3 . 绿原酸、类黄酮物质属于烟草的次生代谢产物，具抗衰老、预防心脑血管疾病等功效。烟草酰基转移酶（NtHCT）是一种在烟草次生代谢中进行酰基化修饰的蛋白。为研究NtHCT是否参与烟草绿原酸和类黄酮物质的合成，有人构建了pCXSN-NtHCT超量表达载体，并将其导入到野生型烟草中，获得NtHCT稳定高表达的转基因烟草。
(1)提取烟草叶片细胞中总RNA，以其为模板在______酶的作用下得到总cDNA，可以设计特异性引物通过PCR从总cDNA中专一性的扩增出NtHCT基因的cDNA，原因是_______。
(2)扩增NtHCT基因时，需在上、下游引物中分别加入限制酶_______的识别序列，以便与图所示质粒pCXSN构建正确连接的超量表达载体。将该载体转入农杆菌中，通过_______法使NtHCT基因整合到受体细胞的染色体DNA上，进而获得转NtHCT基因的烟草。从功能上分析，图中的卡那霉素基因将作为______，用于NtHCT基因的检测与鉴定。

(3)待烟草长至8叶期时，检测转NtHCT基因烟草（1～5号）和野生型烟草（SS）叶片中的绿原酸和类黄酮物质（芦丁和山柰酚芸香苷）含量的检测结果如下表。

样品编号	绿原酸（μg/g）	芦丁（μg/g）	山柰酚芸香苷（μg/g）
SS	283.2	12.6	11.7
1	1791.5	524.6	159.2
2	1574.4	242.7	138.7
3	1485.5	331.8	93.2
4	770.8	435.9	119
5	767.9	214.4	115

由表可知，NtHCT能够促进烟草的绿原酸和类黄酮物质的合成，依据是______。
(4)研究人员对NtHCT的催化中心结构进行分析，推测将第105位的甘氨酸替换为组氨酸，可以大幅提高其催化效率。请完善下列利用蛋白质工程对NtHCT进行改造的基本思路：
提高NtHCT的催化活性→推测将第105位的丙氨酸替换为组氨酸→______→获得NtHCT→______。

10 . 亚洲棉的光籽（无短绒）和毛籽（有短绒）是一对相对性状，为探究棉绒的遗传规律并揭示其发育的分子机制，研究者进行了系列实验。
(1)利用表型为光籽的不同突变体与野生型毛籽棉进行杂交，统计F₁自交结果如下表：

组别	亲本	F2表型及比例
①	突变体甲×毛籽棉	光籽∶毛籽＝3∶1
②	突变体乙×毛籽棉	光籽∶毛籽＝13∶3
③	突变体丙×毛籽棉	光籽∶毛籽＝9∶7

据表可知，突变体甲光籽性状的遗传遵循__________定律；②组F₂光籽棉中的纯合子所占比例为__________；推测③组F₁测交后代表型及比例为__________。综合三组杂交实验结果，表明__________之间并非简单的一一对应关系。
(2)研究发现，8号染色体的～880kb至～903kb区间与突变体甲的光籽表型相关。根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物，提取突变体甲和野生型的__________进行PCR，产物扩增结果如下图。

据图可知分子量较大的扩增产物与点样处的距离较__________（选择“大”或“小”填写），推测8号染色体上第__________对引物对应的区间（简称M）__________是突变体甲光籽出现的根本原因。
(3)研究者对杂交组合①的F₂进行扩增，证实甲的光籽表型与区间M密切相关。得出此结论的扩增结果应该是__________。
(4)研究者从野生型和突变体甲中克隆出区间M后，运用基因工程技术分别导入棉花原生质体，检测基因表达水平，结果如下图。

内参基因REN是为了排除转化效率不同对实验结果的干扰，因此图中LUC/REN用来衡量__________的表达水平。实验结果说明突变体甲的区间M促进下游基因的表达，且其作用的发挥与区间M的_____有关。
(5)基因GaFZ的表达会影响棉花短绒的发育，检测发现突变体甲GaFZ蛋白结构与野生型一致。综合上述研究推测突变体甲光籽表型出现的原因是__________。