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1 . 为研究Atu5117启动子能否独立启动下游基因的表达,研究人员利用重叠延伸PCR技术,获得“Atu5117启动子和绿色荧光蛋白基因(GFP)”的“嵌合序列”,再构建基因表达载体(仅使用1种限制酶),以获得含有“嵌合序列”的重组DNA分子。相关过程、基础质粒及限制酶的酶切位点如图1所示。回答下列问题:

(1)重叠延伸PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2+,以激活______,PCR中预变性时间比循环过程中变性时间长,其原因是______
(2)由阶段2“变性后杂交”的原理可知,引物2和引物3在碱基序列上的要求是_____
(3)阶段3构建基因表达载体需要的酶有______,它们作用的化学键是______
(4)本实验中,在阶段3需破坏基础质粒上T7启动子的结构,从而使得GFP的表达仅受Atu5117启动子的调控,因此,在设计阶段1和2的引物时,需确保______(填引物名称)上含有______(填限制酶的名称)的识别序列。
(5)提取受体细胞的相应DNA,利用与阶段3相同的限制酶酶切,进行DNA电泳检测,结果如图2。已知Atu5117启动子、GFP基因、基础质粒的序列大小分别约为490bp、750bp、2750bp(bp代表碱基对),据图判断受体细胞______中成功导入了重组DNA分子。

2 . 果实颜色是番茄重要的品质性状之一。我国科研工作者在515份番茄资源中发现了7份果实呈现条斑状的变异材料,培育得到7份能稳定遗传的条斑状株系。
(1)番茄果实颜色受TAGL1的调控。以其中一份条斑状株系gs为材料,获得TAGL1超表达株系和TAGLI敲除株系,并检测三者的叶绿素含量。发现______,表明TAGLI的表达抑制叶绿素合成。
(2)gs株系同一果实表面有绿条斑(GS)和浅绿条斑(LGS),经检测,在浅绿条斑中TAGL1表达量高于绿条斑。推测浅绿条斑和绿条斑中TAGL1的碱基序列_____。进一步探究TAGL1对条斑性状的调控,发现其分子机制和相关蛋白的表达量如图:

结合图1、图2和(1),阐述TAGL1对绿条斑性状的调控路径:TAGL1转录形成siRNA和scaffoldRNA,______,表现为绿条斑。
(3)为进一步探究7份条斑状株系是否都有类似上述调控路径,先将野生型番茄分别与7份条斑状株系杂交,F1均表现为野生型,推断条斑状性状是______(填“显性”或“隐性”)性状。若以7份条斑状株系为实验材料,仅通过一代杂交实验确认它们是否为同一基因突变的结果,写出实验设计思路及预期结果:______
3 . 油菜素内酯(BL)是植物生长发育所必需的植物激素。为研究其跨膜运输机制,我国科研人员进行了如下实验。
实验一:ABCB19过去被认为是运输生长素的转运蛋白,但对ABCB19蛋白突变体植株进行培育,发现其表型与其他的生长素运输蛋白突变体表现出明显差异。
实验二:为探究ABCB19的底物特异性,用纯化的ABCB19分别与生长素(IAA)、赤霉素(GA)、BL在适宜条件下混合,加入足量ATP后,测定各组ATP酶活性,结果见图1。

请回答下列问题
(1)BL在细胞内合成,含有多个亲水基团,可能难以通过______的方式运出细胞。
(2)ABCB19蛋白具有ATP酶活性,与底物结合时会被激活,ATP酶活性可以反映ABCB19的活性。据此分析,图1结果表明______
(3)结合实验一和二的结果,提出关于转运蛋白ABCB19的假说:______。为验证上述假说,科研人员利用3H标记的BL、脂质体WT和EQ、ATP、ATP酶抑制剂等进行转运实验。请根据图2的结果,补全实验设计表格。

分组

脂质体

3H-BL

ATP

ATP酶抑制剂

_____

+

+

_____

WT

+

+

_____

EQ

+

+

-

_____

+

+

+

注:WT为含ABCB19蛋白的脂质体,EQ为含突变型ABCB19蛋白的脂质体,突变型ABCB19蛋白不具有ATP酶活性;+表示添加,-表示不添加
(4)图2中曲线甲后期趋于平缓的原因是_____
4 . 某牧区气候恶劣,生态系统脆弱,境内生活着国家一级保护动物荒漠猫。该牧区的草原湿地泥炭层深厚,是生态系统物质循环的重要载体之一,也是重要生态屏障。
(1)若要研究该牧区荒漠猫的生态位,通常需要研究它的______(答出两点即可)。
(2)该牧区草原湿地含有丰富的土壤有机碳(SOC),其主要来源是_____。微生物通过分泌水解酶作用于SOC,产物一方面吸收后用于______,方面用于呼吸作用满足自身能量所需。
(3)为了探究湿地水位变化对土壤碳含量变化的影响,研究人员取不同水位土样添加一定量13C标记的葡萄糖,在相应水位条件下培养一段时间,然后测定土壤SOC和13C标记的微生物有机碳含量(MBC)。若培养时间过长,所测得MBC值通常______(填“偏高”或“偏低”);检测结果表明,水位下降会降低土壤SOC而提高MBC,请从微生物分解和合成代谢的角度给出合理的解释:水位下降导致土壤透气性增强,______
(4)在现有技术条件下,维持该牧区一个人口单位生存所需的生产资源和吸纳废物的草地、耕地、建筑用地等面积称为______。由表可知,该牧区出现了明显的生态赤字,且呈现______趋势,为了避免生态环境进一步恶化,逐步实现可持续发展,请结合当地情况提出一条降低生态赤字的有效建议:______
该牧区资源需求、供给总量(单位:hm2/人)

土地类型

2013年

2015年

2017年

2019年

需求

供给

需求

供给

需求

供给

需求

供给

草地

2.700

0.222

2.970

0.216

3.122

0.208

6.014

0.209

耕地

0.030

0.010

0.039

0.009

0.039

0.007

0.036

0.007

建筑用地

0.0024

0

0.0029

0

0.0039

0

0.0054

0

5 . 雌雄小鼠均能分泌雄激素。研究证实雄激素可影响小鼠皮肤内ILC2细胞的数量,从而调控树突状细胞(DC)的功能,进而影响免疫反应。下列叙述正确的是(  )

A.树突状细胞成熟时具分支,是有吞噬和抗原呈递功能的淋巴细胞
B.树突状细胞将处理后的抗原信息呈递给B细胞,使B细胞被激活
C.雄鼠分泌的雄激素较雌鼠多,使其患自身免疫病的概率高于雌鼠
D.成年雄鼠摘除性腺可促使ILC2细胞数量恢复到与雌鼠相近的水平
6 . 与水稻轮作的油菜常常会由于积水导致根系缺氧、光合速率下降,造成减产。对油菜进行淹水处理,测定有关指标并进行相关性分析,结果见下表。下列叙述错误的是(  )

光合速率

叶绿素含量

气孔导度

胞间CO2浓度

光合速率

1

叶绿素含量

0.86

1

气孔导度

0.99

0.90

1

胞间CO2浓度

-0.99

-0.93

-0.99

1

注:气孔导度表示气孔张开程度。表中数值为相关系数(r),当越接近1,相关越密切。r>0时,两者呈正相关;r<0时,两者呈负相关。
A.淹水时,油菜根部细胞利用丙酮酸产酒精,酒精积累会对植株产生毒害
B.水稻根部部分细胞程序性死亡形成通气腔隙,利于植株进行有氧呼吸
C.气孔导度与光合速率呈正相关,气孔导度的增大是由于光合速率上升
D.综合分析表中数据,推测除CO2外还存在其他因素影响油菜光合速率
7 . 一些兽类具有领域行为,动物个体或家庭通过划分地盘把种群占有的空间、资源分配给成员,领域空间的大小与机体的能量需求、成员数量等有关。繁殖季雄性会驱逐同性,独占并保卫自己的领地。下列叙述错误的是(  )
A.领域行为可以通过降低种内竞争来保证种群数量
B.领域行为可以通过影响出生率影响种群数量变化
C.领域行为与空间、资源数量有关,属于密度制约因素
D.与草食动物相比,同等体重的肉食动物个体占据的领域空间更小
8 . 某细菌的野生株能在基本培养基上生长,该细菌的亮氨酸缺陷型突变株因无法合成亮氨酸,只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法,使一系列培养皿的相同位置上能出现相应菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程,数字1~5表示菌落。下列叙述正确的是(  )

A.培养基A是基本培养基,培养基B是完全培养基
B.培养基A、B均为固体培养基,倒平板操作后,进行高压蒸汽灭菌
C.培养基B“盖章”接种后,需要用涂布器将菌种在培养基表面涂布均匀
D.可从培养基A中挑取菌落3、4进行纯化培养以获得亮氨酸缺陷型突变株
9 . 手指被割破,人会迅速缩手并感到疼痛、心跳加快。伤口愈合后仍隐隐作痛,这与病原体入侵引起的炎性疼痛有关。抗原刺激使巨噬细胞分泌神经生长因子(NGF),NGF作用于感受器上的受体,引起感受器兴奋并传至大脑皮层形成痛觉。下列叙述错误的是(  )
A.缩手反射中,兴奋以电信号形式直接传递到肌肉细胞,没有经过大脑皮层
B.伤害性刺激下,交感神经兴奋使心跳加快、肾上腺髓质分泌肾上腺素
C.NGF作用于感受器上的受体可使神经元膜内电位由负变正
D.研发抗NGF受体的单克隆抗体可为治疗炎性疼痛提供思路
10 . 寒冷条件下或施加外源脱落酸(ABA)后,马铃薯细胞中AREB4的表达量均上升。AREB4是一种转录因子,通过与海藻糖-6-磷酸合酶基因上游的特殊区段结合促进其表达,从而升高海藻糖的含量以降低细胞内液体的冰点。下列叙述错误的是(  )
A.推测ABA作为信息分子,经信号转导促进AREB4基因的表达
B.转录因子AREB4结合的特殊区段不是起始密码子所对应的区段
C.马铃薯的性状受低温、脱落酸、多个基因表达的共同调控
D.降低ABA合成基因的表达,是提高马铃薯耐寒性的研究思路
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