养箱中充入的气体应是_______ 。 根据检测结果，敲除DDX5基因的细
胞株编号有___________ 。
(1)图1中，Ori是
(2)研究中先将CRISPR-Cas9表达载体导入大肠杆菌DH5a，再将菌液利用
(3)研究中采用培养转化的大肠杆菌对CRISPR-Cas9表达载体进行扩增。与PCR相比，利用大肠杆菌进行目的基因扩增的优点有
(4)取转化的PK15细胞悬液进行有限稀释，再接种到6孔培莽板上，一段时间后对各孔内的细胞株进行DDX5蛋白检测，结果如图（其中B-actin是真核细胞骨架蛋白）。对细胞悬液有限稀释法的目的是
胞株编号有
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2021-12-21更新
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654次组卷
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2卷引用：江苏省十一校2021-2022学年高二下学期阶段联测生物试题
7 . CRISPR/Cas系统是细菌在进化过程中形成的防御机制。当病毒入侵细菌时，细菌基因组中的CRISPR位点能转录与入侵病毒基因组序列相匹配的小分子RNA，然后CRISPR-RNA就能通过互补序列结合病毒基因组，并表达CRISPR相关核酸酶（Cas酶），进而切割病毒DNA以阻止病毒完成其功能。下列相关叙述错误的是（ ）
| A．CRISPR位点的转录和翻译场所相同 |
| B．CRISPR/Cas的发现有助于对基因进行定点编辑 |
| C．CRISPR/Cas系统可抵御各种病毒的入侵 |
| D．Cas酶可能作用于磷酸二酯键 |
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8 . 美国纽约大学朗格尼健康中心日前实施了一台特殊的肾移植手术，医生成功将一头转基因猪（通过基因编辑技术敲除α-Gal基因）的肾脏移植到人体，且随后3天里均未发生排异现象，病人体内的一些指标也降至正常水平。CRISPR/Cas9系统是目前最常用的一种基因编辑工具，该系统由向导RNA（SgRNA）和Cas9蛋白组成，由SgRNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割完成基因编辑过程，其原理如图所示。下列相关叙述中，错误的是（ ）
| A．通常选择受精卵作为受体细胞，是因为受精卵体积大容易操作 |
| B．将Cas9-SgRNA复合体注入受体细胞的常用方法是显微注射法 |
| C．推测Cas9蛋白与限制性核酸内切酶具有相似的功能 |
| D．转基因猪的培育过程还需要用到胚胎移植等现代生物技术 |
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2021-12-17更新
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366次组卷
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3卷引用：山东省威海市文登新一中2021-2022学年高二5月月考生物试题
9 . “科技奥运”是2008年北京奥运会的三大理念之一，而兴奋剂的检测是其中一个重要课题。EPO（促红细胞生成素）是一种传统的兴奋剂，这种兴奋剂可增加血液中红细胞含量，从而提高运动成绩，许多运动员因冒险服用而遭禁赛。若借助于基因治疗手段，将这种兴奋剂的基因注入人体，在身体里形成一个局部的EPO制造基地，那么传统的尿样和血样检测都无法查出。下列有关基因兴奋剂的说法，不正确的是（ ）
| A．运动员注入的能改善运动员各种运动能力和耐力的基因称为基因兴奋剂 |
| B．EPO（促红细胞生成素）可增加血液中红细胞含量，提高运输氧气的能力 |
| C．通过DNA检测，可以查出运动员体内是否加入了基因兴奋剂 |
| D．基因兴奋剂引起的变异属于可遗传变异，产生的物质对人体无副作用 |
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名校
10 . 图甲为应用基因编辑去除CFTR基因（控制CFTR蛋白的合成），获得患囊性纤维病的编辑小鼠4的培育流程。请回答下列问题：
(1)对1号小鼠进行超数排卵处理，收集并选取处在__________ ．时期的卵母细胞用于核移植。
(2)采集2号小鼠的组织细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是__________ 。
(3)尝试用基因疗法给刚出生的编辑小鼠4号治疗囊性纤维病。其中，将CFTR基因插入质粒中，构建了基因表达载体，其部分结构和酶切位点的示意图如乙，图中E1~E，四种限制酶产生的黏性末端各不相同。据图推断，在将CFTR基因插入质粒时，应使用_________ 限制酶，目的是__________ 。
(4)为获得更多基因编辑小鼠，可在胚胎移植前对胚胎进行_________ ，所需要的主要仪器设备包括__________ 。
(5)请设计一个实验，从分子水平检测CFTR基因是否被导入编辑小鼠4号并正常表达。
①实验思路：__________ ；
②预期结果：__________ 。
(1)对1号小鼠进行超数排卵处理，收集并选取处在
(2)采集2号小鼠的组织细胞，放置于37℃的CO2培养箱中培养，其中CO2的作用是
(3)尝试用基因疗法给刚出生的编辑小鼠4号治疗囊性纤维病。其中，将CFTR基因插入质粒中，构建了基因表达载体，其部分结构和酶切位点的示意图如乙，图中E1~E，四种限制酶产生的黏性末端各不相同。据图推断，在将CFTR基因插入质粒时，应使用
(4)为获得更多基因编辑小鼠，可在胚胎移植前对胚胎进行
(5)请设计一个实验，从分子水平检测CFTR基因是否被导入编辑小鼠4号并正常表达。
①实验思路：
②预期结果：
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2021-12-02更新
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836次组卷
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5卷引用：山东省菏泽市一中2021-2022学年高二4月月考生物试题
山东省菏泽市一中2021-2022学年高二4月月考生物试题湖北省黄冈市罗田县一中2021-2022学年高二6月月考生物试题（实验班）2022届河南省开封市高三第一次模拟考试理综生物试题河南省焦作市县级中学2021-2022学年高三上学期期末考试理综生物试题（已下线）一轮巩固卷2-【赢在高考·黄金20卷】备战2022年高考生物模拟卷（河北专用）
