1 . 下列有关实验的叙述，正确的是（　　）

A．纸层析法进行色素分离时，适当增加滤纸条的长度和层析时间可以使实验结果更加明显

B．黑藻是一种单细胞藻类，可用其叶片制成临时装片观察叶绿体

C．探究某种酶的最适pH时，进行预实验可减小实验误差

D．将一定量的胡萝卜切碎，加适量的水、石英砂、碳酸钙充分研磨，过滤，可以获取胡萝卜素提取液

2 . 黄河入海口石油降解菌的筛选是修复石油污染，保护黄河的重要工作，如图表示筛选石油降解菌的过程。下列叙述正确的是（　　）

   

A．图示接种方法为稀释涂布平板法，据结果推测1g土壤中石油分解菌数最多为1.6×106个

B．进行步骤⑤时，应用液体培养基培养④中的石油降解菌，并检测菌的数量和石油降解能力

C．稀释涂布时，利用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液，进行涂布

D．分离、纯化石油分解菌时，还可采用平板划线法且该方法也需要进行③步骤操作

3 . 牵牛花的红花（A）对白花（a）为显性，阔叶（B）对窄叶（b）为显性。纯合红花窄叶和纯合白花阔叶杂交的后代再与“某植株”杂交，其后代中红花阔叶、红花窄叶、白花阔叶、白花窄叶的比依次是3：1：3：1，遗传遵循基因的自由组合定律。“某植株”的基因型是（       ）

A．aaBB

B．aaBb

C．AaBb

D．Aabb

4 . 研究人员利用最新基因编辑工具CRISPR/Cas9，成功敲除了比格犬的载脂蛋白E（APOE）基因，培育出动脉粥样硬化疾病模型犬“苹果”。利用“苹果”腹部皮肤体细胞作为样本，建立细胞系，取其细胞核注入比格犬去核卵母细胞中，形成早期胚胎后进行胚胎移植，得到了我国首只克隆犬“龙龙”。如图为克隆犬“龙龙”诞生的流程图，回答下列问题：
   
(1)CRISPR/Cas9系统是由Cas9蛋白和sgRNA构成的RNA-蛋白复合体，其中的____负责识别并结合特定DNA序列，引导Cas9蛋白对目的基因进行编辑，在实践中发现该系统有时存在编辑对象出错而造成“脱靶”的现象，实验发现sgRNA的序列长短影响成功率，sgRNA序列越长脱靶率越____（填“高”或“低”）。
(2)取“苹果”的皮肤细胞，并进行体细胞建系。皮肤细胞在培养过程中，首先应保证其处于____的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要一定的气体环境是____。
(3)为了获得较多的卵母细胞，需要对供体实验比格犬注射____，获得的卵母细胞应在体外培养____期。
(4)克隆本质上是一种无性繁殖，该过程的最后一道工序是胚胎移植，其实质是____。胚胎移植前，需对供、受体犬进行____处理，为供体胚胎移入受体提供相同的生理环境。重构胚通常需要发育到____阶段才能进行胚胎移植。

5 . 有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某生物兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：
(1)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是___________。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之___________（填“前”或“后”）调节。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在培养基中添加适量的___________进行选择培养。
(2)该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是___________。
(3)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是____________。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为10³的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为___________个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是___________。

(4)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物____________（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。

6 . 啤酒是以大麦为主要原料，经酵母菌发酵制成，发酵工程的主要流程如图所示，其中糖化主要是将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列关于啤酒发酵的叙述正确的是（       ）

A．破碎有利于淀粉进入酵母菌，提升发酵速率

B．蒸煮的目的是终止酶的进一步作用和杀灭杂菌

C．优良菌种无需扩大培养可直接接种到发酵罐中

D．酒精的产生和积累主要在后发酵阶段完成

7 . 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述错误的是（       ）

A．通过煮沸消毒法可以杀死所有病原微生物及其芽孢

B．实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒

C．吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌

D．接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌

8 . 下列有关传统发酵技术及其应用的叙述，正确的是（       ）

A．酿酒过程中密封的时间越长，酵母菌产生的酒精量就越多

B．制作果醋时，在液体培养基的表面将会形成单菌落

C．制作泡菜时，乳酸菌可以将葡萄糖分解成乳酸和CO2

D．制作腐乳需要利用毛霉等产生的酶分解豆腐中的蛋白质等物质

9 . 某真菌的W基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，已知图乙中W基因转录方向是从左往右。为使放线菌产生该酶，以图甲中质粒为载体，进行重组DNA技术的相关操作。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	EcoRⅠ	MfeⅠ	KpnⅠ	HindⅢ
识别序列及切割位点（5′-3′）	G↓GATTC	G↓AATTC	C↓AATTG	GGTAC↓C	A↓AGCTT

(1)若要从土壤中筛选出纤维素分解菌，需要配制以为_____________唯一碳源的固体培养基并进行灭菌处理。为便于筛选可在培养基中加入____________染料。
(2)限制酶主要是从__________________（填“真核生物”或“原核生物”）中分离纯化出来的。结合上述图表分析应使用限制酶_________切割图甲中质粒，使用限制酶切割______图乙中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。
(3)与质粒中启动子结合的酶是______________。启动子通常具有物种特异性，在质粒中插入W基因，其上游启动子应选择____________（填生物类型）启动子，有利于W基因在目的菌中的表达产生高效降解纤维素的酶。
(4)W基因转录的模板链是__________（填“甲链”或“乙链”）。利用PCR技术对W基因进行扩增时子链延伸的方向是______________。

10 . 研究人员利用甲、乙两种二倍体植物的各自优势，通过植物体细胞杂交技术培育兼有两种植物优势且耐盐的目的植株，其实验流程如下图，a~e表示不同操作。下列相关叙述正确的是（       ）

   

A．通过a操作获得完整且有活性的原生质体，主要利用了纤维素酶和果胶酶的高效性

B．b操作可使用聚乙二醇促进两种原生质体的膜融合，以获得未分化状态的杂种细胞

C．d操作所用培养基应添加一定浓度的钠盐，且生长素与细胞分裂素用量比值小于1

D．甲、乙植株是两个不同物种，因此通过该技术培育出的目的植株会表现出高度不育