2 . 霉菌中的黑曲霉广泛分布于空气、土壤中，可产生柠檬酸和蛋白酶、淀粉酶等多种酶，是重要的发酵菌种。回答下列问题：

(1)黑曲霉菌的分离。选择合适地点采集10g土壤样品，转入90mL______中制成悬液，经等比（梯度）稀释后，采用______法进行分离。培养一定时间后，通过观察平板中______初步确定黑曲霉菌菌落。实验结果表明，土壤悬液稀释100倍后，经平板培养平均长有72个黑曲霉单菌落，则该样品中，每克土壤约含有黑曲霉菌______个。该方法统计的结果往往比实际数值______。
(2)黑曲霉菌的培养。用______将最终分离得到的黑曲霉菌转移到添加蔗糖的豆芽汁培养基进行培养，其中蔗糖为黑曲霉菌的生长提供______。在将培养基进行灭菌前，还需将pH调至______。
(3)黑曲霉菌的应用。高品质食品的生产需要优质黑曲霉菌种，在野生型菌种基础上，通过______（答出两种）等方法可获得优质菌种。啤酒的工业化生产中先利用黑曲霉菌对富含淀粉的原料进行糖化处理，才能进一步进行酒精发酵，该处理的原理是______。
(4)黑曲霉菌的危害。针对黑曲霉菌导致的谷物腐烂问题，研究人员筛选出若干株对黑曲霉菌有抑制作用的菌株，将各菌株分别加到黑曲霉菌生长良好的培养基上，通过测定______比较不同菌株对黑曲霉菌的抑制能力。如图所示的结果表明，抑制作用最强的菌株编号为______。

4 . 果实颜色是番茄重要的品质性状之一。我国科研工作者在515份番茄资源中发现了7份果实呈现条斑状的变异材料，培育得到7份能稳定遗传的条斑状株系。
(1)番茄果实颜色受TAGL1的调控。以其中一份条斑状株系gs为材料，获得TAGL1超表达株系和TAGLI敲除株系，并检测三者的叶绿素含量。发现______，表明TAGLI的表达抑制叶绿素合成。
(2)gs株系同一果实表面有绿条斑（GS）和浅绿条斑（LGS），经检测，在浅绿条斑中TAGL1表达量高于绿条斑。推测浅绿条斑和绿条斑中TAGL1的碱基序列_____。进一步探究TAGL1对条斑性状的调控，发现其分子机制和相关蛋白的表达量如图：

结合图1、图2和（1），阐述TAGL1对绿条斑性状的调控路径：TAGL1转录形成siRNA和scaffoldRNA，______，表现为绿条斑。
(3)为进一步探究7份条斑状株系是否都有类似上述调控路径，先将野生型番茄分别与7份条斑状株系杂交，F₁均表现为野生型，推断条斑状性状是______（填“显性”或“隐性”）性状。若以7份条斑状株系为实验材料，仅通过一代杂交实验确认它们是否为同一基因突变的结果，写出实验设计思路及预期结果：______。

5 . 穴位（学名腧穴），是脏腑、经络气血输注出入的特殊部位，也是针灸、推拿等疗法的主要施术部位，，多为神经末梢密集或较粗的神经纤维经过的地方。针灸中不同针法（刺激形式和刺激量）可兴奋不同类型和数量的外周神经，达到减缓或治疗相应疾病的目的。下图1为针灸效应部分生理途径示意图，回答下列问题。
(1)针刺穴位有针感意味着_______被激活，并将信号转化为_______沿着神经纤维向神经中枢传导。针感的产生_______（填“是”或“不是”）反射活动。
(2)针灸强调“穴位有讲究，轻重不一样”，不同针法可引起不同类型的植物性神经兴奋或抑制。图2中甲、乙分别为利用细针和粗针进行针灸治疗时，针刺部位神经末梢的电位变化。细针治疗_______（填“引起”或“未引起”）动作电位，判断依据是_______。

研究还发现，针刺某穴位，A兴奋增加胰岛素分泌，B兴奋抑制胰岛素分泌，可知A、B分别为_______神经。
(3)为研究针灸对糖尿病大鼠血糖及胰岛素分泌的影响，根据下列实验材料补充完善实验思路并分析实验结果。
实验材料：健康的生长状况一致的大鼠若干只，链脲佐菌素（STZ）试剂（STZ是一种特异性破坏胰岛β细胞的药物），胰岛素制剂，电针等。
实验思路：
①制备糖尿病模型大鼠。
随机取健康的生长状况一致的大鼠若干，高糖高脂饮食4周，同时注射_______建立糖尿病模型大鼠。
②将糖尿病模型大鼠，随机均分为A、B、C三组。
A组：糖尿病模型大鼠，正常饮食。
B组：糖尿病模型大鼠， _______，正常饮食。
C组：糖尿病模型大鼠，选取“足三里”等穴位，每天针灸，正常饮食。
D组： _______，正常饮食。
在相同且适宜的条件下，共进行为期1个月的实验，每周测定_______。
③统计分析实验数据。
回答下列问题：
a．将实验思路补全。①_______；②_______；_______；_______。
b．设计实验结果记录表。_______
c．分析与讨论：和药物治疗比，针灸治疗糖尿病的优势在于_______，其机制可能涉及_______的调节，其中可能属于针灸对特异性体液免疫调节影响的有哪些？_______
A．针灸可促进辅助性T细胞分泌细胞因子
B．针灸可促进B细胞的活化及B细胞的增殖分化
C．针灸有利于加速效应细胞毒性T细胞诱发靶细胞凋亡
D．针灸可促进免疫球蛋白的合成和分泌

6 . 某课题组将盐生植物碱茅的抗盐碱基因（PuCAT）导入紫花苜蓿，培育紫花苜蓿新品种。回答下列问题。

   

注：图1中①④、②③为两对引物，PuCAT基因内部无SacI、BamHI、XbaI酶切位点：图2为构建表达载体的P3300质粒，Sac1、BamH1、Xba1为可以切出不同黏性末端的三种限制酶的识别位点，Bar为抗草铵膦基因，Kan^r为卡那霉素抗性基因、Amp^r为氨苄青霉素抗性基因。农杆菌对头孢霉素敏感。
(1)目的基因的获取和表达载体构建。依据_______设计引物，用PCR技术从碱茅的基因组中获取目的基因，然后与P3300质粒连接构建基因表达载体。为保证扩增出的PuCAT与P3300质粒正向连接且不出现自身环化，据图1和2分析，应分别在引物_______的5’端分别添加_______限制酶的识别序列。
(2)采用农杆菌转化法将目的基因导入苜蓿的子叶细胞。转化农杆菌时，应向培养液中添加_______以利于重组质粒进入农杆菌；然后利用含_______的选择培养基对完成转化的农杆菌进行筛选：农杆菌与紫花苜蓿子叶共培养时，重组P3300质粒上的_______可以携带PuCAT和Bar基因转移至植物细胞并整合至植物细胞的染色体DNA上：共培养后立即将子叶转移到含有_______的固体培养基上培养，以获得转化成功的子叶细胞。
(3)转基因植株的培育与检测。将完成转化的紫花苜蓿子叶接种到MS培养基中培养，经过_______或器官发生途径形成转基因植株。PCR检测转基因紫花苜蓿是否含目的基因，需用_______为阴性对照，水为空白对照，含目的基因的重组质粒为阳性对照。进一步检测目的基因表达，提取检测阳性的转基因紫花苜蓿总RNA，并使用逆转录酶，合成_______，进行PCR。经凝胶电泳检测结果为阳性，可以确定目的基因表达出了_______。