2 . 融合蛋白是指利用基因工程等技术将某种具有生物学活性的功能蛋白分子与其他蛋白融合而产生的新型蛋白，常用于亲和蛋白质纯化和抗体药物的研发。图是原核细胞融合蛋白基因表达载体，科研工作者在启动子Pc下游插入了两个与分离纯化有关的编码序列——谷胱甘肽转移酶基因（GST基因）及凝血蛋白酶切割位点的编码序列。

回答下列问题：
(1)构建基因表达载体时，需要用到的工具有__________。上述融合表达载体中启动子Ptac的作用是____________________。
(2)当外源基因插入后，可表达出由__________（填“二”或“三”）部分序列组成的融合蛋白。
(3)GST对谷胱甘肽有很强的结合能力。将谷胱甘肽固定在琼脂糖树脂上形成亲和层析柱，当表达融合蛋白的全细胞提取物通过层析柱时，__________将吸附在树脂内，其他细胞蛋白先被洗脱出来。接着用含游离的还原型谷胱甘肽的缓冲液将融合蛋白洗脱。最后用__________切割融合蛋白，即可获得纯化的目的蛋白。
(4)Fc融合蛋白由某种具有生物学活性的功能蛋白分子与抗体恒定区的Fc片段融合而成。该类融合蛋白不仅保留了功能蛋白分子的生物学活性，并且还具有一些抗体的性质，如长效半衰期。抗原在血浆中游离时间越久，越容易被蛋白酶降解。
①利用哺乳动物细胞表达Fc融合蛋白比在原核细胞中表达更具优势的理由是____________________。
②目前疫苗设计的关键在于有效活化抗原呈递细胞（APC），APC表面能够表达Fc受体，常利用抗原—Fc融合蛋白作为抗原运载工具，其原因是____________________。

7 . 青贮饲料是指将新鲜秸秆、青草等通过乳酸菌发酵而制成的饲料。它气味酸香、柔软多汁、营养丰富、保存期长，是家畜优良饲料。下列叙述，错误的是（　　）

A．选择糖类含量较高的植物作为青贮原料，保证乳酸菌生长所需的碳源

B．作为青贮的原料应适当切碎、搅拌并通入空气，有利于乳酸菌充分发酵

C．发酵过程中乳酸菌发酵生成乳酸，使pH降低，抑制其它微生物生长

D．经过乳酸菌发酵，大分子有机物被分解为多种小分子物质，易于消化吸收

9 . 类胡萝卜素因众多营养保健功能而具有很高的商业价值与应用前景。现研究人员通过构建含有β-胡萝卜素酮化酶基因bkt的表达载体，转化莱茵衣藻（一种真核绿藻）以提高其类胡萝卜素产量。请回答下列问题：

   

(1)为了同时保留衣藻内源性启动子H-R及终止子RBCS2，应选用限制酶____对质粒pUCBKT-P和pH105进行酶切，原因是____。再利用DNA连接酶将酶切下的基因片段连接成表达载体。
(2)可利用____（填技术）大量扩增bkt基因，该技术需要在添加____离子的缓冲液中扩增基因。若产物中除了目的基因外有其他DNA片段存在，从引物角度考虑，原因可能是____。
(3)用含奇霉素的抗性培养基对转化后的莱茵衣藻进行筛选，因不同种类的绿藻对抗生素敏感浓度不同，所以要设计____的奇霉素进行实验，观察并确定____。
(4)以下是利用某两种限制酶进一步对提取的莱茵衣藻DNA进行单酶切和双酶切后的电泳结果。据此推测，提取的DNA总长度是____bp，两种限制酶切割位点之间的最短距离是____bp。