7 . 线粒体DNA（mtDNA）的转录调控对维持线粒体的正常功能至关重要。mtDNA的2条链分别称为重链和轻链。
(1)mtDNA的转录过程与核DNA相似，在______酶的作用下，游离的______依次连接，合成mRNA．
(2)环境变化信号会诱导7SRNA在线粒体中积累，科研人员推测7SRNA可以调控mtDNA轻链转录，并以mtDNA轻链为模板构建体外转录体系来进行实验验证。
①科研人员设置了2组实验，其中A组加入不同浓度的7SRNA，B组加入不同浓度的无关RNA作为____；
②检测体系中mtDNA轻链转录的mRNA生成量，据图1可知，7SRNA______（填“促进”、“抑制”或“不影响”）mtDNA的转录。
   
(3)图2所示为mtDNA轻链的转录起始复合物，由酶POLRMT、转录因子（TFAM和TFB2M）和mtDNA轻链启动子组成。7SRNA可以与转录起始复合物中某种成分结合，诱导其空间结构改变进而影响转录。为确定7SRNA结合的具体成分，科学家进行体外转录实验，检测mtDNA轻链mRNA的生成情况，结果见下表。

实验处理	不用7SRNA处理	用7SRNA处理	用7SRNA处理
			一段时间后加入POLRMT	一段时间后加入TFAM	一段时间后加入TFB2M	一段时间后加入mtDNA
mtDNA轻链mRNA 的生成情况	+	-	+	-	-	-

注：+代表有mtDNA轻链mRNA；-代表无mtDNA轻链mRNA
根据表中结果7SRNA结合的成分应为____，判断的依据是____。该成分在与7SRNA结合时，会聚合形成二聚体。
(4)继续研究发现高浓度的7SRNA会诱导线粒体中mtEXO（RNA降解酶复合体）的形成，从而形成一个完整的mtDNA转录调控系统，维持线粒体基因表达的动态平衡过程。综合题中信息，请完成下图示，阐明mtDNA轻链转录的调控机制______。
   
注：补全图中2处横线和2处方框中的内容

8 . 氨基酸定点突变分析是研究蛋白质的结构和功能、酶催化机理以及对基因表达产物进行定向改造的重要技术。在基因内部引入点突变，是获得氨基酸定点突变的主要方式。下图是利用PCR介导的定点突变技术的原理图，其中三个引物分别为F1（5'—GGAATTCCATATGAGGATCCTCTTTC—3'）（GAATTC为EcoRI识别位点，并切割G和A之间的磷酸二酯键，CATATG为NdeI的识别序列，并切割C和A之间的磷酸二酯键）、F2（5'—TGGGACGACTTCGCCTCGACCATGC—3'）（黑体GA为突变碱基）和R2（5'-CCCCCCGGGGGCGGCCAGCCGCTC—3'）（CCCGGG为SmaI的识别序列，并切割C和G之间的磷酸二酯键），野生型基因已连接在质粒PIK340上，且序列已知。

   

(1)第2轮PCR是在第1轮PCR的反应体系中进行的，虽然只加入了F1引物，但仍能得到突变基因的原因是_____________，得到的突变基因与pT7Blue质粒连接时需用的酶是______________。（填“E．coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）
(2)在IPTG和X-gal存在的条件下，Laz基因表达后，产生蓝色物质，否则为白色。据图分析，在固体培养基上添加IPTG和X-gal后，形成的白色菌落不一定是成功导入克隆载体的大肠杆菌，理由是______________。若要选出成功导入克隆载体的大肠杆菌，还应在培养基中加入______________。
(3)为验证白色菌落中是否成功导入克隆载体，用EcoRI和SmaI双酶切提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳，结果如下图

   

①据图分析，该突变基因的长度大约为_______________。
②为验证2～8号样品中是否发生了预期突变，随机抽取四组进行测序，并与野生型基因进行对比，结果如图

   

该结果说明______________。
(4)若该突变基因成功表达，则可获得氨基酸定点突变的蛋白质，该工程与基因工程的区别是_____________。