1 . 研究人员将黑曲霉菌高产糖化酶基因导入毕赤酵母GS115中，构建能直接利用淀粉的工程菌，该过程所用质粒（仅示部分结构）如图1所示。图2是高产糖化酶基因及PCR扩增后的示意图（仅示部分碱基），甲、乙、丙和丁为引物。请回答下列问题。   

(1)______是培育直接利用淀粉的工程菌的核心步骤。
(2)获取目的基因需要利用PCR技术扩增目的基因，应选用的引物组合为________，并在其_______（填“5'”或“3'”）端添加限制酶切割位点。A为扩增后添加限制酶切割位点，则图中A处的碱基序列应为________。
(3)毕赤酵母GS115是一种组氨酸营养缺陷型微生物，自身不能合成生长必需的组氨酸，并且对氨苄青霉素敏感，因此可最好利用________的培养基（不含淀粉）筛选导入高产糖化酶基因表达载体的毕赤酵母GS115（重组细胞），再将筛选出的细胞转接至含_____的培养液（含淀粉）中进行发酵产酶性能测定。

2 . 大肠杆菌能进入实体瘤核心并保持较强活性，科研人员期望利用大肠杆菌构建一种基因表达可控的工程菌，用于人体特定部位实体瘤的免疫治疗。科研人员利用温度敏感型转录调控蛋白构建温控表达的质粒系统，部分结构如下图。在人体特定部位进行42℃处理后，p7可在重组酶Bxb1作用下翻转，免疫元件中的GFP和aPD-L1两种基因可以成功表达。据此回答下列问题：

   

(1)推测p7应为____（填“启动子”或“终止子”），其功能是____。
(2)Tel42为来自λ噬菌体的温度敏感型转录抑制因子，在大肠杆菌中具强活性的启动子pLac可以使Tel42持续性表达，当温度____（填“低于”、“等于”或“大于”）42℃时，Tcl42蛋白会抑制启动子pRL。
(3)质粒系统就像“基因电路”，其中的Tcl42基因就像“开关”，能在加热时瞬时激活特定基因。其核心基因包括重组酶Bxb1基因、分泌型aPD-L1蛋白基因（该蛋白可用于免疫治疗）等。请选择相关选项完善该“基因电路”的技术路线：用不同的限制酶、DNA连接酶分别处理温控抑制元件、重组元件、免疫元件及质粒，构建“基因电路”→ ____→重组酶Bxb1基因不表达→免疫元件无功能（不表达aPD-L1）→____→解除Tcl42蛋白对启动子pRL的抑制→____→____→细菌合成GFP，并分泌大量aPD-L1。将下列选项代号填入上述横线，将“基因电路”补充完整。
A．受体菌37℃时
B．菌体升温至42℃时，蛋白Tcl42失去活性
C．荧光蛋白GFP基因、aPD-L1基因的转录
D．重组酶Bxb1基因表达，进而引起p7两侧发生重组
(4)将“基因电路”质粒导入菌体前，科研人员用Ca²⁺处理大肠杆菌的作用是____。导入后的菌体用____方法接种于含四环素的培养基上，由此成功构建用于免疫治疗的温控工程菌。
(5)使用聚焦超声（FUS）装置，可以使动物特定范围的组织快速升温至42℃，从而实现体内微生物治疗的温度控制。为验证上述温控工程菌可被FUS处理激活，并具有肿瘤免疫治疗效果。请以成瘤建模后的小鼠为材料，设计一个实验方案____。

3 . 糖尿病能显著增加认知障碍发生的风险，研究团队发现在胰岛素抵抗（IR）状态下，脂肪组织释放的外泌囊泡（AT-EV）中含有高含量的miR-9-3p（一种miRNA），该物质能使神经细胞结构功能改变，导致认知水平降低。下图表示IR鼠脂肪组织与大脑信息交流机制。下列有关叙述正确的是（　　）

A．当神经冲动传导至①时，突触前膜释放的神经递质与突触后膜受体结合，引起突触后膜膜内电位降低，从而引发突触后神经元兴奋

B．IR状态下，推测②的胰岛素受体减少或受损，其释放的③经体液运输到脑部，miR-9-3p进入神经细胞抑制细胞内的基因表达，导致认知水平降低

C．为研究miR-9-3p对突触的影响，可采集IR小鼠和正常小鼠的AT-EV配置缓冲液，分别注入两组正常小鼠体内，检测并对比两组小鼠突触变化即可得出结论

D．为研究抑制miR-9-3p可否改善IR引起的认知障碍症状，可将miR-9-3p抑制剂导入实验鼠，检测并对比对照组和实验组miR-9-3p的含量即可得出结论

4 . 苍耳是一种短日照植物，含有4片完全展开叶片的苍耳才有接受光周期的能力。为探究苍耳的开花调控与光周期的关系，研究人员对其进行了以下两个实验，图中光周期处理的L表示连续光照处理，D表示连续黑暗处理，除特殊说明外，均为整株处理；实验二中4株苍耳通过嫁接连在一起。一段时间后，实验一中的②③④不开花，其余均开花。下列叙述错误的是（       ）

   

A．苍耳感受光信号的物质是水溶性的光敏色素

B．根据实验结果可知，仅靠一片叶片不足以完成光周期诱导的作用

C．实验表明叶片感知光照信息后产生影响开花的物质，能够从嫁接部位传递给其他植株

D．若提供合适光周期，但用闪光打断连续黑暗后不开花，则苍耳开花由连续黑暗时长决定

5 . 融合PCR技术采用具有互补末端的引物，形成具有重叠链的PCR产物，通过PCR产物重叠链的延伸，从而将不同来源的任意DNA片段连接起来。其原理如图所示，据图分析不正确的是（       ）

A．上述过程中使用的引物P2和P3的碱基需要完全互补配对

B．可在同一个反应体系中进行甲基因和乙基因的扩增

C．融合PCR的第一步两条链重叠部位可互为另一条链的引物，不需要另加入引物

D．若融合PCR的第二步获得128个融合基因，理论上该过程消耗了254个引物

6 . 在线粒体内膜上，ATP合成酶利用质子泵运输H⁺形成的浓度梯度驱动ATP合成，如下图所示。研究发现海狮棕色脂肪组织的线粒体内膜上存在一种U蛋白，可将质子泵运输的H⁺直接运回线粒体基质。下列叙述正确的是（       ）

   

A．组成脂肪和质子泵的元素均为C、H、O、N

B．脂肪和磷脂、固醇的结构相似，均不溶于水

C．推测敲除U蛋白基因后，海狮棕色脂肪组织的线粒体内膜上合成的ATP增多

D．图中H+从膜间隙回流至线粒体基质的方式是主动运输

7 . 尿糖试纸是用来检测尿糖情况的专用试纸，试纸将葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶以及显色剂固定在纸条上，根据葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下形成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化氢酶的催化作用下形成水和原子氧，以及原子氧可以将某种无色的化合物氧化成有色物质的原理，测定尿液中葡萄糖的相对含量。下列叙述正确的是（       ）

A．该尿糖试纸的检测原理与斐林试剂检测还原糖的原理相同

B．显色剂变色的原因是H2O2将无色化合物氧化为有色化合物

C．尿液中葡萄糖被葡萄糖氧化酶分解后会影响测量的准确性

D．使用尿糖试纸检测糖尿病患者的尿液一定会产生显色反应

8 . 光敏色素是植物接收光信号的分子，具有非活化态（Pr）和活化态（Pfr）两种形式。在农业生产中，作物密植或高低作物间作有时会导致荫蔽胁迫，下图为某种光敏色素和几种重要植物激素响应荫蔽胁迫的信号传递系统示意图。下列说法错误的是（       ）

注：“＋”表示促进，“—”表示抑制。

A．幼苗下胚轴伸长由基因表达调控、激素调节和环境因素调节共同完成

B．自然光被高位植物滤过后，其中红光/远红光的比值会下降

C．荫蔽胁迫引发低位植物的茎秆等出现明显伸长，不利于植物适应环境变化

D．图中四种植物激素在调控下胚轴及茎秆的伸长方面表现为协同作用

9 . 现建立“动物精原细胞（2n=4）有丝分裂和减数分裂过程”模型。将染色体DNA都被³²P标记的1个精原细胞置于不含³²P的培养液中正常培养，分裂为2个子细胞，其中1个子细胞发育为下图细胞①。细胞①和②的染色体组成如图所示，H/h、R/r是其中的两对基因。下列叙述错误的是（       ）

A．细胞①中含32P的核DNA分子数是4或5

B．细胞①的形成过程中发生了基因突变和基因重组

C．细胞④~⑦中含32P的核DNA分子数可能分别是2、1、1、0

D．该模型中动物精原细胞的基因型为HhRr或Hhrr

10 . 下图是生长激素（GH）分泌调节及作用机制图解，据图回答有关问题。
   
(1)失去父母或生活在父母粗暴、亲子关系紧张家庭中的儿童，可出现生长缓慢、青春期延迟，被称为心因性侏儒。由图可知，该儿童在应激刺激作用下，位于___________的高级中枢产生的物质A结合 SS 神经元膜上的特异性受体，导致该神经元发生电位变化并分泌激素 SS，最终导致垂体分泌GH降低。 其中反射过程中 SS 神经元属于反射弧中的___________。
(2)某患者由于垂体分泌的 GH 增多而患上“垂体性糖尿病”，该病通过注射胰岛素进行治疗效果不好的原因是________________。
(3)甲状腺激素、性激素及人体在应激刺激、慢波睡眠等状态下均可促进 GH的分泌增多。肝脏分泌的 IGF-Ⅰ可通过促进下丘脑 SS 神经元分泌生长抑素（SS）、抑制下丘脑 GHRH神经元分泌 GHRH、直接抑制垂体等途径调节 GH 的分泌，其意义为___________。
(4)根据题图，可以确定软骨细胞具有___________（填“GH 受体”“IGF-1 受体” 或“GH 受体和 IGF-1 受体”）。研究人员将正常小鼠和 IGF-I 基因缺失小鼠分组饲养后，检测体内 GH 水平。据图预测，IGF-I 基因缺失小鼠体内 GH 水平应___________（填“低于”“等于”或“高于”）正常小鼠。