1 . 酱油起源于我国，至今已有数千年历史。参与酱油酿造过程的微生物主要有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，在众多微生物及其酶系的作用下，大豆、小麦中的蛋白质、脂肪等有机物被分解，最终形成具有特殊色泽和良好风味的酱油。酱油的制作流程及发酵过程中主要微生物的数量变化如图1、图2所示。下列说法错误的是（　　）

A．米曲霉发酵的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，分泌制作酱油所需的蛋白酶、脂肪酶等

B．已知发酵池发酵阶段是密封进行的，此时酵母菌与乳酸菌对氧气的代谢方式可能相同

C．乳酸菌发酵产生的乳酸能抑制杂菌生长，与酵母菌表现为原始合作关系

D．发酵池中加入食盐的主要作用之一是抑制部分有害微生物的生长

2 . 塑料污染是当今世界面临的最紧迫的环境问题之一。中国科学院海洋研究所首次发现能有效降解聚乙烯塑料的海洋真菌及其分泌的有降解聚乙烯效果的酶。某研究学习小组欲从环境中分离高效降解聚乙烯的真菌。下列叙述错误的是（　　）

A．应在富含聚乙烯的环境中采集样本

B．可采用高压蒸汽灭菌法对实验所用培养基进行灭菌

C．选择培养时应以聚乙烯为唯一碳源

D．利用稀释涂布法接种时，稀释倍数越高，越容易得到目标单菌落

4 . 尖孢镰刀菌容易引起番茄枯萎症，对农业造成巨大损失。为研究F基因（目的基因）的功能，科学家利用同源重组交换的原理对F基因敲除，分析其生物学功能及致病力。基因敲除过程是先构建基因敲除载体，将基因敲除载体导入受体细胞，经过筛选找出基因敲除成功的受体细胞。基因敲除原理如下图所示：

注：Hyg^r为潮霉素抗性基因；A、B为实现同源重组交换的序列，C、D、E、G为其他不同的基因片段；1～6为引物。
(1)选取限制酶____、____分别对F基因左右两端A、B片段进行酶切，并用____酶将A、B片段与潮霉素抗性基因连接，构建目的基因敲除载体。同时需要在潮霉素抗性基因前添加启动子，启动子的作用是____。
(2)把构建好的目的基因敲除载体导入尖孢镰刀菌细胞内，导入成功后，将菌液放在含____的固体培养基上培养，使用的接种方法是____。在这一过程中，F基因与潮霉素抗性基因发生同源重组交换，与____（填减数分裂时期）的某些行为类似。
(3)培养完毕，挑取单菌落提取其基因组DNA作为模板，选择引物____进行PCR扩增，其中引物会结合在DNA片段的____（3'或5'）端，扩增30个循环进行电泳，如果没有F基因条带，则确定目的基因敲除成功。
(4)潮霉素抗性基因能够在尖孢镰刀菌中表达的原因是____。

5 . 奶牛的瘤胃中有大量的尿素分解菌。某科研小组利用屠宰场提取的奶牛瘤胃内容物，对其中的尿素分解菌进行分离计数，结果如图，下列分析正确的是（　　）

   

A．培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，可以灭菌后调节培养基的pH

B．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的

C．尿素分解成氨后，培养基中的pH升高，可用酸碱指示剂进行鉴定

D．由图可得，在该操作过程中接种工具至少要灼烧3次

6 . 科研人员创造了一种全新的、能以二氧化碳为碳源合成有机物的大肠杆菌，是自养生物。研究人员将碳固定和还原所需要的基因通过基因工程技术，导入大肠杆菌，同时定向突变了大肠杆菌参与异养代谢的三个酶的基因。再进行选择培养，筛选出能利用甲酸钠被氧化成二氧化碳过程中释放的能量，将二氧化碳和水合成有机物的大肠杆菌。下列说法错误的是（　　）

A．为获得自养的大肠杆菌单菌落，可用平板划线法将菌液接种于固体培养基进行培养

B．进行选择培养时，培养基中不能加有机碳源，该培养基为选择培养基

C．该全新培养的自养大肠杆菌一定能在自然条件下顺利完成合成有机物的过程

D．选择过程中，应该设置不接种菌种、其他条件相同的培养基作为空白对照

7 . 微生物与人类生活有密切的关系，在食品制作、疾病防治、环境保护等方面有着广泛应用，如传统食品中的酒、面包、泡菜、醋、酱油等就是利用微生物发酵而成的，发酵过程中防止杂菌污染至关重要。下列说法正确的是（　　）

A．发酵前，对原料进行高温杀菌可以使原料中的营养物质能更好的被菌种利用

B．家庭酿制葡萄酒时，需要对发酵的原料及发酵容器进行严格灭菌，防止杂菌污染

C．筛选酿醋菌种时，可在培养基中加入一定量的青霉素，防止杂菌污染

D．制作泡菜时，“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的只是彻底灭菌

8 . 糖尿病与认知障碍：胰岛素是体内调节血糖水平的重要激素。研究表明，当脑内出现胰岛素抵抗（IR）时，会影响细胞内的信号传导通路，造成神经元功能障碍，进而引起认知损伤。胰岛素作用的相关机制如图所示。

(1)在血糖调节过程中，与胰岛素存在拮抗作用的激素有____。（编号选填）
①胰高血糖素 ②抗利尿激素③甲状腺素④肾上腺素
(2)结合上图及所学的知识可知，胰岛素与其受体结合后，下列过程可能加快的有____。

A．糖原合成	B．组织细胞摄取葡萄糖
C．脂肪转化为葡萄糖	D．Tau蛋白的磷酸化

(3)胰岛素抵抗是指靶细胞对胰岛素的敏感性下降。可能造成胰岛素抵抗的有____。（编号选填）
①胰岛素受体活性降低②存在胰岛素自身抗体③胰岛素受体数量减少④胰岛素分泌障碍
研究发现，Tau蛋白能与微管蛋白结合形成微管并维持其稳定性，过度磷酸化的Tau蛋白聚集会引起轴突病变，造成神经纤维缠结。同时，β－淀粉样蛋白（Aβ）沉积会引起线粒体的功能障碍，造成神经元损伤和突触丢失。
(4)神经元中Tau蛋白参与形成的细胞结构是____。

A．核糖体

B．细胞骨架

C．高尔基体

D．质膜

(5)Aβ沉积在大脑皮层相关神经元中，会造成大脑皮层弥漫性萎缩，可能发生的现象有____。

A．基本排尿反射丧失	B．痛觉减弱
C．心率减缓	D．肢体僵硬

(6)胰岛素抵抗会引起炎症细胞因子增多，炎症细胞因子会促进核转录因子（NF－kB）信号通路的激活，从而进一步增加促炎基因的转录，放大神经炎症，引起神经元损伤。下列关于炎症反应的叙述正确的是____。

A．巨噬细胞可能参与炎症反应

B．炎症反应属于机体的第一道防线

C．细胞坏死一般不会引起炎症反应

D．神经炎症的放大体现了机体的负反馈调节

肠道益生菌产生的短链脂肪酸（SCFA）具有提高胰岛素敏感性的功能。研究表明，间歇性禁食会重构肠道菌群的比例，从而改善糖尿病引起的认知损伤。相关研究结果如图所示。

注：*代表显著性差异
(7)为了解肠道菌群的变化，需分离和统计粪便悬液中微生物的数量，可采用的接种方法是____。
(8)结合上述材料和所学知识，解释间歇性禁食能改善糖尿病引起的认知损伤机制___________。

9 . 科研人员利用MRS-溴甲酚绿培养基，从传统臭鳜鱼中分离筛选到一株乳酸菌，并研究其对多种微生物的抑菌能力。MRS-溴甲酚绿培养基的配方见下表，乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈，溴甲酚绿为pH显色剂，酸性显示黄色。科研人员分别将含有四种病原菌的培养基倒入A~D四个培养皿中，通过一定的方法使每个培养基上形成4个大小相同的小孔，标号为1~4。1号孔作为对照，2~4号孔中均加入100μL含有该株乳酸菌代谢产物的液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，测量抑菌圈直径，结果如下图。下列叙述正确的是（       ）
MRS-溴甲酚绿培养基配方

物质	胰蛋白胨	葡萄糖	牛肉膏	碳酸钙	酵母粉	溴甲酚绿	番茄汁	琼脂
含量	10g/L	10g/L	10g/L	20g/L	10g/L	0.1g/L	200g/L	18g/L

A．分离筛选乳酸菌时，应选择具有溶钙圈的黄色菌落继续培养

B．应向1号孔中加入100μL无菌水作为对照

C．传统臭鳜鱼不容易变质与乳酸菌能抑制多种微生物的增殖有关

D．该株乳酸菌代谢产物对四种病原菌都有抑制作用，但对丁香假单胞菌的抑制效果最好

10 . 鸡蛋表面污染的细菌会逐渐侵入蛋内，缩短鸡蛋保质期。对某地不同季节及不同养殖模式下生产的鸡蛋取样，按每克鸡蛋用1mL无菌生理盐水清洗鸡蛋表面，收集清洗液，培养计数结果如下表。相关叙述正确的是（　　）

季节	菌落数（个·g-1）
	半封闭式养殖模式	全封闭式养殖模式
夏季	3.92×104	7.24×103
冬季	7.60×104	1.24×104

A．稀释涂布平板法得到的鸡蛋表面菌落数比实际数略少

B．表中数据是对清洗液稀释1×103倍后涂布平板获得的

C．比较两种养殖模式可知鸡蛋表面的细菌主要来自环境

D．冬季鸡舍更需要消毒以减少鸡蛋表面的细菌污染