1 . 幽门螺杆菌（Hp）生存于人体胃的幽门部位，能够引起慢性胃炎等胃部疾病。尿素在酶的作用下分解产生NH₃和CO₂。体检时常用¹⁴C呼气试验来诊断测试者是否感染Hp，测试者口服含¹⁴C标记的尿素胶囊，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有¹⁴CO₂来诊断是否感染Hp。医务工作者也可以采集胃病患者样本进行微生物的纯化操作，判断是否感染Hp。下列相关分析错误的是（       ）

A．呼气试验的前提是Hp能合成和分泌脲酶，从而催化尿素分解.

B．对样本进行微生物的纯化操作时，一般采用固体培养基

C．筛选Hp的培养基应以尿素为唯一氮源，能抑制杂菌生长

D．在培养基中可加入醋酸洋红液来鉴定是否分离得到了Hp

2 . 营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能进行的菌株。下图是科研人员利用影印法（用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上）初检某种氨基酸缺陷型菌株的过程。下列叙述错误的是（       ）

   

A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养

B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上

C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选

D．可用接种环从斜面中取出菌种，振荡培养并诱变处理

3 . 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究如图，据图回答下列问题：
   
(1)图中I号培养基称为________________ 培养基（按功能分）；图1③过程采用的接种方法是__________________。③过程所用的接种方法统计菌落数目会比实际数目_______________(选填“多”或“少”)。
(2)该培养基中除了加入脂肪外，还需加入另一种重要的营养成分_____。

A．琼脂

B．葡萄糖

C．硝酸铵

D．碳酸氢钠

(3)在培养基的配制过程中，操作方法包括以下步骤，其正确顺序为       。
①溶解       ②调整pH        ③培养基的分装       ④称量       ⑤灭菌       ⑥倒平板

A．①②⑤④⑥③	B．④①②③⑤⑥
C．⑤①②④③⑥	D．①②④③⑤⑥

(4)可用于判断培养基上生长菌落种类的依据是菌落的__________

A．形态特征

B．DNA序列

C．数量

D．分布状况

(5)为提高酵母菌产酶能力，在图的①过程采用射线辐照育种，培养纯化获得A、B两突变菌株，该育种方法是_____。

A．杂交育种	B．诱变育种
C．单倍体育种	D．多倍体育种

(6)在处理含油废水的同时，可获得蛋白质，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如下图，据图分析，应选择菌株_____进行后续相关研究，理由是_____________________________。
   
(7)根据下图结果，计算每克土壤样品约含细菌__________个。
   
(8)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有______________

A．制作果酒

B．由果酒制作果醋

C．制作酸奶

D．生产青霉素

4 . 我国科学家发现“超级蠕虫”——黄粉虫(俗称面包虫)可以吃塑料。并从其肠道内分离出了能够降解聚苯乙烯(塑料的主要成分，缩写PS)的细菌。为解决全球塑料污染问题打开了一扇新的大门。某科研小组计划在实验室分离纯化能高效降解聚苯乙烯的细菌(目标菌)。然后获取相关酶，以期实现塑料的生物酶降解。其基本思路如图：

Ⅰ号培养基：水、无机盐、氮源、物质X
Ⅱ号培养基：水、无机盐、氮源、物质X、物质Y,
(1)物质X和物质Y分别是_______________和__________________。
(2)图中接种到培养基Ⅱ所用的接种方法是_____________其目的是__________。
A.大量繁殖菌株                      
B.获得单个菌落
C.大量获得塑料降解酶            
D.分离提纯所需降解塑料酶
(3)图中接种到培养基所用到的工具有_____________。(编号选填)

(4)富集培养基中含有酵母膏、蛋白胨等，从基本用途来看，该培养基属于_____________培养基；富集培养时，要将锥形瓶放入25℃恒温摇床，以100r/min的转速振荡培养，目的是__________________。
(5)科研人员挑选出了3株能稳定降解PS塑料的菌种P1、P2和P3。科研人员将红色PS粉碎成粉末，均匀混合在无碳固体培养基中，之后再接种经过稀释三种菌液，一段时间后可测得透明圈大小(D)与菌圈大小(d)(如下图所示)。若使用单一菌种进行扩大培养，应选用_____菌种，理由是______________。

(6)与图中的接种方法相比，显微镜直接计数法的结果___________(偏大/偏小)，原因是______________。
(7)聚乳酸(PLA)是以乳酸为主要原料的聚合物。某科研机构拟从黄粉虫肠道中筛选PLA降解菌，按照如下图流程培养鉴定。下列叙述正确的是          。(多选)

A．实验过程中需要设置适宜的温度和pH环境，并保证严格的无菌操作

B．PLA既可为PLA降解菌提供碳源，又对培养基中微生物起选择作用

C．操作过程中，需要将接种和未接种的平板正置培养

D．纯化培养后，可根据菌落形状、大小、颜色及DNA检测等进行菌种鉴定

6 . 阅读下列材料，回答以下小题：
某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先从土壤中筛选出纤维素分解菌，并接种在已粉碎的作物秸秆堆中培养一段时间，再用清水淋洗秸秆堆，在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。部分实验流程如图所示。

1．关于从土壤中筛选纤维素分解菌的实验，下列叙述错误的是（       ）

A．可选择在木材厂周围采集土样

B．需配制以纤维素为唯一碳源的选择培养基

C．对培养基进行高压蒸汽灭菌前应排尽锅内冷空气

D．采用稀释涂布平板法统计的活菌数低于实际菌落数目

2．关于酵母菌的乙醇发酵的实验，下列叙述正确的是（       ）

A．该淋洗液可作为培养酵母菌的天然培养基

B．乙醇发酵过程中需始终拧紧瓶盖以防止杂菌污染

C．乙醇发酵过程中丙酮酸被NADH直接还原为乙醇

D．发酵液中的乙醇可用溴麝香草酚蓝溶液检测

7 . 某污水处理厂欲处理一批含As^3＋和硝酸盐浓度较高的污水，研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选，得到了耐砷的反硝化细菌，它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N₂O和N₂。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下：
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选_______：该培养基中含有适宜浓度的________，从而有利于该菌的生长，抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________培养基。
接种：取采集的人体新鲜粪便样品0.3 g，接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化：取200～300μL上述培养液，均匀地涂布在已经添加了5 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的细菌固体培养基上。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________；涂布完成后，将平板置于温度为________的恒温培养箱中培养24 h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化，用该种方法进行接种时，接种工具是________，该接种工具的灭菌方法是________。操作时，在第二次及其以后的划线时，总是从上一次划线的________开始划线，目的是_______。
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力：挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养，吸取1 mL菌液离心收集菌体后，分别接种到含有0 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L、10 mmol/L As^3＋和10 mmol/L NO₃^-的液体培养基中，测定其OD值(OD值越大，表明菌体数量越多)，并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论：_______。

8 . 为探究不同配方的洗手液对金黄色葡萄球菌的抑菌效果，某实验小组将金黄色葡萄球菌接种到蛋白胨培养基上，接着用滤纸片蘸取不同配方的洗手液放置在该平板上。培养一段时间后，结果如下图1；科研人员现采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选农田土壤能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如图2所示实验流程；为纯化菌种，在鉴别培养基上接种尿素分解细菌，培养结果如图3所示。关于微生物培养和应用的相关表述，下列说法错误的是(      )

（1）蛋白胨可为金黄色葡萄球菌提供碳源、氮源、维生素
（2）蛋白胨培养基为金黄色葡萄球菌的选择性培养基
（3）本实验中接种金黄色葡萄球菌的方法为稀释涂布平板法
（4）甲配的洗手液对金黄色葡萄球菌抑菌效果好
（5）图2驯化培养基A中加入的物质X是敌敌畏，其诱导微生物产生高耐受或能降解敌敌畏的变异，以达到驯化目的
（6）图2驯化后的微生物常利用接种环挑取菌液在培养基B上连续划线分离获得单菌落，划线接种过程中需对接种环进行5次灼烧
（7）可以通过检测以敌敌畏为唯一碳源的图2培养基C中敌敌畏的剩余量，筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物再进行纯培养
（8）用稀释涂布平板法来统计菌落数，能测得图2培养基C中活菌数的原因是平板上的一个菌落就是由一个活菌繁殖形成
（9）平板涂布时需在酒精灯火焰旁，打开皿盖放在一边，用灭菌后的涂布器进行涂布
（10）空白平板使用前需进行无菌鉴定，接种后未长出菌落的平板可以直接丢弃
（11）采用稀释涂布平板计数时，统计结果往往多于原始菌液中微生物数量
（12）利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
（13）土壤中的细菌，绝大多数分布在距离地表约3～8cm的土壤中，取样时一般铲去表层土
（14）测定土壤中细菌的数量，一般选用10²、10³、10⁴倍数的稀释液进行平板培养
（15）取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌
（16）在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作
（17）微生物在液体培养基中生长时，可形成肉眼可见的菌落
（18）各种微生物培养基都含有的营养物质包括水、糖类、脂肪、蛋白质和无机盐
（19）培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素
（20）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤依次是计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
（21）湿热灭菌后的培养基需冷却至室温再倒平板，避免高温杀死菌种
（22）筛选可分解尿素的菌种时，培养基中还需加入适量的碳源
（23）实验室分离纯化菌种一般使用液体培养基或半固体培养基
（24）图3采用的接种方法为平板划线法和稀释涂布平板法
（25）培养基中的尿素被分解后，可使酚红指示剂变为红色
（26）图3实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的
（27）可用干热灭菌法对盛有培养基的培养皿和试管等进行灭菌

9 . 牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基，过程中涉及图1和图2；图3是筛选抗链霉素大肠杆菌的实验步骤及相关图解。实验步骤：①把大量对链霉素敏感的大肠杆菌接种在不含链霉素的培养基1的表面，进行培养。②待其长出密集的小菌落后，用影印法接种到不含链霉素的培养基二上，随即在影印到含链霉素的培养基3上，进行培养。③在培养基3上，出现了个别抗链霉素的菌落，将其挑选出，以此类推。

(1)图1从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应有____成分，该培养基按功能来分应为____培养基。
(2)图1过程②过程所使用的接种方法是____。科研人员先用0.85%NaCI溶液进行系列稀释而不用无菌水，原因是____。在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是____。
(3)刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图），图中降解圈大小与纤维素酶的____有关，图中降解纤维素能力最强的菌株是____（填图中序号）

(4)图2在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为10⁴的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179。则每毫升样品中含有细菌数量为____个。
(5)菌落是指____，从生态学角度分析，菌落实质上属于_______。
(6)配制培养大肠杆菌的培养基，一般都含有______物质。
(7)从功能上看，图3中含有链霉素的培养基3、7、11属于______。由上图3可知，原始菌种接种到培养基1、5、9的方法是_____。
(8)图3中对2和3进行比较，在2上找到与3上相应的菌落，挑取其中一个菌落接种到_____（含链霉素/不含链霉素）的培养基上， 如果有较多的菌落出现，则说明该抗性基因突变发生在该菌接触链霉素之_____ （ 前/后）。
(9)实验中所用到的培养皿、接种环、培养基等均需进行灭菌处理，其中可用灼烧灭菌法进行灭菌的是_________，必须用湿热灭菌法进行灭菌的是____________，它不使用干热灭菌的原因是_____________ 、_____________。
(10)接种前，为了检测培养基平板灭菌是否合格，可以采用的方法是____________。