1 . 果蝇（）的灰身和黑身、长翅和残翅、红眼和白眼三对相对性状分别受三对等位基因B和b、D和d、E和e控制（不考虑性染色体同源区段）。某科研小组利用果蝇种群进行了如下两组实验：

(1)果蝇的性别决定方式是________，果蝇性别取决于X染色体数与常染色体组数（A）的比值（性指数），当时为雌性；当时为雄性；时，表现为中间性。若某只二倍体果蝇性染色体组成为XXY，则发育为________。
(2)根据实验一推断，果蝇的体色和翅形的显性性状分别是________和________。纯种灰身长翅果蝇体细胞中两对基因的位置关系是位于________染色体上，中表现型比例出现的原因是雌果蝇在产生配子时发生了________，其产生的配子中重组型配子比例占________。
(3)根据实验二推断，E、e基因位于________染色体上，亲本果蝇的基因型分别为________，让雌雄果蝇进一步自由交配得到，雌果蝇中白眼所占比例为________。
(4)已知果蝇翻翅基因（R）、正常翅基因（r）、星状眼基因（T）、正常眼基因（t）均位于2号染色体上，其中R基因与T基因均存在纯合致死效应，科研小组要通过一代杂交得到翻翅、星状眼新品系（该品系相互交配所得子代不发生性状分离），请将选出的亲本基因型标注在染色体相应位置上____。（绘制在答题卡图中）。

2 . 鲫鱼是一种淡水湖泊中的常见经济鱼类，其早期胚胎发育经历受精卵→卵裂期→囊胚期→原肠胚期→神经胚期。下列相关叙述正确的是（       ）

A．卵裂期卵黄不断减少，胚胎从外界吸收的营养不断增加

B．原肠胚期开始胚层分化，其中外胚层来自囊胚的滋养层细胞

C．体外受精得到的鲫鱼受精卵在胚胎移植时不需添加免疫抑制剂

D．鲫鱼与人具有相似的胚胎发育阶段，为共同由来学说提供了证据

3 . 下列关于植物激素的叙述，正确的是（       ）

A．外施高浓度的生长素可抑制侧芽的生长和促进顶芽生长

B．特定内分泌器官分泌的油菜素内酯可促进叶细胞的扩展

C．抑制赤霉素的合成、分泌可提高植物体中二核细胞的比率

D．脱落酸可促进叶片的衰老脱落、气孔的开放和种子休眠

4 . 图1为罗伯逊易位携带者（表型正常）与正常人的14号和21号染色体组成。在形成配子时，易位染色体T（14，21）与14号和21号正常染色体联会形成三价体，配对的两条染色体分离，另一条染色体随机移向细胞的一极。14单体、21单体和14三体均胚胎期致死，造成流产。图2所示遗传系谱图，甲病为单基因遗传病（致病基因不在14号和21号染色体上），在自然人群中的发病率为1/900；I₁~I₄号个体中仅I₃为罗伯逊易位携带者。不考虑其他变异。请回答下列问题：

(1)甲病的遗传方式为____。
(2)I₃有____条染色体，精原细胞进行减数分裂时可形成____个四分体；只考虑14和21号染色体，可形成____种精子。
(3)Ⅱ₇染色体组成正常且不携带甲病致病基因的可能性为____。
(4)Ⅲ₉携带甲病致病基因的可能性为____；若Ⅱ₇再次怀孕，为达到优生的目的，建议进行____。
(5)参照图1，请在答题卡相应位置画出Ⅱ₈的染色体组成____；Ⅱ₈的染色体组成与下图所示的标准型21三体患者的不同之处在于____。

5 . 结核病是由结核杆菌引起的人畜共患病。结核杆菌通常以气溶胶形式传播，气溶胶颗粒被肺泡吞噬细胞吞噬，吞噬细胞破裂导致结核杆菌在机体内进一步传播。羊痒病是由正常细胞的非致病性肠蛋白异构化为痒病朊蛋白所致。为研制既能抗结核病又能抗羊痒病的双抗羊，科学家进行了如下操作。
(1)小鼠SP110基因是目前发现的具有抗结核杆菌感染功能的基因。研究人员为了验证SP110基因的功能，同时也为了验证山羊吞噬细胞特异性启动子MSR可以启动SP110基因在吞噬细胞内的表达，将MRS启动子与小鼠SP110基因形成融合基因，设计了下表所示的三组实验。

组别	主要操作	培养细胞后，使之破裂
对照组1	空质粒导入山羊肺泡吞噬细胞，接种适量结核杆菌	细胞培养72小时后，加入③___________，使吞噬细胞破裂，释放结核杆菌
对照组2	含有能广泛表达SP110基因的山羊肺泡吞噬细胞，①___________
实验组	②___________，接种等量的结核杆菌

取三组实验等量的细胞裂解液，用稀释涂布平板法培养，结果如下图1所示。由图可知小鼠SP110基因可用于双抗羊的研制，依据的实验现象是___________。

(2)非致病性胱蛋白是由山羊13号染色体上的PRNP基因的第三外显子控制合成的，PRNP基因的结构如图2．研究人员用新型基因敲除技术对体外培养的山羊成纤维细胞PRNP基因的外显子3序列实施定点敲除。请根据上述信息，设计一个检测敲除是否成功的思路：提取山羊成纤维细胞的DNA，根据___________设计引物进行PCR，并用___________作用于PCR产物后进行凝胶电泳，若仅获得一条电泳条带，说明定点敲除成功。

(3)用TALEN敲除载体与供体DNA表达载体（图4）共同转化体外培养的幼羊成纤维细胞，可将融合基因定点敲入PRNP基因的外显子3部位，原理如图3．请指出图4中数字1和2的分别代表的结构：1、___________、2、___________。经检测，山羊成纤维细胞中非致病性脱蛋白基因和SP110基因的表达情况是___________（填“两者均增加”或“两者均减少或不表达”或“前者减少、后者增加”或“前者增加、后者减少”）。

(4)欲用上述细胞获得双抗羊，需要用到的技术有___________（至少写出两项）。

6 . 为获得转R—GFP融合基因纯合小鼠，科研人员将红色荧光蛋白基因（RFP）插入含Gata3基因的载体中，然后导入小鼠受精卵，获得能正常表达两种蛋白质的杂合子雌、雄小鼠各一只。利用荧光蛋白活体成像系统进行检测，发现两者均为阳性RFP转基因小鼠。相关限制酶识别序列及限制酶识别位点如图甲所示，A、B、C、F、R为不同引物。

(1)在PCR反应溶液中常添加___，其作用是___。在利用PCR扩增RFP编码区序列的过程中，需要设计引物F和R，在两个引物的（填“3'”或“5'”）___端需分别插入___的限制酶识别序列，以使RFP基因能正确插入载体中。用于扩增RFP编码区序列的引物需满足的条件是___。
(2)在RFP基因的扩增及重组载体的构建过程中，需要的工具酶有___。
(3)将实验获得的两只雌、雄杂合子小鼠（P）进行杂交获得F₁若干，选取1～5五只小鼠，从中提取含Gata3基因的相关DNA片段，设计了引物A和C用于PCR扩增，扩增产物电泳结果如图乙所示，则___小鼠是Gata3—RFP基因纯合子小鼠；若用引物A和B进行PCR扩增，___（填“能”或“不能”）区分RFP转基因阳性小鼠中的杂合子和纯合子，原因是___。
(4)为制备大量单链DNA片段，研究人员常采用不对称PCR技术。其基本原理是采用不等量的一对引物，经若干次循环后，低浓度的引物（限制性引物）被消耗尽，以后的循环只产生高浓度引物（非限制性引物）的延伸产物，结果获得大量单链DNA（ss—DNA）。若反应体系中原有100个模板DNA，最初10个循环后限制性引物耗尽，再进行20个循环，理论上可制备ss—DNA___个（用科学计数法表示），在这30个循环中ss—DNA的产生量主要受___的影响。

7 . 人类y基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A 蛋白结合位点，该位点结合BCL11A 蛋白后，y基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对y基因表达的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A 蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。

   

(1)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F₁～F₇末端添加的序列所对应的限制酶是____，在R末端添加的序列所对应的限制酶是____。PCR缓冲体系中除图示条件外还要加入____（至少2个）。获得扩增产物后，应选择限制酶____切割载体。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要____种酶。
(2)将构建的载体导入____（选填“保留”、“除去”）BCL11A 基因的受体细胞，成功转化后，含F₁～F₆与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F₇与R扩增产物的受体细胞无荧光。据图分析，构建成功的基因表达载体上荧光蛋白基因和BCLIIA基因转录时的模板链在____（选填“相同”、“不同”）的DNA链上，含F₇与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是____。
(3)向培养液中添加适量的____，含F₁～F₄与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F₅～F₆与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A 蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A 蛋白结合位点位于引物____在调控序列上所对应序列之间的区段上，理由是____。

8 . 人类7号和9号染色体之间可以发生易位（如图1，易位的染色体用7^＋、9^＋表示），若易位后细胞内基因结构和种类不变，则相应个体属于染色体易位携带者，表型正常。若细胞中有三份R片段，则表现为痴呆；有一份R片段，则导致早期胚胎流产。图2表示某家族因易位而导致的流产、痴呆病的遗传系谱图，已知Ⅱ-1为染色体正常个体，Ⅲ-4为新生儿。下列相关说法正确的有（       ）

   

图2中个体Ⅱ-2为易位携带者，可产生4种配子

A．可通过光学显微镜检测Ⅱ-3的染色体组成是否异常

B．Ⅲ-2为痴呆患者可能是由含有2个R片段的精子与正常卵细胞受精导致

C．Ⅲ-3染色体组成正常的概率为1／2，Ⅲ-4为易位携带者的概率为1／4

9 . 籼稻（染色体组成表示为MM）和粳稻（染色体组成表示为NN）的杂交种具有抗逆性强、产量高的优势，但杂交种的部分花粉败育。经检测，F₁所有花粉中均存在某种杀死花粉的毒素蛋白，但只有育性正常的花粉中存在一种对应的解毒蛋白。进一步研究发现，编码这两种蛋白的基因均为位于籼稻12号染色体上的R区，该区的基因不发生交换，如下图（注：粳稻12号染色体上无B、C、D的等位基因。）。科研人员将纯合籼稻和纯合粳稻杂交，获得F₁，F₁自交获得F₂，F₂中仅有籼一粳杂交种和籼稻，且二者比例接近1：1。请回答下列问题：

(1)用显微观察F₁产生的花粉中有一半出现异常（败育），则F₁植株产生的染色体组成为____的花粉败育。若用F₁作父本，籼稻作母本进行杂交，子代的染色体组成为____。
(2)F₁杂种植株单独敲除D基因，其花粉均不育，C、D基因双敲除植株花粉均可育。推测编码毒素蛋白的基因是____（填“C”、“D”）。
(3)为验证以上推测，科研人员将D基因转入F₁植株，获得转入了单拷贝D基因（一个D基因）的转基因植株（T₀），检测发现T₀中转入的D基因并未在12号染色体上。若T₀自交，仅检测12号染色体的R区，统计子代中分别与粳稻、粳—籼杂交种和籼稻R区相同的个体比例依次为____、____、____，则支持上述推测。
(4)研究者发现在部分籼稻的一条12号染色体上有一段“DUYAO-JIEYAO系统”，其中DUYAO基因在二倍体阶段编码毒素，而JIEYAO基因仅在配子阶段编码解毒剂。DUYAO-JIEYAO两个基因位置足够近，在遗传时会留在同一条染色体上。这种籼稻产生的花粉不育的比例是____。

10 . 为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。回答下列问题：

(1)将草甘膦抗性基因作为目的基因，与Ti质粒构建基因表达载体。目的基因表达载体进入细胞后，Ti质粒上的___区段可转移到油菜细胞的基因组中。为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是___。
①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点
②草甘膦抗性基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点
③酶切后，草甘膦抗性基因形成的两个黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同
A．①③   B．①④   C．②③   D．②④
(2)农杆菌经处理后，将其与基因表达载体混合，完成___后，在添加___的培养基中，经筛选1得到含目的基因表达载体的农杆菌。
(3)取某品种水稻的幼胚，先进行消毒处理，然后接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生___形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。
(4)利用PCR技术，可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5′—ATGGCT…………AGGAAC—3′
3′—TACCGA…………TCCTTG—5′
根据上述序列应选择引物___（填序号）进行PCR。
①引物：5′—TACCGA—3′   ②引物：5′—GTTCCT—3′
③引物：5′—AUGGCU—3′   ④引物：5′—ATGGCT—3′
(5)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。

①第___轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，第5轮循环后，产物中两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段有___个，若进行30轮循环，需引物A___个。
②在PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为___。
(6)除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用___方法来鉴定草甘膦抗性基因的表达产物，从而进行图中的筛选2，两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的___过程，获得转基因水稻。